大黄鱼虹彩病毒(LYCIV)的RAA恒温荧光检测方法及试剂技术

技术编号:22878337 阅读:51 留言:0更新日期:2019-12-21 05:21
本发明专利技术公开了一种大黄鱼虹彩病毒(LYCIV)RAA恒温荧光检测方法和检测试剂盒。检测试剂盒包括一条正向引物SEQ ID NO.1、一条反向引物SEQ ID NO.2、一条特异性荧光探针SEQ ID NO.3、反应液、重组聚合酶和对照品。本发明专利技术的试剂盒特异性强;检测灵敏度高,可达到200fg/μL;准确度高、可靠;操作简便快捷,适合现场检测,具有广泛的应用场景。

RAA constant temperature fluorescence detection method and reagent for large yellow croaker iridovirus (lyciv)

【技术实现步骤摘要】
大黄鱼虹彩病毒(LYCIV)的RAA恒温荧光检测方法及试剂
本专利技术属于分子生物学
,涉及海洋水产养殖业的检测方法,具体涉及一种大黄鱼虹彩病毒的RAA恒温荧光检测方法及试剂盒。
技术介绍
虹彩病毒(iridovirus)是一类对鱼类、两栖类和爬行类水生动物具有广泛感染性的致病病原,由虹彩病毒感染所致的水产动物疾病已给世界水产养殖业造成了巨大的经济损失。大黄鱼虹彩病毒(Largeyellowcroakeriridovirus,LYCIV)是1999年至2001年夏季,在福建省宁德、罗源等地养殖大黄鱼中爆发的一种传染性疾病,发病鱼多为10-12cm的幼鱼,其临床症状表现为体色变深、拒食、反应迟钝、在水面缓慢浮游,最后死亡,发病高峰期死亡率达70%以上。经组织病理学和电镜形态学分析,认为该病毒属于虹彩病毒(iridovirus),并暂将其命名为大黄鱼虹彩病毒(Largeyellowcroakeriridovirus)。对于大黄鱼虹彩病毒,目前尚没有特效的治疗方法,病毒的早期检测和诊断仍是最重要的防治手段。因此,建立灵敏、准确、快捷、方本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种大黄鱼虹彩病毒(LYCIV)核酸的检测试剂盒,包括:大黄鱼虹彩病毒正向引物、反向引物以及特异性荧光探针,其中所述大黄鱼虹彩病毒正向引物核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示、所述大黄鱼虹彩病毒反向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述特异性荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3,其5’端标记有荧光报告基团,3’端标记有荧光淬灭基团。/n

【技术特征摘要】
1.一种大黄鱼虹彩病毒(LYCIV)核酸的检测试剂盒,包括:大黄鱼虹彩病毒正向引物、反向引物以及特异性荧光探针,其中所述大黄鱼虹彩病毒正向引物核苷酸序列如SEQIDNO.1所示、所述大黄鱼虹彩病毒反向引物核苷酸序列如SEQIDNO.2所示,所述特异性荧光探针的核苷酸序列如SEQIDNO.3,其5’端标记有荧光报告基团,3’端标记有荧光淬灭基团。


2.根据权利要求1所述的核酸检测试剂盒,所述特异性荧光探针的荧光报告基团选自FAM、VIC、JOE、TET、CY3、CY5、ROX、TexasRed或LCRED460中的一种,荧光淬灭基因选自BHQ1、BHQ2、BHQ3、Dabcy1或Tamra中的一种。


3.根据权利要求1和2所述的核酸检测试剂盒,还包括引物混合液、特异性荧光探针、ABuffer、BBuffer、RAA干粉试剂、大黄鱼虹彩病毒标准品和ddH2O中至少一种。


4.根据权利要求3所述的试剂盒,其中,所述ABuffer为20%PEG;BBuffer为280mMMgAc。


5.根据权利要求5所述的试剂盒,其中,所述的RAA干粉试剂的成分如下:1mmol/LdNTP、90ng/μLSSB蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员:郑晓聪钱冬程奇于力刘荭黄震巨张建勋肖文余国君史秀杰贾鹏王津津何俊强刘莹温智清
申请(专利权)人:杭州众测生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:浙江;33

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