一种新型的来源于地衣芽孢杆菌的碱性蛋白酶酸性突变体制造技术

本发明专利技术提供一种新型的碱性蛋白酶突变体，以来源于地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)碱性蛋白酶基因subC为基础，通过定点突变PCR技术获得了2个碱性蛋白酶突变体subCMpH1和subCMpH2，并分别构建了表达上述突变体的重组菌枯草芽孢杆菌，其发酵上清液酶活在pH 6条件下酶活水平分别为3675U/mL和3767U/mL，比表达野生型碱性蛋白酶subC的枯草芽孢杆菌在同等条件下的酶活水平(1198U/mL)有了显著的提高。

A novel acid mutant of alkaline protease from Bacillus licheniformis

【技术实现步骤摘要】
一种新型的来源于地衣芽孢杆菌的碱性蛋白酶酸性突变体
本专利技术属于蛋白中工程改造领域，具体涉及一种新型的碱性蛋白酶突变体蛋白。
技术介绍
碱性蛋白酶(alkalineprotease)指在碱性条件下(pH在9～11范围内)能够水解蛋白质肽键的酶，其主要成分是一种内切蛋白酶，催化部位为丝氨酸，广泛应用于洗涤剂、食品、医疗、酿造、丝绸、制革等行业。目前所采用的碱性蛋白酶多是经细菌原生质体诱变方法造育的来源于枯草芽孢杆菌2709通过深层发酵、提取及精制而成的一种蛋白水解酶，属于一种丝氨酸碱性蛋白酶，它能水解蛋白质分子肽链生成多肽或氨基酸，具有较强的分解蛋白质的能力。生产工艺是采用微滤超滤膜分离、喷雾干燥或真空冷冻干燥等先进技术。碱性蛋白酶是目前市场上流行的洗涤添加剂，能大幅度提高洗涤去污能力，特别对血渍、汗渍、奶渍、油渍等蛋白类污垢,具有独特的洗涤效果，，是工业用酶中占据比例最大的酶类，约占全世界每年总销售量的60％左右。定点突变是指通过聚合酶链式反应(PCR)等方法向编码目的蛋白的DNA片段(可以是基因组，也可以是质粒)中引入所需变化(通常本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种碱性蛋白酶突变体，其特征在于所述的碱性蛋白酶突变体的第331位氨基酸由Val变为Ile，突变体氨基酸序列为SEQ ID NO:2。/n

【技术特征摘要】
1.一种碱性蛋白酶突变体，其特征在于所述的碱性蛋白酶突变体的第331位氨基酸由Val变为Ile，突变体氨基酸序列为SEQIDNO:2。


2.一种碱性蛋白酶突变体，其特征在于，所述的碱性蛋白酶突变体是权利要求1所述的碱性蛋白酶突变体的第339位氨基酸由Leu变为His，突变体氨基酸序列为SEQIDNO:3。


3.一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：张大伟，付刚，
申请(专利权)人：中国科学院天津工业生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：天津;12