培养基添加用组合物及培养基添加用化合物以及使用了它们的细胞或组织的培养方法技术

本发明专利技术提供培养基添加用组合物，其包含下述式(I)表示的化合物、或其盐。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】培养基添加用组合物及培养基添加用化合物以及使用了它们的细胞或组织的培养方法
本专利技术涉及培养基添加用组合物等，详细而言，涉及用于促进细胞增殖的培养基添加用组合物等、以及特征在于使用该培养基添加用组合物等的细胞或组织的培养方法。
技术介绍
近年来，以解释清楚生命现象的作用机理、确立疾病的治疗方法等为目的，在以生命科学领域为代表的许多领域中极其频繁地实施使用了细胞的实验。例如，作为创新药物领域中的一例，有使候选化合物作用于作为治疗靶标的癌细胞、筛选能抑制癌细胞增殖的化合物的方法。该筛选中，存在对数万种候选化合物进行筛选的情况，在这样的方式中需要准备大量均质的细胞。但是，就人等高等生物的细胞而言，即使是分裂较快的细胞也需要1天左右的时间，并且，癌细胞、干细胞中还存在1次细胞分裂所需要的时间达数月以上的细胞，这成为妨碍迅速筹备细胞的主要原因。基于上述背景，需求构建能对分裂慢的细胞的增殖进行促进的手段，例如，报道了具有特定结构的硫醇化合物促进造血前体细胞的增殖；聚戊二烯(Polyprenyl)类化合物促进肝细胞的增殖；等等(专利文献1、2)。另一方面，创新药物筛选的领域中，近年来，细胞的三维培养受到瞩目。三维培养是介于体外与体内的中间的细胞培养技术。三维培养中，细胞能形成球体(sphere)(也称为球(spheroid))等立体结构，因此，较之通常的二维培养而言，能够进行更接近于生物体的分析。因此，三维培养有可能得以对使用了二维培养的创新药物筛选所无法确定的疾病治疗用化合物进行确定(非专利文献1)。<br>现有技术文献专利文献专利文献1：日本特表平11-504000号公报专利文献2：国际公开第2008/155920号非专利文献非专利文献1：SusanBreslin，DrugDiscoveryToday，2013年，第18卷，第5号，p.240-249
技术实现思路
专利技术所要解决的课题本专利技术的目的为提供能在细胞培养(尤其是三维细胞培养)中促进细胞增殖的新型化合物。用于解决课题的手段本申请专利技术人针对上述课题深入研究，结果发现，本次新合成的化合物能够极其良好地促进三维培养下的各种细胞的增殖，基于上述见解进一步进行研究，从而完成了本专利技术。即，本专利技术如下所述。[1]培养基添加用组合物，其包含下述式(I)表示的化合物、或其盐：[化学式1]{式中，X为单键、-CH2COO-、-CONH-、或-NHCO-，R1为可具有取代基的碳原子数1～10的烷基、可具有取代基的芳基、或-Y-W-Z-Ar(式中，Y、及Z为单键、或可具有取代基的碳原子数1～6的亚烷基，W为氧原子、硫原子或N(R4)，R4为氢原子或碳原子数1～6的烷基，Ar为可具有取代基的芳基。)，R2为可具有取代基的碳原子数1～6的烷基，R3为羟基，n为0、1或2。}[2]如[1]所述的组合物，其中，X为-NHCO-。[3]如[1]或[2]所述的组合物，其中，R2为碳原子数1～6的烷基，n为0。[4]如[1]～[3]中任一项所述的组合物，其中，R1为-Y-W-Z-Ar，Y为可具有碳原子数1～6的烷基的亚甲基，W为N(R4)，Z为单键，Ar为可具有卤素原子、羟基、碳原子数1～6的烷基或碳原子数1～6的烷氧基的芳基。[5]如[4]所述的组合物，其中，芳基为苯基。[6]如[1]～[3]中任一项所述的组合物，其中，R1为-Y-W-Z-Ar，Y为单键，W为N(R4)，R4为氢原子，Z为单键或可具有碳原子数1～6的烷基的亚甲基，Ar为可具有卤素原子、羟基、碳原子数1～6的烷基或碳原子数1～6的烷氧基的芳基。[7]如[6]所述的组合物，其中，芳基为苯基。[8]如[6]或[7]所述的组合物，其中，Z为亚甲基。[9]如[1]～[3]中任一项所述的组合物，其中，R1为-Y-W-Z-Ar，Y为单键，W为氧原子，Z为可具有碳原子数1～6的烷基的亚甲基，Ar为可具有卤素原子、羟基、碳原子数1～6的烷基或碳原子数1～6的烷氧基的芳基。[10]如[9]所述的组合物，其中，芳基为苯基，Z为亚甲基。[11]如[1]～[5]中任一项所述的组合物，其中，化合物为选自由以下组成的组中的化合物或其盐，[化学式2][化学式3][化学式4][化学式5][化学式6][化学式7]及[化学式8][12]如[1]～[3]、[6]、及[7]中任一项所述的组合物，其中，化合物为选自由以下组成的组中的化合物或其盐，[化学式9][化学式10][化学式11]及[化学式12][13]如[1]～[3]、[9]及[10]中任一项所述的组合物，其中，化合物为以下所示的化合物或其盐，[化学式13][14]如[1]～[13]中任一项所述的组合物，其用于促进细胞增殖。[15]如[14]所述的组合物，细胞选自由正常细胞株、癌细胞株及干细胞组成的组。[16]如[15]所述的组合物，正常细胞株为来源于非洲绿猴肾上皮的细胞(Vero细胞)、狗肾小管上皮细胞(MDCK细胞)、来源于中国仓鼠卵巢的细胞(CHO-K1)、人脐静脉内皮细胞(HUVEC)或小鼠胚胎成纤维细胞(C3H10T1/2)。[17]如[15]所述的组合物，癌细胞株为选自由来源于人卵巢癌的细胞株SKOV3、来源于人宫颈癌的细胞株HeLa、来源于人恶性黑色素瘤的细胞株A375、来源于人上皮样细胞癌的细胞株A431、来源于人胃腺癌的细胞株AGS、来源于人前列腺癌的细胞株LNCapcloneFGC、来源于人结肠腺癌的细胞株HCT116、来源于人肺泡基底上皮腺癌的细胞株A549、及来源于人前列腺癌的细胞DU145组成的组中的1种以上。[18]如[15]所述的组合物，其中，干细胞为人人工多能干细胞(iPS细胞)或人间充质干细胞(MSC)。[19]如[1]～[13]中任一项所述的组合物，其用于促进球体形成、类器官形成、或Cyst形成。[20]如[19]所述的组合物，球体为癌细胞株、人人工多能干细胞(iPS细胞)或人间充质干细胞(MSC)。[21]如[19]所述的组合物，类器官为来源于小肠的细胞。[22]如[19]所述的组合物，Cyst为来源于肾脏的细胞。[23]培养基，其包含[1]～[13]中任一项所述的培养基添加用组合物。[24]如[23]所述的培养基，其用于促进细胞增殖。[25]如[23]或[24]所述的培养基，其是三维细胞培养培养基。[26]如[23]所述的培养基，其用于促进球体形成、类器官形成、或Cyst形成。[27]促进细胞增殖的方法，其包括向培养基添加[1]～[13]中任一项所述的培养基添加用组合物。<本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.培养基添加用组合物，其含有下述式(I)表示的化合物、或其盐：/n[化学式1]/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170728 JP 2017-147071;20171213 JP 2017-2391021.培养基添加用组合物，其含有下述式(I)表示的化合物、或其盐：
[化学式1]



式中，X为单键、-CH2COO-、-CONH-、或-NHCO-；R1为可具有取代基的碳原子数1～10的烷基、可具有取代基的芳基、或-Y-W-Z-Ar，式中，Y、及Z为单键、或可具有取代基的碳原子数1～6的亚烷基，W为氧原子、硫原子或N(R4)，R4为氢原子或碳原子数1～6的烷基，Ar为可具有取代基的芳基；R2为可具有取代基的碳原子数1～6的烷基；R3为羟基；n为0、1或2。


2.如权利要求1所述的组合物，其中，X为-NHCO-。


3.如权利要求1或2所述的组合物，其中，R2为碳原子数1～6的烷基，n为0。


4.如权利要求1～3中任一项所述的组合物，其中，R1为-Y-W-Z-Ar，Y为可具有碳原子数1～6的烷基的亚甲基，W为N(R4)，Z为单键，Ar为可具有卤素原子、羟基、碳原子数1～6的烷基或碳原子数1～6的烷氧基的芳基。


5.如权利要求4所述的组合物，其中，芳基为苯基。


6.如权利要求1～3中任一项所述的组合物，其中，R1为-Y-W-Z-Ar，Y为单键，W为N(R4)，R4为氢原子，Z为单键或可具有碳原子数1～6的烷基的亚甲基，Ar为可具有卤素原子、羟基、碳原子数1～6的烷基或碳原子数1～6的烷氧基的芳基。


7.如权利要求6所述的组合物，其中，芳基为苯基。


8.如权利要求6或7所述的组合物，其中，Z为亚甲基。


9.如权利要求1～3中任一项所述的组合物，其中，R1为-Y-W-Z-Ar，Y为单键，W为氧原子，Z为可具有碳原子数1～6的烷基的亚甲基，Ar为可具有卤素原子、羟基、碳原子数1～6的烷基或碳原子数1～6的烷氧基的芳基。


10.如权利要求9所述的组合物，其中，芳基为苯基，Z为亚甲基。


11.如权利要求1～5中任一项所述的组合物，其中，化合物为选自由以下组成的组中的化合物或其盐，
[化学式2]



[化学式3]



[化学式4]



[化学式5]



[化学式6]



[化学式7]



及
[化学式8]





12.如权利要求1～3、6、及7中任一项所述的组合物，其中，化合物为选自由以下组成的组中的化合物或其盐，
[化学式9]



[化学式10]



[化学式11]



及
[化学式12]





13.如权利要求1～3、9及10中任一项所述的组合物，其中，化合物为以下所示的化合物或其盐，
[化学式13]





14.如权利要求1～13中任一项所述的组合物，其用于促进细胞增殖。


15.如权利要求14所述的组合物，细胞选自由正常细胞株、癌细胞株及干细胞组成的组。


16.如权利要求1～13中任一项所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：西野泰斗，相原彩子，大冢敬一朗，猿桥康一郎，三岛巧，灶浦政宏，
申请(专利权)人：日产化学株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP