防治番茄黄化曲叶病毒病的生防菌株1BQN14 及其应用制造技术

技术编号:8526712 阅读:167 留言:0更新日期:2013-04-04 07:35
本发明专利技术属于蔬菜病害防控技术领域,涉及防治番茄黄化曲叶病毒病的生防菌株1BQN14及其应用。一种防治番茄黄化曲叶病毒病的生防菌株1BQN14,于2012年2月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,菌种保藏号为CGMCC?NO.5803。该菌株可在制备防治番茄黄化曲叶病毒病的药物中应用。该菌株的生防菌剂稀释至1×107-1×108CFU/ml浓度时使用,对番茄黄化曲叶病毒病的防效为50.11-55.38%,病田增产效果为14.56%-19.26%。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于蔬菜病害防控
,涉及防治番茄黄化曲叶病毒病的生防菌株1BQN14及其应用。
技术介绍
番茄黄化曲叶病毒 病现在已成为限制我国番茄生产的重要病害之一,被称为植物病害的“癌症”。该病害是由双生病毒科(Geminiviridae)菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)的番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)引起的,并通过烟粉虱传播。与其他病毒病相比,番茄黄化曲叶病毒病具有爆发突然、发病凶猛、扩展迅速、危害性强、治疗难度大的特点,发病后没有很好的药剂防治。番茄是我国重要的经济作物,20世纪90年代,番茄黄化曲叶病毒病在我国广西、云南、海南和台湾等地区零星发生。近年来,该病在我国已逐步由南向北急速蔓延。现在除湖南,青海,黑龙江,甘肃等少数省份没有发现该病毒病外,其余各地均有发生,给当地番茄生产造成了极其严重的损失。据不完全统计,目前我国番茄黄化曲叶病毒病的年发生面积超过6. 7万hm2,经济损失超过20亿元。目前市面上的化学药剂对该病毒病均没有较好的防治效果,同时大量使用化学药剂往往会造成环境污染、农药残留等问题。培育抗病品虽然是防治番茄黄化曲叶病毒病的最好途径,但是由于番茄黄化曲叶病毒病的抗性遗传较复杂,抗源材料不同,其抗性遗传规律也不同,有的抗源材料的抗性属于不完全显性的单基因控制,有的属于数量性状,有的属于显性单基因。不同抗性材料之间进行组合,其基因互作效应不同,有正协同、负协同效应或无效应。因此鉴于遗传机理和背景的复杂性,很难选育出抗性稳定的育种品系。综上所述,开发新的、更为高效和安全的微生物制剂控制番茄黄化曲叶病毒病的发生是提高社会生产总量的需要,同时更是农业安全及可持续发展的需要,符合社会发展需求。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术中没有对番茄黄化曲叶病毒病有较高防效的生防制剂的现状,提供一种防治番茄黄化曲叶病毒病的单一生防菌菌株及其菌剂。本专利技术的另一目的是提供该菌株的应用。本专利技术的目的可通过如下技术方案实现一种防治番茄黄化曲叶病毒病的生防菌株1BQN14,分类命名为Enterobacterasburiae,于2012年2月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,菌种保藏号为CGMCC NO. 5803。生防菌株1BQN14用于制备生防菌剂的方法为将阿氏肠杆菌1BQN14的种子菌液以1: 500体积比接种至LB发酵培养液中发酵培养,280C、180rpm培养48h,然后6000rpm离心lOmin,用灭菌水进行稀释制成菌剂,菌剂成品中活菌总浓度为IX IO9-1X 101(lCFU/mL。所述的保藏号为CGMCC NO. 5803的阿氏肠杆菌1BQN14种子菌液制备方法为将保藏号为CGMCC NO. 5803的阿氏肠杆菌1BQN14菌株接种到LB培养液中28°C培养180rpm振荡培养至600nm处的OD值为0. 8时结束培养。所述的保藏号为CGMCC NO. 5803的生防菌株1BQN14在制备防治番茄黄化曲叶病毒病的药物中的应用。所述的生防菌剂在防治番茄黄化曲叶病毒病中的应用。所述的生防菌剂稀释100-1000倍后在番茄移栽时进行灌根和喷雾处理,15天为一个间隔周期共处理2次,发病时开始统计病情。阿氏肠杆菌1BQN14对番茄黄化曲叶病毒病的防效为50. 11-55. 38%。有益效果 本专利技术是专门针对番茄黄化曲叶病毒病开发的生防制剂。由于是生物制剂,完全没有因化学农药的使用所带来的一系列问题,因而有利于蔬菜的无公害生产,农民可以不用或减少其他化学农药的用量,这不仅可为农民节省开支,而且减少化学药剂的残留,有利于蔬菜的出口。温室实验表明该阿氏肠杆菌1BQN14 (CGMCC NO. 5803)能显著降低番茄黄化曲叶病毒病的发生。利用该菌制备的生防菌剂稀释100倍在移栽时进行灌根和喷雾处理,在温室条件下对番茄黄化曲叶病毒病的生防效果可以达55. 38%。生物样品保藏信息一种阿氏肠杆菌1BQN14,分类命名为Enterobacter asburiae,于2012年2月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),保藏地址为北京市朝阳区北辰西路I号院3号,中国科学院微生物研究所,菌种保藏号为CGMCC NO. 5803。具体实施例方式实施例1筛选方法阿氏肠杆菌1BQN14 (CGMCC NO. 5803)由江苏省连云港市沙河镇番茄大棚内的番茄根围分离到的。将番茄根组织切成Icm的小片,用1%的次氯酸钠浸泡5min,70%酒精浸泡l_2min,无菌水清洗3次(取最后一次清洗的溶液100 U I涂于R2A固体培养基上培养,若48h后无菌生长则认为表面消毒干净,无菌)。取3g消毒好的样品置于菌研钵中,加入27ml无菌的0. 85%NaCl,浸软组织,研磨,用无菌的0. 85%NaCl梯度稀释。取lO'lO—2、10_3三个梯度的稀释液各IOOiU涂于R2A上,28° C培养48h。挑取最大的单菌落接种到新鲜R2A固体培养基,经反复转接得到纯化菌株。将纯化后的菌株用40%甘油保存于-70° C超低温冰箱中。鉴定方法通过形态特征,生理生化实验和16S rDNA序列分析对该菌株进行鉴定。形态学特征杆状,周鞭毛,菌落光滑,成淡黄色。生理生化特征1BQN14菌株生理生化特征本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种防治番茄黄化曲叶病毒病生防菌株1BQN14,分类命名为Enterobacter?asburiae,2012年2月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,菌种保藏号为CGMCCNO.5803。

【技术特征摘要】
1.一种防治番茄黄化曲叶病毒病生防菌株1BQN14,分类命名为Enterobacterasburiae, 2012年2月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,菌种保藏号为 CGMCCN0. 5803。2.用权利要求1所述的保藏号为CGMCCNO. 5803的生防菌株1BQN14制备的生防菌剂。3.用权利要求1所述的保藏号为CGMCCNO. 5803的生防菌株1BQN14制备生防菌剂的方法,其特征在于将权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘红霞郭坚华丁雪玲
申请(专利权)人:南京农业大学
类型:发明
国别省市:

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