鲤春病毒血症病毒(SVCV)的RAA恒温荧光检测方法及试剂技术

技术编号:22878330 阅读:31 留言:0更新日期:2019-12-21 05:21
本发明专利技术公开了一种鲤春病毒血症病毒(SVCV)RAA恒温荧光检测方法和检测试剂盒。检测试剂盒包括一条正向引物SEQ ID NO.1、一条反向引物SEQ ID NO.2、一条特异性荧光探针SEQ ID NO.3、反应液、逆转录酶、重组聚合酶和对照品。本发明专利技术的试剂盒特异性强;检测灵敏度高,可达到0.1fg/μL;准确度高、可靠;操作简便快捷,适合现场检测,具有广泛的应用场景。

RAA constant temperature fluorescence detection method and reagent for Carpinus viremia virus (SVCV)

【技术实现步骤摘要】
鲤春病毒血症病毒(SVCV)的RAA恒温荧光检测方法及试剂
本专利技术属于分子生物学
,涉及海洋水产养殖业的检测方法,具体涉及一种鲤春病毒血症病毒的RAA恒温荧光检测方法及试剂盒。
技术介绍
鲤春病毒血症(Springviraemiaofcarp,SVC)是一种以出血为主要临床症状并伴有高度传染性的急性流行病,其病原为鲤春病毒血症病毒(Springviraemiaofcarpvirus,SVCV)鲤春病毒血症病毒(SVCV),又名鲤弹状病毒,属弹状病毒科(Rhabdoriridae),水泡病毒属(Vesiculorirus)。病毒粒子90nm~180nm,宽60nm~90nm,有类脂囊膜,核衣壳中空,螺旋状对称,直径50nm。病毒基因组为单股、负链、不分节段的RNA,长约11019个核苷酸,主要包含5个基因。病毒粒子浮力密度在CsCl中为1.195g/ml~1.200g/ml,在15%~60%的蔗糖溶液中为1.16g/ml,在5%~25%的蔗糖梯度中沉降系数为38s~40s。病毒的抵抗力不强,感染性受环境因子的影响较大,对酸、热及脂溶剂敏本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鲤春病毒血症病毒(SVCV)核酸的检测试剂盒,包括:鲤春病毒血症病毒正向引物、反向引物以及特异性荧光探针,其中所述鲤春病毒血症病毒正向引物核苷酸序列如SEQID NO.1所示、所述鲤春病毒血症病毒反向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述特异性荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3,其5’端标记有荧光报告基团,3’端标记有荧光淬灭基团。/n

【技术特征摘要】
1.一种鲤春病毒血症病毒(SVCV)核酸的检测试剂盒,包括:鲤春病毒血症病毒正向引物、反向引物以及特异性荧光探针,其中所述鲤春病毒血症病毒正向引物核苷酸序列如SEQIDNO.1所示、所述鲤春病毒血症病毒反向引物核苷酸序列如SEQIDNO.2所示,所述特异性荧光探针的核苷酸序列如SEQIDNO.3,其5’端标记有荧光报告基团,3’端标记有荧光淬灭基团。


2.根据权利要求1所述的核酸检测试剂盒,所述特异性荧光探针的荧光报告基团选自FAM、VIC、JOE、TET、CY3、CY5、ROX、TexasRed或LCRED460中的一种,荧光淬灭基因选自BHQ1、BHQ2、BHQ3、Dabcy1或Tamra中的一种。


3.根据权利要求1和2所述的核酸检测试剂盒,还包括引物混合液、特异性荧光探针、ABuffer、BBuffer、RAA干粉试剂、鲤春病毒血症病毒标准品和DEPC处理水中至少一种。


4.根据权利要求3所述的试剂盒,所述的逆转录体系由RTE逆转录酶、RNA酶抑制剂组成。


5.根据权利要求3所述的试剂盒,其中,所述ABuffer为20%PEG;BBuffer为280mMMgAc。


6.根据权利要求5所述的试剂盒,其中,所述的RAA干粉试剂的成分如下:1mmol/LdNTP、90ng/μLSSB蛋白、120ng/μLre...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘荭钱冬程奇王津津黄震巨张建勋肖文余国君史秀杰郑晓聪贾鹏于力何俊强刘莹温智清
申请(专利权)人:杭州众测生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:浙江;33

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