富含Sn-2位DHA的微生物油脂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及微生物技术领域，公开了一种富含Sn‑2位DHA的微生物油脂及其制备方法和应用。所述微生物油脂中甘油三酯Sn‑2位上DHA的比例不低于23％，所述微生物油脂的制备方法包括将裂殖壶菌菌株接种到发酵培养基中发酵制得，所述裂殖壶菌菌株为保藏编号为GDMCC No.60733的裂殖壶菌(Schizochytrium)。该微生物油脂中甘油三酯Sn‑2位上DHA的比例显著高于甘油三酯Sn‑1、Sn‑3位上DHA的比例，从而使该微生物油脂中DHA的人体吸收率明显高于常规菌株生产的微生物油脂，促进人体对功能性脂肪酸DHA的吸收与利用。

Microbial oil rich in sn-2-dha and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
富含Sn-2位DHA的微生物油脂及其制备方法和应用
本专利技术涉及微生物
，具体涉及一种富含Sn-2位DHA的微生物油脂及其制备方法和应用
技术介绍
二十二碳六烯酸(DHA)是大脑和眼部中的一种主要结构性脂肪酸，占大脑中n-3脂肪酸的97％，在眼部中的比例达93％。研究表明与随机结构的甘油三酯相比，DHA在Sn2位的特殊结构甘油三酯更利于人体吸收。另有研究指出进食特殊结构油脂会使DHA在大脑中含量最高，而进食随机结构的油脂，DHA则在肝脏中含量最高，这表明进食不同结构的甘油三酯会导致脂肪酸代谢的差异，即脂肪酸在Sn-2位比在Sn-1、Sn-3位的吸收利用更有效。胰腺脂肪酶这一主要的脂肪消化酶，通过吸附在油水界面来发挥作用，同时它具有专一的酯键分解作用，即只专注水解Sn-1、Sn-3的酯键，因此，甘油三酯结构的油脂经胰腺脂肪酶分解后，Sn-1、Sn-3位脂肪酸形成游离的脂肪酸、Sn2位脂肪酸形成单甘油酯，而呈游离态的脂肪酸难以渗入胆盐微胶粒被人体吸收，从而容易与肠道中钙、镁离子结合形成不溶性的皂盐损失掉，而Sn2位脂肪酸形成单甘油酯易渗入胆盐微胶粒被人体吸收，所以Sn2位脂肪酸比Sn-1、Sn-3位脂肪酸具有更高的人体吸收率。微生物油脂作为DHA的主要来源之一，随着人们保健意识的加强，已被广泛应用于婴幼儿食品、保健食品中，其营养功效愈来愈得到公众的认识、认可，而微生物油脂中DHA的吸收率也愈来愈为公众所关注。微生物油脂中90％以上的脂肪酸是甘油三酯结构形式，而目前微生物来源的DHA油脂采用吾肯氏菌属、裂殖壶菌属、破囊壶菌目、隐甲藻属、酵母等微生物发酵所获取，得到的甘油三酯型DHA的甘油骨架上的分布比例是Sn2位的含量远远低于Sn-1、Sn-3位的含量，大量Sn-1、Sn-3位DHA在人体消化过程中形成皂盐而损失，微生物油脂的保健功效受到了限制。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了克服现有技术存在的微生物油脂中甘油三酯Sn-1、Sn-3位脂肪酸的比例高导致人体对脂肪酸的吸收率低的问题，提供一种富含Sn-2位DHA的微生物油脂及其制备方法和应用，该微生物油脂通过裂殖壶菌发酵生产所得，富含DHA且油脂中甘油三酯Sn2位上DHA的比例不低于23％，有效提高DHA的人体吸收率。为了实现上述目的，本专利技术提供了一种富含Sn-2位DHA的微生物油脂，所述微生物油脂中甘油三酯Sn-2位上DHA的比例不低于23％。本专利技术进一步提供了上述微生物油脂的制备方法，该方法包括将裂殖壶菌菌株接种到发酵培养基中发酵制得，所述裂殖壶菌菌株为保藏编号为GDMCCNo.60733的裂殖壶菌(Schizochytrium)。优选地，所述发酵培养基包括碳源、氮源、无机盐、微量元素和维生素，发酵的条件包括pH为6-7.5、温度为27-31℃、时间为4-8天、通气比为0.45-1.1VVM、谷氨酸浓度为5-15g/L、碳源浓度为5-70g/L。优选地，所述裂殖壶菌菌株经活化后制作成摇瓶种子液接种到种子培养基中培养，然后再转接入发酵培养基中发酵培养。优选地，所述活化的过程包括将所述裂殖壶菌菌株的冷冻甘油管菌种解冻、接种到种子培养基中进行扩大培养。优选地，所述菌株活化培养的过程包括：将所述裂殖壶菌菌株的冷冻甘油管菌种解冻，用无菌吸管将所述甘油管菌种接种到已灭菌的种子培养基中，在温度为27.5-28.5℃、转速为150-200r/min的条件下培养48-72h，所述种子培养基中碳源为30-50g/L、氮源为25-45g/L、无机盐为25-40g/L、微量元素为0.015-0.025g/L、维生素为0.01-0.02g/L。优选地，所述碳源为葡萄糖或/和蔗糖，所述氮源为谷氨酸钠、酵母粉、酵母浸膏中的一种或多种，所述无机盐为钙盐、磷酸盐、钾盐、钠盐、镁盐、铵盐中的一种或多种，所述微量元素为镍、铜、钼、钴、锌、铁、锰中的一种或多种，所述维生素为维生素B1、维生素B12、维生素B6、泛酸钙、生物素中的一种或多种。优选地，该方法还包括对所述发酵的产物进行破壁、萃取得到所述发酵的产物中的油脂产物。本专利技术进一步提供了由上述的方法制备得到的微生物油脂，所述微生物油脂中甘油三酯Sn-2位上DHA的比例不低于23％，且甘油三酯型DHA含量不低于38％。本专利技术进一步提供了由上述的方法制备得到的微生物油脂在食品中的应用，所述食品优选为婴幼儿配方食品、保健食品以及健康食品。通过上述技术方案，本专利技术提供的利用裂殖壶菌菌株发酵生产的微生物油脂，不仅富含DHA，而且甘油三酯Sn2位上DHA的比例显著高于甘油三酯Sn-1、Sn-3位上DHA的比例，提高人体对该微生物油脂中DHA的吸收率，从而有效促进人体对功能保健因子DHA的吸收与利用。本专利技术的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。生物保藏本专利技术的菌株如下：裂殖壶菌(Schizochytrium)，于2019年8月8日被保藏在广东省微生物菌种保藏中心(地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，广东省微生物研究所，邮政编码：510070)(保藏单位的缩写为GDMCC)，保藏编号为GDMCCNo.60733。具体实施方式在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。第一方面，本专利技术提供了一种富含Sn-2位DHA的微生物油脂，所述微生物油脂中甘油三酯Sn-2位上DHA的比例不低于23％。第二方面，本专利技术提供了上述微生物油脂的制备方法，该方法包括将裂殖壶菌菌株接种到发酵培养基中发酵制得，所述裂殖壶菌菌株为保藏编号为GDMCCNo.60733裂殖壶菌(Schizochytrium)。本专利技术提供的裂殖壶菌经过发酵产生富含DHA的微生物油脂，所述发酵的方法没有特别的要求，只要是能使所述裂殖壶菌增殖即可。所述裂殖壶菌发酵的pH、温度、时间、通气比、碳源和氮源没有特别的要求，可以是获得裂殖壶菌发酵产物常用的选择，为了获得较多的发酵产物，优选地，所述发酵培养基包括碳源、氮源、无机盐、微量元素和维生素，发酵的条件包括pH为6-7.5、温度为27-31℃、时间为4-8天、通气比为0.45-1.1VVM、谷氨酸浓度为5-15g/L、碳源浓度为5-70g/L。其中，所述裂殖壶菌接种到发酵培养基中发酵的过程中，在发酵培养基中投加部分碳源、部分氮源，在发酵过程中根据碳氮比的调控工艺不断流加碳源、氮源，在接近发酵终点时不再补充碳源直至培养基中残糖含量为0，以此来调控碳氮比形成营养缺陷型营养条件，以确保裂殖壶菌发酵产油量的水平。为了获得较多的发酵产物，所述裂殖壶菌菌株经活化后制作成摇瓶种子液接种到所述种子培养基中培养，然后再转接入发酵培养基中发酵培养。...

【技术保护点】
1.一种富含Sn-2位DHA的微生物油脂，其特征在于，所述微生物油脂中甘油三酯Sn-2位上DHA的比例不低于23％。/n

【技术特征摘要】
1.一种富含Sn-2位DHA的微生物油脂，其特征在于，所述微生物油脂中甘油三酯Sn-2位上DHA的比例不低于23％。


2.权利要求1所述的微生物油脂的制备方法，其特征在于，该方法包括将裂殖壶菌菌株接种到发酵培养基中发酵制得，所述裂殖壶菌菌株为保藏编号为GDMCCNo.60733的裂殖壶菌(Schizochytrium)。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基包括碳源、氮源、无机盐、微量元素和维生素，发酵的条件包括pH为6-7.5、温度为27-31℃、时间为4-8天、通气比为0.45-1.1VVM、谷氨酸浓度为5-15g/L、碳源浓度为5-70g/L。


4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，该方法包括将所述裂殖壶菌菌株经活化后制作成摇瓶种子液接种到种子培养基中培养，然后再转接入所述发酵培养基中发酵培养。


5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述活化的过程包括：将所述裂殖壶菌菌株的冷冻甘油管菌种解冻、接种到种子培养基中进行扩大培养。


6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述活化的过程包括：将所述裂殖壶菌菌株的冷冻甘油管菌种解冻后，用无...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁云，曹晟，王身健，
申请(专利权)人：瞿瀚鹏，
类型：发明
国别省市：湖南;43