用于检测PRRSV-N基因的特异性引物和探针及其试剂盒与使用方法技术

本发明专利技术公开了一种用于检测PRRSV‑N基因的特异性引物和探针及其试剂盒与使用方法。本发明专利技术发现了适合作检测PRRSV‑N基因的特异性引物和探针，并采用基因克隆技术，将PRRSV‑N基因片段插入到载体pMD18‑T中，获得含有PRRSV‑N基因片段的重组质粒，以此作为标准品，并组合得到PCR检测试剂盒，通过优化PCR反应条件，建立以实时荧光定量聚合酶链反应为平台的检测方法，并对所建立的方法进行评估。能定性或定量检测或辅助检测PRRSV‑N基因；制备定性或定量检测或辅助检测PRRSV‑N基因产品。对判PRRSV‑N基因的含量以至于后续研究具有重要意义。

Specific primers and probes for prrsv-n gene detection and their kits and methods of use

【技术实现步骤摘要】
用于检测PRRSV-N基因的特异性引物和探针及其试剂盒与使用方法
本专利技术涉及分子生物学和体外诊断试剂
，尤其是用于检测PRRSV-N基因的特异性引物和探针及其试剂盒与使用方法。
技术介绍
猪繁殖与呼吸综合征(Porcinereproductiveandrespiratorysyndrome，PRRS)也称猪蓝耳病，其病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus，PRRSV)。PRRSV具有高度传染性，既可水平传播，也可通过胎盘垂直传播感染胎儿，仔猪及成年猪感染PRRSV后，临床症状主要表现为呼吸困难、肺炎、生长速度减慢。由于PRRSV本身的高致病性及因其感染造成的免疫抑制极可能出现其他病毒或细菌的继发性感染，因此死亡率很高，给世界养猪业带来极大的威胁。PRRSV有两个基因型，即LV株为代表的欧洲型和VR-2332株为代表的美洲型。PRRSV是单股正链RNA病毒，其基因组包含至少9个开放阅读框(OpenReadingFrame，ORF)，其中ORF1a本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测PRRSV-N基因的特异性引物和探针，其特征在于：探针序列为：5'CCCAACAAAACCAGTCCAGAGGCAAGG 3'；特异性引物为下述序列或为下述序列的互补链序列：上游引物序列为5'GTGCCAAATGCTGGGTAAGAT 3'；下游引物序列为5'CCGCTCACTGGGGGTAAA3'。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于检测PRRSV-N基因的特异性引物和探针，其特征在于：探针序列为：5'CCCAACAAAACCAGTCCAGAGGCAAGG3'；特异性引物为下述序列或为下述序列的互补链序列：上游引物序列为5'GTGCCAAATGCTGGGTAAGAT3'；下游引物序列为5'CCGCTCACTGGGGGTAAA3'。


2.根据权利要求1所述的用于检测PRRSV-N基因的特异性引物和探针，其特征在于：所述的探针5’端标记的荧光报告基团为FAM，3’端标记的荧光淬灭基团为BHQ。


3.一种采用如权利要求1所述的引物和探针的PRRSV-N基因的实时荧光定量PCR试剂盒，其特征在于：该试剂盒的组成包括所述的特异性引物与探针；采用...

【专利技术属性】
技术研发人员：万彪，嵇辛勤，胡焱，龙丹丹，邓珊珊，黄梦秋，
申请(专利权)人：贵州大学，
类型：发明
国别省市：贵州;52