一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与双基因缺失疫苗株的LAMP检测引物及试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2V和360‑505R双基因缺失疫苗株LAMP检测引物及其LAMP检测试剂盒，所述检测引物包括两套引物，一套引物针对非洲猪瘟病毒野毒株的CD2v序列，能特异性检测非洲猪瘟病毒野毒株；另一套针对双基因缺失疫苗株,引物的位置在于360‑505R基因27942‑35500位缺失区两侧，能特异性的检测出该非洲猪瘟疫苗株。该检测方法采用恒温反应的检测手段，仅需加热即可实现整个反应，可以实现快速现场检测，所述方法检测灵敏度高、特异性强、重复性好、检测速度快，可以作为有效的非洲猪瘟病毒野毒株与CD2v和360‑505R双基因缺失疫苗株的的基层检测手段。

A lamp detection primer and kit for distinguishing between African classical swine fever virus wild strain and bigene deletion vaccine strain

【技术实现步骤摘要】
一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与双基因缺失疫苗株的LAMP检测引物及试剂盒
本专利技术属于生物
，更具体地，涉及一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与双基因缺失疫苗株的LAMP检测引物及试剂盒。
技术介绍
非洲猪瘟是一种由非洲猪瘟病毒引起的急性、出血性、接触性、高致病性的传染性疾病，任何年龄和品种的猪均可感染该种病毒，被世界动物卫生组织OIE定为A类疫病,在我国被列为一类疫病。该种疾病的传播流行没有典型的季节性，且具有发病率高、传播速度快等特点。临床上最急性型患病猪不表现出任何临床症状，经常猝死。亚急性或慢性病猪体温常上升到42℃，耳朵和四周腹部皮肤出现大量出血斑点，在眼鼻周边，流出大量的黏液性分泌物，呕吐便秘，呼吸困难，妊娠母猪发生流产。患病猪从鼻腔或扁桃体部发生感染,然后漫延到下颌淋巴结等部位,猪浆膜表面先充血、后出血,内脏表面均有出血点,胃和肠道粘膜、胆囊和膀胱等也出血；肺脏肿大；脾肿大、易碎；颌下淋巴结、腹腔淋巴结肿大,严重时出血。非洲猪瘟病毒的主要传染源是家猪、野猪,同时软蜱和接触病猪的污染物等也是传染源,如泔水、饲料、垫草等，主要感本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2v和360-505R双基因缺失疫苗株LAMP检测引物组，包括以下A、B两组引物，每组引物包括：一对外引物、一对内引物和一对环引物，/nA组：/n外引物：/nCD2v-F3：AACAATGTCAGCATGATGAC(SEQ ID NO:1)；/nCD2v-B3：GAGGACATGGTTTGGGTG(SEQ ID NO:2)；/n内引物：/nCD2v-FIP：CTGATAACGACTGTAAGGCTTAGGAACCACTTCCATACATGAACC(SEQ ID NO:3)；/nCD2v-BIP：ACCTATTTACTACATGCGTCCCTAGGACACGG...

【技术特征摘要】
1.一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2v和360-505R双基因缺失疫苗株LAMP检测引物组，包括以下A、B两组引物，每组引物包括：一对外引物、一对内引物和一对环引物，
A组：
外引物：
CD2v-F3：AACAATGTCAGCATGATGAC(SEQIDNO:1)；
CD2v-B3：GAGGACATGGTTTGGGTG(SEQIDNO:2)；
内引物：
CD2v-FIP：CTGATAACGACTGTAAGGCTTAGGAACCACTTCCATACATGAACC(SEQIDNO:3)；
CD2v-BIP：ACCTATTTACTACATGCGTCCCTAGGACACGGTTTAGGTAAG(SEQIDNO:4)；
环引物：
CD2v-LF：CATACATGAACCATCTCCCAGAG(SEQIDNO:5)；
CD2v-LB：CCACTCAACCCATTTCCCTTACC(SEQIDNO:6)；
B组：
外引物：
360-505R-F3：ACAGCAGCAGCGAGACG(SEQIDNO:7)；
360-505R-B3：GGATACGATTCACTACAAT(SEQIDNO:8)；
内引物：
360-505R-FIP：GTTATGGCTATCTCCTTGCTTCCAATAAAAGGGCTTCTACCCT(SEQIDNO:9)；
360-505R-BIP：CAGCATAAACATATTTTGAAGAGTACACCATACTGAACCTAG(SEQIDNO:10)；
环引物：
360-505R-LF：CCATATTCTATGGTTTTG(SEQIDNO:11)；
360-505R-LB：ACTTCGAAACCTGGGAAA(SEQIDNO:12)。


2.一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2v和360-505R双基因缺失疫苗株LAMP检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包含权利要求1中所述的引物组。


3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括BstDNA聚合酶、LAMP反应液、甜菜碱、阳性对照和阴性对照。


4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述LAMP反应液含有10mMdNTP、10×ThermoPol反应缓冲液、150mMMgSO4水溶液。


5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述阳性对照为含有非洲猪瘟病毒CD2v基因...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈永义，杨柔，陈瑞爱，沈雪娟，张旭，李延鹏，张文炎，
申请(专利权)人：华南农业大学，肇庆大华农生物药品有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44