一种培育抗TYLCV病毒的番茄的方法、载体及其应用技术

本发明专利技术提供一种培育抗TYLCV病毒的番茄的方法，包括：1)提供包含核酸内切酶系统的编码序列的DNA序列，其中所述核酸内切酶系统包括导向部分和核酸内切酶活性部分，所述核酸内切酶活性部分本身不具有识别特定核酸序列的功能，其在所述导向部分的作用下能够特异性地切断TYLCV病毒的DNA分子；以及2)通过转基因方法将包含核酸内切酶系统的编码序列的DNA插入番茄的基因组中，使所述番茄表达所述核酸内切酶系统，从而使所述番茄获得抗TYLCV病毒的能力。本发明专利技术还提供了在所述方法中使用的载体和该载体的应用。使用本发明专利技术的方法成功地获得了具有抗TYLCV病毒的能力的番茄品种。

A method, vector and application of cultivating tomato resistant to TYLCV

【技术实现步骤摘要】
一种培育抗TYLCV病毒的番茄的方法、载体及其应用本申请是申请日为2016年6月29日，专利技术名称为“一种培育抗TYLCV病毒的番茄的方法、载体及其应用”的中国专利申请No.2016105141842的分案申请。
本专利技术属于植物基因工程领域，具体而言，涉及培育抗TYLCV病毒的番茄的方法、载体及其应用。
技术介绍
番茄(LycopersiconesculentumMill.)是大众喜欢的重要蔬菜，但在番茄生长过程中极其容易感染番茄黄化曲叶病毒(Tomatoyellowleafcurlvirus，TYLCV)。TYLCV属于双生病毒科(Geminiviridae)菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)病毒，病毒基因组是一个2.7-2.8kb的单链环状DNA，有时还伴有卫星病毒。番茄感染病毒后的症状主要表现为叶片上卷、叶缘及叶脉之间黄化，最后会表现出叶片变小、植株矮化等症状。TYLCV在我国及世界番茄产区广泛流行，对番茄的产量和品质影响极大，经常给番茄生产造成严重的损失，甚至造成绝产绝收。TYLCV在自然条件下通过烟粉虱(Bem本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种培育抗TYLCV病毒的番茄的方法，包括：/n1)提供包含核酸内切酶系统的编码序列的DNA序列，其中所述核酸内切酶系统包括导向部分和核酸内切酶活性部分，所述核酸内切酶活性部分本身不具有识别特定核酸序列的功能，其在所述导向部分的作用下能够特异性地切断TYLCV病毒的DNA分子；以及/n2)通过转基因方法将包含所述核酸内切酶系统的编码序列的DNA插入番茄的基因组中，使所述番茄表达所述核酸内切酶系统，从而使所述番茄获得抗TYLCV病毒的能力，/n其中所述核酸内切酶系统为CRISPR/Cas9系统。/n

【技术特征摘要】
1.一种培育抗TYLCV病毒的番茄的方法，包括：
1)提供包含核酸内切酶系统的编码序列的DNA序列，其中所述核酸内切酶系统包括导向部分和核酸内切酶活性部分，所述核酸内切酶活性部分本身不具有识别特定核酸序列的功能，其在所述导向部分的作用下能够特异性地切断TYLCV病毒的DNA分子；以及
2)通过转基因方法将包含所述核酸内切酶系统的编码序列的DNA插入番茄的基因组中，使所述番茄表达所述核酸内切酶系统，从而使所述番茄获得抗TYLCV病毒的能力，
其中所述核酸内切酶系统为CRISPR/Cas9系统。


2.根据权利要求1所述的方法，其中所述CRISPR/Cas9系统包括与TYLVC病毒DNA中的片段互补的gRNA作为所述导向部分、以及CRISPR/Cas9核酸酶作为所述核酸内切酶活性部分。


3.根据权利要求1所述的方法，其中所述CRISPR/Cas9系统包括与TYLVC病毒的正链DNA中的片段互补的一种或多种gRNA。


4.根据权利要求1所述的方法，其中所述CRISPR/Cas9系统包括与TYL...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈克贵，彭梅芳，高永峰，范晓丽，纳顺贵，
申请(专利权)人：成都依农农业科技有限公司，四川省农业科学院生物技术核技术研究所，
类型：发明
国别省市：四川;51