人肠癌原代细胞、应用和培养方法技术

本发明专利技术提供了人肠癌原代细胞、应用和培养方法，该人肠癌原代细胞命名为HCOC‑691，保藏号为CGMCC NO.18528。保藏地址为：中国，北京。本发明专利技术的人肠癌原代细胞可用于在癌症相关疾病的发病机理研究中的应用、在药物敏感性研究和检测中的应用以及在抗肿瘤药物研究中的应用。本方案与现有纯化培养过程所培养出的肿瘤原代细胞的细胞状态相比，该人肠癌原代细胞的细胞状态更好。

Primary cells, application and culture of human colorectal cancer

【技术实现步骤摘要】
人肠癌原代细胞、应用和培养方法
本专利技术涉及生物
，特别涉及人肠癌原代细胞、应用和培养方法。
技术介绍
肠癌是常见的消化道疾病，一般原代培养的肿瘤细胞由于组织刚刚离体，其生物学特性未发生很大变化，仍保留原遗传特性，基因保留量在90％以上，适用于生化分子实验和药物敏感性试验及机制探究相关试验，其数据更具有说服力。建立人肠癌原代细胞对于细胞株的建立、药敏检测实验、个性化治疗和肠癌的发病及其治疗机制的研究具有重要意义。目前，通常单纯依靠酶消化法进行人肠癌原代细胞的获得。但是，此方法可能由于过度消化，会引起细胞状态差或者死亡，进而导致人肠癌原代细胞培养失败。
技术实现思路
本专利技术实施例提供了人肠癌原代细胞、应用和培养方法，能够培养出状态良好的人肠癌原代细胞。为此，本专利技术的上述目的通过以下技术方案来实现：第一方面，本专利技术提供了人肠癌原代细胞，其命名为人肠癌细胞HCOC-691，保藏号为CGMCCNO.18528。优选地，所述人肠癌原代细胞HCOC-691的核型为：染色体数目为本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.人肠癌原代细胞，其特征在于，命名为人肠癌原代细胞HCOC-691，保藏号为CGMCCNO.18528。/n

【技术特征摘要】
1.人肠癌原代细胞，其特征在于，命名为人肠癌原代细胞HCOC-691，保藏号为CGMCCNO.18528。


2.根据权利要求1所述的人肠癌原代细胞，其特征在于，
所述人肠癌原代细胞的核型为：染色体数目为49条，超二倍体核型。


3.一种根据权利要求1或2所述的人肠癌原代细胞在癌症相关疾病的发病机理研究中的应用。


4.一种根据权利要求1或2所述的人肠癌原代细胞在药物敏感性研究和检测中的应用。


5.一种根据权利要求1或2所述的人肠癌原代细胞在抗肿瘤药物研究中的应用。


6.人肠癌原代细胞的培养方法，其特征在于，包括：
利用清洗液清洗肠癌组织，其中，所述清洗液包括：含有抗生素的生理盐水；
利用细胞分散酶对清洗后的肠癌组织进行消化处理；
利用细胞消化液将所述细胞分散酶消化处理后得到的细胞进行消化处理；
利用含血清培养基和无血清培养基培养所述细胞消化液消化处理后得到的细胞，其中，所述含血清培养基，包括：DF培养基、10％胎牛血清FBS和所述抗生素，所述无血清培养基包括：DF培养基、添加物和所述抗生素；
当培养的细胞的汇合度达到70-90％时，采用胰酶差时消化法、差时贴壁法、反复贴壁法相结合的方式对培养的细胞进行纯化，获得人肠癌原代细胞。


7.根据权利要求6所述的人肠癌原代细胞的培养方法，其特征在于，
所述添加物，包括：谷氨酰胺、胰岛素、转铁蛋白、亚硒酸钠、表皮生长因子EGF、氢化可的松和牛血清白蛋白BSA；
和/或，
所述抗生素，包括：青霉素、硫酸卡那霉素、两性霉素B和万古霉素。


8.根据权利要求6所述的人肠癌原代细胞的培养方法，其特征在于，
所述利用含血清培养基和无血清培养基培养所述细胞消化液消化处理后得到的细胞，包括：
通过200-300μm尼龙膜过滤所述细胞消化液消化处理后得到的细胞，收集过滤后的细胞；
在1000-2000rpm下离心3-8min...

【专利技术属性】
技术研发人员：李春凤，赵九娥，智慧芳，倪君君，
申请(专利权)人：北京和合医学诊断技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11