一种快速检测罗汉果番木瓜环斑病毒的方法技术

一种快速检测罗汉果番木瓜环斑病毒的方法，所述方法包括：1)检测引物的设计，2)待测罗汉果总RNA提取，3)第一链cDNA合成，4)采用特异引物对进行PCR扩增，5)检测扩增产物目标片段的长度判断是否感染番木瓜环斑病毒。本发明专利技术在罗汉果番木瓜环斑病毒最保守区域设计特异性引物对，避开某些变异株的变异区，预期产物特异性强、敏感性高、重复性好、假阳性机率低；同时，相对于传统的ELISA法及cDNA分子探针法，本发明专利技术检测成本低、检测周期短，可实现幼苗期罗汉果番木瓜环斑病毒的快速检测。

A method for rapid detection of papaya ringspot virus in Siraitia grosvenorii

【技术实现步骤摘要】
一种快速检测罗汉果番木瓜环斑病毒的方法
本专利技术涉及植物病毒检测领域，特别涉及一种快速检测罗汉果番木瓜环斑病毒的方法。
技术介绍
随着罗汉果生产的规模化，许多问题逐渐暴露出来，并且亟待解决。如罗汉果生产扩大与当地生态保护之间的矛盾，罗汉果品种退化，病虫害大规模地发生，生产技术有待规范化等等。特别是其病虫害的发生，严重制约着罗汉果生产的发展。危害罗汉果的病虫害主要有根结线虫病、病毒病、芽枯病、瓜藤天牛等。特别是罗汉果根结线虫病及病毒病，给罗汉果的生产造成了严重的影响，不仅是产量的损失，还造成品质的严重下降，降低了果实的等级，进而影响到果农的收益。目前这两种病害都没有很好的防治方法。据林纬等调查，永福县传统种薯块茎种植的罗汉果病毒病病株率高达100％，采用罗汉果组培苗种植的发病率较低。在罗汉果果园附近种植葫芦科植物的地方发病重；平地栽培比深山种植发病重，留薯年限越长，病害越重。罗汉果病毒病对产量的影响随植株发病时期而异。苗期发病，植株多数严重矮化，不能结果；生长中期(开花前)受害，植株稍微矮化，茎蔓可以上棚结小果，经济价值较低；植株开花结果期被害本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速检测罗汉果番木瓜环斑病毒的方法，其特征在于，所述的方法采用包括以下任一引物对进行PCR检测：/n引物对1/npv1：其核苷酸序列如SED ID No.1所示；/npv2：其核苷酸序列如SED ID No.2所示；/n引物对2/nPv1：其核苷酸序列如SED ID No.1所示；/nPv3：其核苷酸序列如SED ID No.3所示；/n引物对3/nPv4：其核苷酸序列如SED ID No.4所示；/nPv5：其核苷酸序列如SED ID No.5所示；/n引物对4/nPv6：其核苷酸序列如SED ID No.6所示；/nPv7：其核苷酸序列如SED ID No.7所示；/n引物对5/n...

【技术特征摘要】
1.一种快速检测罗汉果番木瓜环斑病毒的方法，其特征在于，所述的方法采用包括以下任一引物对进行PCR检测：
引物对1
pv1：其核苷酸序列如SEDIDNo.1所示；
pv2：其核苷酸序列如SEDIDNo.2所示；
引物对2
Pv1：其核苷酸序列如SEDIDNo.1所示；
Pv3：其核苷酸序列如SEDIDNo.3所示；
引物对3
Pv4：其核苷酸序列如SEDIDNo.4所示；
Pv5：其核苷酸序列如SEDIDNo.5所示；
引物对4
Pv6：其核苷酸序列如SEDIDNo.6所示；
Pv7：其核苷酸序列如SEDIDNo.7所示；
引物对5
Pv1：其核苷酸序列如SEDIDNo.1所示；
Pv8：其核苷酸序列如SEDIDNo.8所示。


2.一种如权利要求1所述的一种快速检测罗汉果番木瓜环斑病毒的方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)提取待测罗汉果的总RNA；
2)以所提取的总RNA为模板，反转录合成第一链cDNA；
3)以步骤2)得到的cDNA样品为模板，采用所述的任一引物对进行PCR，得到扩增产物，检测扩增产物的长度；
4)根据扩增产物目标片段的长度判断是否感染番木瓜环斑病毒，若所述扩增产物长度与目标片段的长度相符，则所述待测罗汉果感染番木瓜环...

【专利技术属性】
技术研发人员：张玉华，兰玉，莫雪燕，
申请(专利权)人：桂林莱茵生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广西;45