【技术实现步骤摘要】
具有抗氧化剂的细胞培养组合物和多肽生产方法本申请是申请日为2014年3月14日的、专利技术名称为“具有抗氧化剂的细胞培养组合物和多肽生产方法”的中国专利申请201480014227.X(PCT/US2014/029772)的分案申请。相关专利申请的交叉引用本申请要求2013年3月15日递交的美国临时申请系列号61/799,602的优先权,其内容特此完整地并入此处作为参考。专利
本专利技术涉及包括抗氧化剂的细胞培养基,使用该培养基进行细胞培养和多肽生产的方法,以及包括由本文提供的方法所生产的多肽的组合物和试剂盒。
技术介绍
细胞培养生产技术被广泛用于生产基于蛋白质的产品,如治疗性蛋白质的药物制剂。基于蛋白质的产品,例如抗体产品的商业化生产,需要优化细胞培养参数,以便细胞产生足够的蛋白质产品来满足生产要求。然而,当优化细胞培养参数以提高蛋白质产品的生产率时,还需要保持该产品的期望品质属性,如糖基化谱,聚集物水平,电荷异质性以及氨基酸序列完整性(Lietal.,mAbs,2010,2(5):466-477)。另一个值得关注的品质属性是蛋白质产品的颜色。对于供人类使用的治疗产品的液体制剂,必须满足有关可接受颜色水平的监管要求(UnitedStatesPharmacopoeiaInc.,2000,p.1926-1927和CouncilofEurope.EuropeanPharmacopoeia,2008,7thEd.p.22)。因此,生产具有可接受的颜色的蛋白产品是治疗性蛋白生产的一个重要方面。 ...
【技术保护点】
1.培养包含编码多肽的核酸的细胞的方法,其中所述方法包括使细胞与细胞培养基接触的步骤,其中所述细胞培养基包含组分(a)-(j)之一种或多种:/n(a)牛磺酸;/n(b)s-羧甲基半胱氨酸;/n(c)肌肽;/n(d)鹅肌肽;/n(e)丁基化羟基苯甲醚;/n(f)硫辛酸;/n(g)槲皮苷水合物;/n(h)氨基胍;/n(i)半胱胺;和/n(j)半胱亚磺酸/n并且其中相比于包含在不含所述组分(a)-(j)之一种或多种的细胞培养基中培养的细胞所生产的多肽的组合物,包含组分(a)-(j)之一种或多种的细胞培养基降低包含细胞所生产的多肽的组合物的颜色强度。/n
【技术特征摘要】
20130315 US 61/799,6021.培养包含编码多肽的核酸的细胞的方法,其中所述方法包括使细胞与细胞培养基接触的步骤,其中所述细胞培养基包含组分(a)-(j)之一种或多种:
(a)牛磺酸;
(b)s-羧甲基半胱氨酸;
(c)肌肽;
(d)鹅肌肽;
(e)丁基化羟基苯甲醚;
(f)硫辛酸;
(g)槲皮苷水合物;
(h)氨基胍;
(i)半胱胺;和
(j)半胱亚磺酸
并且其中相比于包含在不含所述组分(a)-(j)之一种或多种的细胞培养基中培养的细胞所生产的多肽的组合物,包含组分(a)-(j)之一种或多种的细胞培养基降低包含细胞所生产的多肽的组合物的颜色强度。
2.权利要求1的方法,其中相比于包含在不含所述组分(a)-(j)之一种或多种的细胞培养基中培养的细胞所生产的多肽的组合物,包含组分(a)-(j)之一种或多种的细胞培养基使包含细胞所生产的多肽的组合物的颜色强度降低至少约0.1%。
3.权利要求1的方法,其中相比于包含在不含所述组分(a)-(j)之一种或多种的细胞培养基中培养的细胞所生产的多肽的组合物,包含组分(a)-(j)之一种或多种的细胞培养基使包含细胞所生产的多肽的组合物的颜色强度降低约5%至约75%。
4.权利要求1-3中任一项的方法,其中包含组分(a)-(j)之一种或多种的细胞培养基以选自以下的量包括所述组分(a)-(j)之一种或多种:
(a)至少约0.0001mM的浓度的牛磺酸;
(b)至少约0.0001mM的浓度的s-羧甲基半胱氨酸;
(c)至少约0.0001mM的浓度的肌肽;
(d)至少约0.0001mM的浓度的鹅肌肽;
(e)至少约0.0001mM的浓度的丁基化羟基苯甲醚;
(f)至少约0.0001mM的浓度的硫辛酸;
(g)至少约0.0001mM的浓度的槲皮苷水合物;
(h)至少约0.0003mM的浓度的氨基胍;
(i)至少约0.0001mM的浓度的半胱胺;和
(i)至少约0.0001mM的浓度的半胱亚磺酸。
5.权利要求4的方法,其中细胞培养基包含约0.0001mM至约500.0mM浓度的牛磺酸。
6.权利要求4的方法,其中细胞培养基包含约1.0mM至约40.0mM浓度的牛磺酸。
7.权利要求4的方法,其中细胞培养基包含约1.0mM至约10.0mM浓度的牛磺酸。
8.权利要求4-7中任一项的方法,其中细胞培养基包含约8.0mM至约12.0mM浓度的s-羧甲基半胱氨酸。
9.权利要求4-8中任一项的方法,其中细胞培养基包含约8.0mM至约12.0mM浓度的肌肽。
10.权利要求4-9中任一项的方法,其中细胞培养基包含约3.0mM至约5.0mM浓度的鹅肌肽。
11.权利要求4-10中任一项的方法,其中细胞培养基包含约0.025mM至约0.040mM浓度的丁基化羟基苯甲醚。
12.权利要求4-11中任一项的方法,其中细胞培养基包含约0.040mM至约0.060mM浓度的硫辛酸。
13.权利要求4-12中任一项的方法,其中细胞培养基包含约0.010mM至约0.020mM浓度的槲皮苷水合物。
14.权利要求4-13中任一项的方法,其中细胞培养基包含约0.0003mM至约10mM浓度的氨基胍。
15.权利要求4-14中任一项的方法,其中细胞培养基包含约0.0001mM至约500.0mM浓度的半胱胺。
16.权利要求4-15中任一项的方法,其中细胞培养基包含约1.0mM至约40.0mM浓度的半胱胺。
17.权利要求4-16中任一项的方法,其中细胞培养基包含约1.0mM至约10.0mM浓度的半胱胺。
18.权利要求4-17中任一项的方法,其中细胞培养基包含约0.0001mM至约500.0mM浓度的半胱亚磺酸。
19.权利要求4-18中任一项的方法,其中细胞培养基包含约1.0mM至约40.0mM浓度的半胱亚磺酸。
20.权利要求4-19中任一项的方法,其中细胞培养基包含约1.0mM至约10.0mM浓度的半胱亚磺酸。
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【专利技术属性】
技术研发人员:N·维贾亚桑克兰,S·J·迈耶,S·瓦尔马,Y·杨,
申请(专利权)人:豪夫迈·罗氏有限公司,
类型:发明
国别省市:瑞士;CH
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