二重荧光LAMP区分新城疫强弱毒检测试剂盒及其引物组制造技术

本发明专利技术公开了二重荧光LAMP区分新城疫强弱毒检测引物组，包括引物1至引物6，它们分别具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.6的碱基序列，其中引物5和引物6为taqman探针，它们使扩增反应具有很高的特异性，能分别与NDV强毒和弱毒的F基因裂解位点杂合，反应后在不同波长的荧光下发出不同颜色的荧光，从而实现快速敏感特异的鉴别NDV强弱毒株。据此，发明专利技术人还研制了相应试剂盒并建立相应二重荧光LAMP方法。总之，本发明专利技术具有比常规检测方法更特异、更敏感的特点，仅需使用一台能控温的水浴锅和荧光成像仪，适合在基层兽医站和具备基本实验仪器的养殖场中进行快速检测，具有较好的应用前景。

Double fluorescent lamp to distinguish the strong and weak Newcastle disease virus detection kit and its primer set

【技术实现步骤摘要】
二重荧光LAMP区分新城疫强弱毒检测试剂盒及其引物组
本专利技术属于病毒检测
，尤其涉及一种二重荧光LAMP区分新城疫强弱毒检测试剂盒及其引物组。
技术介绍
新城疫(Newcastledisease，ND)是由新城疫病毒(Newcastlediseasevirus，NDV)引起的以感染禽类为主的一种急性、烈性传染病。尽管新城疫只有一个血清型，但是不同毒株之间的生物学特性存在明显差异。目前主要以NDVF蛋白的裂解位点为鉴别NDV强弱毒株的分子标记。传统的检测方法需要使用昂贵的仪器和试剂等。环介导等温扩增技术(loop-mediatedisothermalamplification，LAMP)是由Notomi等于2000年建立的一种新型核酸扩增技术，该技术具有操作简便、反应快速、成本低廉和结果可视化等优点，目前在一些病原微生物的检测中被广泛运用。传统的LAMP检测方法中，创新性的加入taqman探针，反应时特异性的taqman探针会与扩增产物杂合并随着扩增进行过程水解，发出荧光。目前，国内外均未见有建立二重荧光LAMP区分新城本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.二重荧光LAMP区分新城疫强弱毒检测引物组，其特征在于包括引物1至引物6，它们分别具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.6的碱基序列。/n

【技术特征摘要】
1.二重荧光LAMP区分新城疫强弱毒检测引物组，其特征在于包括引物1至引物6，它们分别具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.6的碱基序列。


2.根据权利要求1所述的二重荧光LAMP区分新城疫强弱毒检测引物组，其特征在于：所述引物5和引物6为taqman探针，引物5在5’端和3’端分别标记5-FAM荧光基团和淬灭基团BHQ-1，引物6在5’端和3’端分别标记CY5荧光基团和淬灭基团BHQ-3。


3.根据权利要求1所述的二重荧光LAMP区分新城疫强弱毒检测引物组，其特征在于：所述引物1至引物6的摩尔比为16:16:2:2:1:1。


4.权利要求1所述的二重荧光LAMP区分新城疫强弱毒检测引物组在环介导等温扩增中的应用。


5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于环介导等温扩增的条件为62℃反应60min，80℃作用5min灭活。


6.二重荧光LAMP区...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢芝勋，曾婷婷，谢丽基，罗思思，黄娇玲，张艳芳，张民秀，范晴，王盛，邓显文，谢志勤，
申请(专利权)人：广西壮族自治区兽医研究所，
类型：发明
国别省市：广西;45