【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物，具体涉及一株n-甲基吡咯烷酮降解菌株、菌剂及其应用。
技术介绍
1、苯胺常温下为无色或微黄色的油状液体，具有强烈的刺激性气味，稍溶于水，易溶于有机溶剂，被广泛应用于国防、橡胶、印染、医药、农药和化工等领域。由于苯胺废水中苯胺类物质浓度高、盐分含量高、cod变化明显、毒性强，难降解，已成为工业废水处理一大难题。现有苯胺废水处理技术主要包括物理技术、化学技术、生物技术三类。其中，生物技术具有能耗低、成本低、二次污染小等优点。但由于苯胺废水性质复杂、毒性高以及可生化性差的特性，致使生物处理系统难以稳定运行且效率较低。因此，亟需寻找能够耐受苯胺生物毒性且具有高效降解苯胺功能的菌株。
2、另一方面，微生物作为天然的细胞工厂可利用不同底物如淀粉、甘油、葡萄糖和纤维素等生产氨基酸、微生物多糖以及可降解生物塑料-聚羟基丁酸酯（polyhydroxybutyrate，phb）等。phb作为微生物合成的一种胞内聚酯，是生物体内碳源和能源的储存物质，由于具有类似于传统石油基塑料的理化特性及其所不具备的生物降解性与生物相容性等，被认为是一种完全可降解的新型生物材料，在包装材料、组织工程材料、缓释材料、电学材料等多个领域有着广泛应用前景。然而，phb的生产成本较高，尤其是发酵过程的灭菌成本，限制了其大规模的生产和应用。因此，筛选具有耐污染能力的phb合成菌株，削减其生物合成过程中的灭菌成本是目前亟待解决的问题。
技术实现思路
1、为解决现有技术的不足，本专利技术的目的在于提
2、为了实现上述目标，本专利技术采用如下的技术方案：
3、一株兼具苯胺降解及聚羟基丁酸酯合成能力的菌株，菌株为贪铜菌（ cupriavidus sp.cy-1），于2024年1月8日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no : m2024035。
4、一种利用菌株制备的菌剂。
5、前述菌株或前述菌剂在降解废水中苯胺中的应用，废水的温度为25～35℃，ph6.0～8.0，nacl浓度为0~10 g/l。
6、前述菌株或前述菌剂在合成聚羟基丁酸酯中的应用。
7、一种菌剂的制备方法，包括以下具体步骤：于lb平板上挑取菌株cy-1，接种到无菌的lb液体培养基中，振荡培养，获得苯胺降解菌剂。
8、菌株合成聚羟基丁酸酯的方法包括如下步骤：s1、种子液的制备：将菌株cy-1接种至lb液体培养基中，振荡培养，得到菌液；将菌液离心脱去lb液体，并以无菌水重悬菌体，得到种子液；
9、s2、聚羟基丁酸酯的合成：将种子液接种至发酵培养基中，摇瓶发酵，得到发酵液；
10、s3、聚羟基丁酸酯的提取：将发酵液离心，弃去上清液，收集菌体并冷冻干燥；将干燥后的菌体加入至次氯酸钠和三氯甲烷的混合溶液中，充分振荡，离心，取下层溶液，干燥，获得聚羟基丁酸酯。
11、优选地，前述lb液体培养基的组分为：蛋白胨10 g/l、牛肉膏5 g/l、氯化钠5 g/l，剩余为纯水；培养条件为：培养温度25~35℃，培养时间20~24 h，转速150~250 rpm/min。
12、优选地，前述步骤s2中，聚羟基丁酸酯的合成条件为非灭菌条件，种子液的接种量为4%~8%（v/v）。
13、优选地，前述步骤s3中，混合溶液的体积浓度为15%~25%，次氯酸钠和三氯甲烷的体积比为（0.5~1.5）：（2.5~3.5）。
14、优选地，前述步骤s2中，发酵培养基的组分为：果糖5g/l、苯胺0.22~0.55 g/l、na2hpo4•12h2o 9 g/l、kh2po41.5 g/l、mgso4•7h2o 0.2 g/l、h3bo30.3 g/l、cocl2•6h2o 0.2g/l、znso4•7h2o 0.1 g/l、mnso4•5h2o 0.03 g/l、(nh4)6mo7o24•4h2o 0.03 g/l、nicl2•6h2o0.02 g/l、cuso4•5h2o 0.01 g/l；培养条件为：培养温度25~35℃，培养时间70~75h，转速150~250 rpm/min。
15、本专利技术的有益之处在于：本专利技术提供的菌株可高效降解废水中的苯胺，该菌株还能以苯胺为唯一氮源，在降解苯胺的过程中同步完成聚羟基丁酸酯的合成，贪铜菌cy-1能以苯胺为氮开关，在非灭菌的条件下，实现聚羟基丁酸酯的高效合成，显著降低了聚羟基丁酸酯的生产成本，具有较大的经济优势和良好的工业应用前景；本专利技术构建了聚羟基丁酸酯的半连续发酵工艺，该工艺通过向发酵培养基中连续补加含苯胺，实现了苯胺的快速降解以及聚羟基丁酸酯的高效合成。
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1.一株兼具苯胺降解及聚羟基丁酸酯合成能力的菌株，其特征在于，所述菌株为贪铜菌（Cupriavidus sp. CY-1），于2024年1月8日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO : M 2024035。
2.一种利用权利要求1所述的菌株制备的菌剂。
3.权利要求1所述的菌株或权利要求2所述的菌剂在降解废水中苯胺中的应用，其特征在于，所述废水的温度为25～35℃，pH 6.0～8.0，NaCl浓度为0~10 g/L。
4.权利要求1所述的菌株或权利要求2所述的菌剂在合成聚羟基丁酸酯中的应用。
5.一种权利要求2所述的菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下具体步骤：于LB平板上挑取菌株CY-1，接种到无菌的LB液体培养基中，振荡培养，获得苯胺降解菌剂。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，菌株合成聚羟基丁酸酯的方法包括如下步骤：S1、种子液的制备：将菌株CY-1接种至LB液体培养基中，振荡培养，得到菌液；将菌液离心脱去LB液体，并以无菌水重悬菌体，得到种子液；
7.根据权利要求6所述的
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述步骤S3中，混合溶液的体积浓度为15%~25%，次氯酸钠和三氯甲烷的体积比为（0.5~1.5）：（2.5~3.5）。
...【技术特征摘要】
1.一株兼具苯胺降解及聚羟基丁酸酯合成能力的菌株，其特征在于，所述菌株为贪铜菌（cupriavidus sp. cy-1），于2024年1月8日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no : m 2024035。
2.一种利用权利要求1所述的菌株制备的菌剂。
3.权利要求1所述的菌株或权利要求2所述的菌剂在降解废水中苯胺中的应用，其特征在于，所述废水的温度为25～35℃，ph 6.0～8.0，nacl浓度为0~10 g/l。
4.权利要求1所述的菌株或权利要求2所述的菌剂在合成聚羟基丁酸酯中的应用。
5.一种权利要求2所述的菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下具体步骤：于...
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