传染性胰腺坏死病（IPNV）的RAA恒温荧光检测方法及试剂技术

本发明专利技术公开了一种传染性胰腺坏死病（IPNV）RAA恒温荧光检测方法和检测试剂盒。检测试剂盒包括一条正向引物SEQ ID NO.1、一条反向引物SEQ ID NO.2、一条特异性荧光探针SEQ ID NO.3、反应液、逆转录酶、重组聚合酶和对照品。本发明专利技术的试剂盒特异性强；检测灵敏度高，可达到0.78fg/μL；准确度高、可靠；操作简便快捷，适合现场检测，具有广泛的应用场景。

RAA constant temperature fluorescence detection method and reagent for infectious pancreatic necrosis disease (IPNV)

【技术实现步骤摘要】
传染性胰腺坏死病(IPNV)的RAA恒温荧光检测方法及试剂
本专利技术属于分子生物学
，涉及海洋水产养殖业的检测方法，具体涉及一种传染性胰腺坏死病的RAA恒温荧光检测方法及试剂盒。
技术介绍
传染性胰腺坏死病((Infectiouspancreaticnecrosisvirus，IPNV)主要感染鲑鳟稚鱼，不仅危害大西洋鲑、虹鳟、北极红点鲑、棕鳟和几种太平洋大麻哈鱼类，还危害一些养殖的海水鱼类，海鲈、五条、大菱鲆、欧洲黄盖鲽、庸鲽、多佛鳎、塞内加尔鳎和大西洋鳕等。在世界很多国家特别是大量养殖鲑鳟鱼类的国家如美国、日本、加拿大和欧洲等国均有发生。近年来随着水生动物进口贸易的增加，传染性胰脏坏死病已传入我国并在一些地区流行，造成了严重的经济损失。IPNV属于双链RNA病毒科(Birnaviridae)的水生双链RNA病毒属(Aquabirnavirus)，病毒颗粒呈正20面体，无囊膜。衣壳内有由2个片段组成的双股RNA基因，片段A编码一个多聚蛋白，包括VP2、VP3、VP4，并通过间隔的ORF编码一个非结构蛋白VP5；片段B编码一个依本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种传染性胰腺坏死病（IPNV）核酸的检测试剂盒，包括：传染性胰腺坏死病正向引物、反向引物以及特异性荧光探针，其中所述传染性胰腺坏死病正向引物核苷酸序列如SEQID NO.1所示、所述传染性胰腺坏死病反向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述特异性荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3，其5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团。/n

【技术特征摘要】
1.一种传染性胰腺坏死病（IPNV）核酸的检测试剂盒，包括：传染性胰腺坏死病正向引物、反向引物以及特异性荧光探针，其中所述传染性胰腺坏死病正向引物核苷酸序列如SEQIDNO.1所示、所述传染性胰腺坏死病反向引物核苷酸序列如SEQIDNO.2所示，所述特异性荧光探针的核苷酸序列如SEQIDNO.3，其5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团。


2.根据权利要求1所述的核酸检测试剂盒，所述特异性荧光探针的荧光报告基团选自FAM、VIC、JOE、TET、CY3、CY5、ROX、TexasRed或LCRED460中的一种，荧光淬灭基因选自BHQ1、BHQ2、BHQ3、Dabcy1或Tamra中的一种。


3.根据权利要求1和2所述的核酸检测试剂盒，还包括引物混合液、特异性荧光探针、ABuffer、BBuffer、RAA干粉试剂、传染性胰腺坏死病标准品和DEPC处理水中至少一种。


4.根据权利要求3所述的试剂盒，所述的逆转录体系由RTE逆转录酶、RNA酶抑制剂组成。


5.根据权利要求3所述的试剂盒，其中，所述ABuffer为20%PEG；BBuffer为280mMMgAc。


6.根据权利要求5所述的试剂盒，其中，所述的RAA干粉试剂的成分如...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘荭，钱冬，程奇，贾鹏，张建勋，肖文，余国君，史秀杰，郑晓聪，王津津，于力，何俊强，刘莹，温智清，
申请(专利权)人：杭州众测生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33