测定甲磺司特原料药中3种基因毒性杂质的方法技术

本发明专利技术公开了测定甲磺司特原料药中3种基因毒性杂质的方法。本发明专利技术的方法使用高效液相色谱‑质谱联用仪，经加入本底原料建立线性方程，使得本发明专利技术所公开的方法时间短，同时控制3种杂质，克服了回收率偏高、高浓度样品污染质谱且影响重复性的技术问题，建立了专属性、灵敏度及准确度符合原料药质量控制需要的可靠方法。

A method for the determination of three genotoxic impurities in mesylate

【技术实现步骤摘要】
测定甲磺司特原料药中3种基因毒性杂质的方法
本专利技术属于药物分析领域，具体地，涉及测定甲磺司特原料药中3种基因毒性杂质的方法。
技术介绍
甲磺司特是1995年日本大鹏药品工业株式会社研制的新型抗过敏药，通过抑制T细胞诱导的白细胞介素-4（IL-4）和白细胞介素-5（IL-5）的产生，从而抑制酸性粒细胞的侵润和抑制IgE抗体产生等作用，发挥抗过敏作用。主要用于治疗儿童及成人的支气管哮喘。根据临床表现，甲磺司特可完全或部分替代激素类药物，不仅具有较好疗效、而且具有长期用药安全、方便的特点。甲磺司特原料药现有合成工艺所用起始物料，多含有脂肪族硝基、单卤代烷烃、磺酸的烷基酯等基因毒性警示结构。根据ICHM7（R1），需将起始物料、中间体、原料药中可能存在的1、2、3类杂质制定在特定限度、可接受限度（TCC）以下或进行细菌突变试验。
技术实现思路
原料药的制备包括合成甲磺司特的关键中间体，该中间体制备过程如下：。该原料药制备过程中可能残留反应的中间体杂质A：1-氯-3-(4-硝基苯氧基)-2-丙醇，对硝基苯酚本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.测定甲磺司特原料药中3种基因毒性杂质的方法：/n1）使用高效液相色谱-质谱联用仪，并设置参数如下：/n色谱柱：C18；检测器：紫外检测器VWD；进样盘不控温；进样体积20µl；测试时间：30～60min；柱温：30～40℃；波长：220-250nm；流速：0.2～1.0 ml/min；流动相：由流动相A和流动相B组成，其中，所述流动相A为0.005～0.010mol/L乙酸铵缓冲盐溶液或0.05～0.1体积%的甲酸水溶液，流动相B为乙腈、或含0.05～0.1体积%甲酸的乙腈混合溶液，等度或梯度分离；采用二维色谱将高浓度的原料药切入废液，同时第二组泵向质谱泵入清洗流动相；/n质谱质量分离器类...

【技术特征摘要】
1.测定甲磺司特原料药中3种基因毒性杂质的方法：
1）使用高效液相色谱-质谱联用仪，并设置参数如下：
色谱柱：C18；检测器：紫外检测器VWD；进样盘不控温；进样体积20µl；测试时间：30～60min；柱温：30～40℃；波长：220-250nm；流速：0.2～1.0ml/min；流动相：由流动相A和流动相B组成，其中，所述流动相A为0.005～0.010mol/L乙酸铵缓冲盐溶液或0.05～0.1体积%的甲酸水溶液，流动相B为乙腈、或含0.05～0.1体积%甲酸的乙腈混合溶液，等度或梯度分离；采用二维色谱将高浓度的原料药切入废液，同时第二组泵向质谱泵入清洗流动相；
质谱质量分离器类型：四极杆；电离方式：电喷雾电离；毛细管电压：3000～3500V；干燥气流速：12L/min；雾化气压力45psig；碎裂电压：50～100V；
2）溶液配制方式
稀释溶剂：乙腈水溶液；
供试液：应用乙腈和稀释溶剂配制供试液，供试液的浓度为10mg/ml；
杂质对照液：应用乙腈和稀释溶剂配制杂质对照液，杂质对照液的浓度为0.05µg/ml；
供试品加标液：应用乙腈和稀释溶剂配制供试品加标液，所述供试品加标液中样品原料药的浓度为10mg/ml，杂质的浓度为0.05µg/ml；
线性溶液：范围从定量下限至200%限度浓度水平，应用乙腈和稀释溶剂分别配制在2～10mg/ml的样品溶液中；定量依据：面积或与内标的面积比；
计算公式：
C=a×A+b
X=C×S×1000/m
式中：X：供试品中待测物的含量（ppm）
A：供试品溶液色谱图中待测物与内标物的峰面积比
a：线性回归曲线斜率
b：线性回归曲线与Y轴截距
m：供试品的称样量，mg
S：供试品的稀释倍数
C：供试品溶液色谱图中待测物的浓度（µg/ml）。


2.如权利要求1所述的测定甲磺司特原料药中3种基因毒性杂质的方法，其中，步骤1）所述的色谱柱的固定性为十八烷基硅胶色谱柱，粒径为3～5µm，长度为150～...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨再香，吴雪，牟祥，卢念红，雷海燕，
申请(专利权)人：重庆柳江医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆;50