一种从植物体中提取野鸦椿酸的新方法及新原料技术

本发明专利技术提供一种从植物体中提取野鸦椿酸的新方法及新原料；该方法以含有野鸦椿酸的植物体为原料，经粉碎‑乙酸乙酯溶液提取‑浓缩提取液至浸膏‑硅胶柱色谱洗脱‑洗脱液经PRP512A大孔吸附树脂柱色谱分离‑浓缩洗脱液并重结晶得到野鸦椿酸单体化合物，该方法无需多次硅胶、凝胶柱色谱分离，工艺简单、得率高、成本低；其中圆齿野鸦椿植物体原料来源丰富，含量高，是理想的新材料。

A new method and raw material for extracting ailanthic acid from plants

【技术实现步骤摘要】
一种从植物体中提取野鸦椿酸的新方法及新原料
本专利技术专利涉及一种从植物体中提取野鸦椿酸的新方法，及其提取野鸦椿酸的新原料。
技术介绍
野鸦椿酸，又名蔷薇酸，CAS号为53155-25-2，英文名euscaphicacid，白色粉末状结晶或针晶，分子式为C30H48O5，分子量488；该化合物为乌苏烷型三萜类化合物，溶于二氯甲烷、乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂。文献报道，野鸦椿酸具有显著的抗HIV、抗炎、抗肿瘤活性，市场开发价值巨大。该成分最早从省沽油科野鸦椿Euscaphisjaponica的果皮中分离得到。文献研究表明，野鸦椿酸存在于省沽油科、蔷薇科、山茶科等植物中，已从野鸦椿、悬钩子覆盆子、地榆、枇杷叶等植物中分离得到，工艺复杂，形式五花八门，仅限于某种植物种野鸦椿酸的制备；在众多的工艺中，以从畲族药搁公扭，即华东覆盆子RubuschingiiHu的干燥根及根茎中获得的野鸦椿酸为最高，得率约为1%，但需经过提取-萃取-反复多次硅胶、凝胶柱色谱分离获得，分离方法较为繁琐，成分在制备过程中损失量大，工艺中使用的柱色谱填料葡聚糖凝胶价格昂贵，制备工艺成本高；该工艺在其他植物制备野鸦椿酸，所获得的野鸦椿酸量小，纯度低。此外，该工艺使用的植物原料华东覆盆子虽来源较为丰富，但限于根及根茎，其在该植物体中的生物量低，可开发性小。圆齿野鸦椿EuscaphiskonishiiHayata为省沽油科野鸦椿属植物，又名福建野鸦椿，是我国特有的药用观赏树种。近年来，福建、江西等周边省的种植面积不断扩大，仅福建三明清流、泰宁，南平邵武、建阳，泉州德化等就超过5000亩，植物资源丰富。课题组一直致力于圆齿野鸦椿的资源开发与利用，前期从该植物分离得到大量的野鸦椿酸。经过制备工艺的进一步优化，课题组探索出了得率与原工艺率高，操作更为简单、成本更低的制备方法，该方法无需凝胶色谱，硅胶色谱多次分离，且该工艺运用到其他植物体制备野鸦椿酸上，同样适用。
技术实现思路
本专利技术旨在提供一种从植物体中提取野鸦椿酸的新方法，制备工艺仅需乙酸乙酯提取-硅胶柱色谱洗脱-PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱分离即可获得高纯度的野鸦椿酸单体。该制备方法简单，易操作，适合于大规模生产。本专利技术所提供的技术方法如下：从植物体中提取野鸦椿酸的方法，以富含野鸦椿酸的植物干燥的枝条为原料，经粉碎-乙酸乙酯溶液提取-浓缩提取液至浸膏-硅胶柱色谱洗脱-洗脱液浓缩至浸膏-PRP-512A大孔吸附树脂色谱洗脱-乙醇重结晶后得到野鸦椿酸单体化合物，具体步骤参数如下：取圆齿野鸦椿枝条，经干燥后粉碎成粗粉，过0.178mm筛，备用；乙酸乙酯溶液提取：取圆齿野鸦椿粉末1000g，加乙酸乙酯溶液10000mL，加热煮沸2小时，过滤得提取液；滤渣再加入10000mL乙酸乙酯溶液，再一次煮沸2小时，过滤，得提取液；浓缩提取液至浸膏：合并两次乙酸乙酯提取液，减压浓缩至干得提取物；硅胶柱色谱洗脱：考虑到分离效果、有机溶剂毒性及生产成本，首选二氯甲烷-乙醇系统；洗脱溶剂比例为50:1，洗脱3-5个柱体积，除去杂质；然后使用二氯甲烷：乙醇20:1，洗脱4-6个柱体积，收集洗脱液，浓缩得高浓度野鸦椿酸浸膏。PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱洗脱：高浓度野鸦椿酸浸膏与等质量的PRP-512A大孔吸附树脂混合拌样；洗脱溶剂系统为乙醇-水；洗脱溶剂比例为75:25，洗脱3-5个柱体积，除去杂质；然后使用洗脱溶剂比例为95:5，洗脱4-6个柱体积，收集洗脱液，得大孔吸附树脂95%乙醇洗脱液。大孔吸附树脂95%乙醇洗脱液浓缩和重结晶：大孔吸附树脂95%乙醇洗脱液减压浓缩至200-300mL，自然冷却，放置，析出白色固体，抽滤，得白色粉末即为野鸦椿酸。圆齿野鸦椿枝条经上述工艺制备得率范围为0.98%-1.15%，与从华东覆盆子的干燥根及根茎中获得野鸦椿酸的工艺相比，本专利的最终得率提高了13%。同时由于圆齿野鸦椿已有大面积的人工林，因此圆齿野鸦椿枝条是优选的提取野鸦椿酸的新材料。具体实施方式根据下述实施例，可以更好地理解本专利技术。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的具体物料比、工艺条件及其结果仅用于说明本专利技术，而不应当也不会限制权力要求书中所详细描述的本专利技术。实施例1取圆齿野鸦椿枝条粉末1000g，加乙酸乙酯溶液10000mL，加热煮沸2小时，过滤得提取液；滤渣再加入10000mL乙酸乙酯溶液，再一次煮沸2小时，过滤，得提取液；合并两次提取液，减压浓缩至干得提取物35g；提取物与35g60-100目硅胶拌样，350g200-300目硅胶干法装柱，二氯甲烷-乙醇（50:1）4000mL洗脱，除去杂质，二氯甲烷-乙醇（20:1）5000mL洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂，得浸膏18.3g。浸膏用乙酸乙酯溶解，与18.3gPRP-512A大孔吸附树脂拌样，通过PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱洗脱，先用75%乙醇溶液洗脱2000mL除去杂质，再用2500mL95%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂至200mL，自然冷却，放置，析出白色固体，抽滤，得野鸦椿酸白色粉末1.15g，产率为1.15%，纯度95.8%。实施例2取野鸦椿果皮粉末1000g，加乙酸乙酯溶液10000mL，加热煮沸2小时，过滤得提取液；滤渣再加入10000mL乙酸乙酯溶液，再一次煮沸2小时，过滤，得提取液；合并两次提取液，减压浓缩至干得提取物39.3g；提取物与39.3g60-100目硅胶拌样，393g200-300目硅胶干法装柱，二氯甲烷-乙醇（50:1）4500mL洗脱，除去杂质，二氯甲烷-乙醇（20:1）6000mL洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂，得浸膏17.6g。浸膏用乙酸乙酯溶解，与17.6gPRP-512A大孔吸附树脂拌样，通过PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱洗脱，先用75%乙醇溶液洗脱2000mL除去杂质，再用2500mL95%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂至200mL，自然冷却，放置，析出白色固体，抽滤，得野鸦椿酸白色粉末0.91g，产率为0.91%，纯度92.5%。实施例3取地榆植株干燥，采用实施例1或2的工艺提取野鸦椿酸。实施例4取枇杷叶干燥，采用实施例1或2的工艺提取野鸦椿酸。实施例5取华东覆盆子的干燥根，采用实施例1或2的工艺提取野鸦椿酸，与传统工艺获得野鸦椿酸相比，本专利的最终得率提高了13%。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从植物体中提取野鸦椿酸的方法，其特征是以含有野鸦椿酸的植物体为原料，经粉碎-乙酸乙酯溶液提取-浓缩提取液至浸膏-硅胶柱色谱洗脱-洗脱液经PRP512A大孔吸附树脂柱色谱分离-浓缩洗脱液并重结晶得到野鸦椿酸单体化合物，主要步骤包括：/n（1）含有野鸦椿酸的植物体经干燥后粉碎成粗粉，过0.178 mm筛，备用；/n（2）乙酸乙酯溶液提取：取植物体粉末1000 g，加乙酸乙酯溶液10000 mL，加热煮沸2小时，过滤得提取液；滤渣再加入10000 mL 乙酸乙酯溶液，再一次煮沸2小时，过滤，得提取液；/n（3）浓缩提取液至浸膏：合并两次乙酸乙酯提取液，减压浓缩至干，得提取物；/n（4）硅胶柱色谱洗脱：考虑到分离效果、有机溶剂毒性及生产成本，首选二氯甲烷-乙醇系统；洗脱溶剂比例为50:1，洗脱3-5个柱体积，除去杂质；然后使用二氯甲烷：乙醇20:1，洗脱4-6个柱体积，收集洗脱液，浓缩得高浓度野鸦椿酸浸膏；/n（5）PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱洗脱：高浓度野鸦椿酸浸膏与等质量的PRP-512A大孔吸附树脂混合拌样；洗脱溶剂系统为乙醇-水；洗脱溶剂比例为75:25，洗脱3-5个柱体积，除去杂质；然后使用洗脱溶剂比例为95:5，洗脱4-6个柱体积，收集洗脱液，得大孔吸附树脂95%乙醇洗脱液；/n（5）大孔吸附树脂95%乙醇洗脱液浓缩和重结晶：大孔吸附树脂95%乙醇洗脱液减压浓缩至200-300mL，自然冷却，放置，析出白色固体，抽滤，得白色粉末即为野鸦椿酸。/n...

【技术特征摘要】
1.一种从植物体中提取野鸦椿酸的方法，其特征是以含有野鸦椿酸的植物体为原料，经粉碎-乙酸乙酯溶液提取-浓缩提取液至浸膏-硅胶柱色谱洗脱-洗脱液经PRP512A大孔吸附树脂柱色谱分离-浓缩洗脱液并重结晶得到野鸦椿酸单体化合物，主要步骤包括：
（1）含有野鸦椿酸的植物体经干燥后粉碎成粗粉，过0.178mm筛，备用；
（2）乙酸乙酯溶液提取：取植物体粉末1000g，加乙酸乙酯溶液10000mL，加热煮沸2小时，过滤得提取液；滤渣再加入10000mL乙酸乙酯溶液，再一次煮沸2小时，过滤，得提取液；
（3）浓缩提取液至浸膏：合并两次乙酸乙酯提取液，减压浓缩至干，得提取物；
（4）硅胶柱色谱洗脱：考虑到分离效果、有机溶剂毒性及生产成本，首选二氯甲烷-乙醇系统；洗脱溶剂比例为50:1，洗脱3-5个柱体积，除去杂质；然后使用二氯甲烷：乙醇20:1，洗...

【专利技术属性】
技术研发人员：倪林，邹双全，黄维，徐会有，陈景新，
申请(专利权)人：福建农林大学，福建省天雾林业开发有限公司，
类型：发明
国别省市：福建;35