一种特异性靶向三阴乳腺癌的多肽及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种特异性靶向三阴乳腺癌的多肽及其应用。该多肽具有如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。该多肽与Decorin具有同源性，能够和三阴乳腺癌的癌细胞表面的Decorin受体结合，从而起到靶向作用，同时，该多肽与其它类型的乳腺癌细胞的结合能力较为微弱，展现出了较高的特异性选择性，可以以此用于三阴乳腺癌的靶向治疗或成像诊断。

A specific polypeptide targeting three negative breast cancer and its application

【技术实现步骤摘要】
一种特异性靶向三阴乳腺癌的多肽及其应用
本专利技术涉及药物化学领域，尤其是涉及一种特异性靶向三阴乳腺癌的多肽及其应用。
技术介绍
随着人们生活水平的提升和平均寿命的延长，世界范围内癌症的发病率逐年攀升，成为威胁人类健康的主要因素。《世界癌症报告》的数据显示，2012年全球癌症病例为1400万例，到2035年将上升至2400万例。乳腺癌是世界上发病率排第二的癌症，也是女性中发病率最高的癌症类型。2012年全球乳腺癌新增病例为167万例，占当年所有新增癌症病例的25％。按照不同的分子分型，乳腺癌可被划分为：雌激素/孕激素阳性型(ER/PR+)、HER2高表达型(HER2+)和三阴型。对于ER/PR+型乳腺癌，目前可采用内分泌法进行治疗；对于HER2+型，目前可采用HER2单抗药物或HER2抑制剂进行治疗，如帕妥珠单抗、曲妥珠单抗、拉帕替尼、阿法替尼等。三阴乳腺癌在所有乳腺癌中占比大约15％-20％，是恶性程度最高的乳腺癌种类，患者五年生存率远低于前两种类型。但对于三阴乳腺癌，目前还未发现有效的分子靶点，主要依赖手术治疗、传统化疗或放疗。但传统癌症治疗手段往往存在严重的副作用，在治疗癌症的同时，损害了身体的正常功能，破坏人体的自身免疫力。因此，寻找三阴乳腺癌可能的生物靶点，一直是乳腺癌领域研究的热点和难点之一。噬菌体展示技术是一种能够将所需性质的多肽从大量变异体的集落中提取出来的体外筛选技术。自从Smith首次提出该方法以来，噬菌体展示技术已经发展成为一种发现新特性及改变已有多肽性质的强大工具。噬菌体展示技术在发现靶标分子对应的新的结合多肽上极为有效。其基本原理是：首先，将随机序列的核苷酸序列插入噬菌体衣壳蛋白基因中，从而使噬菌体可以展示该核苷酸所编码的多肽。接着，通过该噬菌体库，对靶标分子进行筛选，使能够与该靶标分子进行特异性结合的噬菌体进行富集，从而得到对应的特异性结合多肽。噬菌体展示技术在为各种类型的靶标分子筛选特异性结合物的过程中，显示出了非常强大的应用潜力和重要作用。基于此，有必要寻找能够特异性靶向三阴乳腺癌的多肽。
技术实现思路
本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出一种能够特异性靶向三阴乳腺癌的多肽以及该多肽的应用。本专利技术所采取的技术方案是：本专利技术的第一方面，提供一种多肽，该多肽具有如SEQIDNo.1(ASYSSGPHTVQY)所示的氨基酸序列。本专利技术实施例的有益效果是：该多肽与Decorin具有同源性，能够和三阴乳腺癌的癌细胞表面的Decorin受体结合，从而起到靶向作用，同时，该多肽与其它类型的乳腺癌细胞的结合能力较为微弱，展现出了较高的特异性选择性，可以以此用于三阴乳腺癌的靶向治疗或成像诊断。本专利技术的第二方面，提供一种偶联物，该偶联物包括上述的多肽和偶联部分。该偶联物可以与三阴乳腺癌细胞特异性结合，具有较高的特异性选择性，可以以此用于三阴乳腺癌的靶向治疗或成像诊断。根据本专利技术的实施例，偶联部分选自成像剂、治疗剂中的至少一种。根据本专利技术的实施例，成像剂为各类影像学技术的造影剂中的至少一种，诸如计算机断层扫描(CT)、核磁共振(MRI)、超声、放射性核素扫描、正电子发射断层扫描(PET)等影像学技术。根据本专利技术的实施例，成像剂为光学标记中的至少一种，诸如荧光标记物、化学发光标记物、生物发光标记物等。根据本专利技术的实施例，成像剂选自放射性核素、放射性核素标记物、分子影像剂、荧光素、量子点中的至少一种。根据本专利技术的实施例，治疗剂选自药物、毒素、细胞因子、载体蛋白、抗体、酶、凝集素中的至少一种。本专利技术的第三方面，提供一种核酸分子，该核酸分子编码前述的多肽或偶联物。本专利技术的第四方面，提供一种重组载体，该重组载体包括前述的核酸分子。该重组质粒用于三阴乳腺癌的靶向治疗或成像诊断。根据本专利技术的实施例，该重组载体可以是重组质粒、噬菌体。根据本专利技术的实施例，该重组载体为重组质粒，该重组质粒在质粒载体的多克隆位点插入上述核酸分子。根据本专利技术的实施例，该重组载体为重组噬菌体。根据本专利技术的实施例，该重组噬菌体在其DNA或RNA链上插入前述的核酸分子，随外壳蛋白的表达而表达，从而高效表达前述的多肽。根据本专利技术的实施例，该重组噬菌体为包含前述核酸分子的M13噬菌体。本专利技术的第五方面，提供一种重组细胞，该重组细胞包括前述的核酸分子。根据本专利技术的实施例，该重组细胞通过在宿主细胞内转导或转染前述核酸分子得到。根据本专利技术的实施例，宿主细胞为革兰氏阴性菌；更具体地，是大肠杆菌。本专利技术的第六方面，提供一种组合物，该组合物包括前述的多肽、偶联物、核酸分子、重组载体、重组细胞中的任一种。该组合物为用于三阴乳腺癌的诊断组合物或治疗组合物。根据本专利技术的实施例，组合物为药物组合物，该药物组合物还包括药物递送载体。根据本专利技术的实施例，药物递送载体为纳米级载体系统、微米级载体系统中的任一种。根据本专利技术的实施例，药物递送载体选自脂质体、聚合物胶束、树枝状化合物、无机纳米颗粒中的至少一种。本专利技术的第七方面，提供一种试剂盒，该试剂盒包括前述的多肽、偶联物中的任一种。该多肽或偶联物具有对三阴乳腺癌细胞的靶向特异性，以此制备的试剂盒能够用于特异性识别、标记三阴乳腺癌细胞或用于三阴乳腺癌细胞的诊断、治疗。本专利技术的第八方面，提供前述的多肽、偶联物、核酸分子、重组载体、重组细胞、组合物在制备用于诊断、预防、治疗三阴乳腺癌的试剂中的用途。附图说明图1是本专利技术的一个实施例中28条多肽对三阴乳腺癌细胞的选择性结合的ELISA实验结果。其中，编号7为本实施例所要求保护的多肽，实验组细胞系MDA-MB-231为三阴乳腺癌细胞，对照组细胞系MCF-7为非三阴性的乳腺癌细胞。图2是本专利技术的实施例2的FAM荧光基团与多肽连接后的免疫荧光检测结果。其中，a和b表示对照组细胞系MCF-7，为非三阴性的乳腺癌细胞；c和d表示实验组细胞系MDA-MB-231，为三阴乳腺癌细胞。具体实施方式以下将结合实施例对本专利技术的构思及产生的技术效果进行清楚、完整地描述，以充分地理解本专利技术的目的、特征和效果。显然，所描述的实施例只是本专利技术的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本专利技术的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，均属于本专利技术保护的范围。实施例11.多肽的筛选采用Negative-/Positive+的方法利用噬菌体肽库对细胞进行筛选，MCF-7(负筛)，MDA-MB-231(正筛)，共三轮。每轮筛选步骤如下：1)将贴壁的MCF-7细胞中加入0.5％BSA封闭1h；2)将噬菌体随机十二肽库(Ph.D.-12噬菌体展示肽库试剂盒，NewEnglandBio-LABS,美国)以5×1010PFU(5μL)的滴度加入到MCF-7细胞培养皿，37℃孵育1h(负筛本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种多肽，其特征在于，具有如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种多肽，其特征在于，具有如SEQIDNo.1所示的氨基酸序列。


2.一种偶联物，其特征在于，包括权利要求1所述的多肽和偶联部分。


3.根据权利要求2所述的偶联物，其特征在于，所述偶联部分选自放射性核素、放射性核素标记物、分子影像剂、荧光素、量子点、药物、毒素、细胞因子、载体蛋白、抗体、酶、凝集素中的至少一种。


4.一种核酸分子，其特征在于，编码权利要求1所述的多肽，或编码权利要求2至3任一项所述的偶联物。


5.一种重组载体，其特征在于，包括权利要求4所述的核酸分子。


6.一种重组细胞，其特征在于，包括权利要求4所述的核酸分子。


7.一种组合物，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：马岚，胡羽童，
申请(专利权)人：清华伯克利深圳学院筹备办公室，
类型：发明
国别省市：广东;44