微生物共生培养菌剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及微生物领域，具体而言，提供了一种微生物共生培养菌剂及其制备方法和应用。本发明专利技术提供了一种微生物共生培养菌剂，具体包括假单胞菌、枯草芽孢杆菌、假丝酵母和黄单胞菌。该菌剂环境适应性好，抗有毒污染能力强，可以良好的应用于各种石油污染环境中，通过共生培养，菌种间达到了稳定的平衡，可以大规模发酵制备。通过将目标菌种共同培养，利用菌种间的相互作用形成稳定的共生体系，制备方法简单，制备得到的微生物共生培养菌剂菌种之间平衡稳定，环境适应能力强。该菌剂可以实现一次性处理石油污水或石油污泥，处理后达到直接排放的标准，极大降低了处理成本。

Symbiotic culture of microorganisms and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
微生物共生培养菌剂及其制备方法和应用
本专利技术涉及微生物领域，具体而言，涉及一种微生物共生培养菌剂及其制备方法和应用。
技术介绍
利用微生物降解石油油污是目前油污处理技术研究热点，但就目前来看，现有微生物分解石油油污技术存在诸多问题：一、单菌株降解石油油泥效率差，多种菌联合应用又使得处理过程繁杂、不可控，工程造价大；二、现有复合微生物菌剂为单一菌种复配而来，各菌株生长条件不同，复配制备需要借助多种工业化手段，工艺复杂，且菌剂环境适应性差，抗有毒污染能力弱、无法适应多变的石油环境，分解效率低，处理效果差；三、现有菌剂分解石油油污后，废水还需经后续污水系统再处理才可排放，工艺复杂，成本高。此外，由于石油组分十分复杂，而微生物分解具有一定的偏向性，单靠某一类菌无法实现石油多组分的快速、彻底分解，石油油污处理较好的方式为多种微生物共同作用，然而现有技术中往往因为菌种的需氧量等不同而不能实现不同种类菌种共同应用的效果，从而现有技术中所用的微生物菌剂由于菌种的限制均不能实现石油油污的更好处理。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供一种微生物共生培养菌剂，以填补现有技术中缺少可以较好的适应油污环境、高效降解石油油污并且对环境友好的微生物菌剂的空白。本专利技术的第二目的在于提供上述微生物共生培养菌剂的制备方法，制备得到的微生物共生培养菌剂环境适应性好。本专利技术的第三目的在于提供上述微生物共生培养菌剂在石油油污处理中的应用。为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：一种微生物共生培养菌剂，包括：假单胞菌、枯草芽孢杆菌、假丝酵母和黄单胞菌。进一步地，所述微生物共生培养菌剂还包括产碱杆菌、节杆菌、巴氏醋杆菌、友好戈登氏菌、喜盐微球菌、脱氮硫杆菌、短小芽孢杆菌、亚硝化单胞菌、球形芽孢杆菌、短杆菌或嗜麦芽寡养单胞菌中的至少一种。进一步地，所述微生物共生培养菌剂还包括丁酸梭菌、乳酸杆菌或双歧杆菌中的至少一种。微生物共生培养菌剂的制备方法，将目标菌种混合，进行诱导共同培养，得到微生物共生培养菌剂；所述目标菌种包括假单胞菌、枯草芽孢杆菌、假丝酵母和黄单胞菌。进一步地，目标菌种均独立地以2-3％的接种量接种于共同发酵培养基中，25-40℃培养2-3天，得到微生物共生培养菌剂；所述目标菌种包括假单胞菌、枯草芽孢杆菌、假丝酵母和黄单胞菌；所述目标菌种的初始浓度均独立地为105-107cfu/mL。进一步地，所述目标菌种还包括产碱杆菌、节杆菌、巴氏醋杆菌、友好戈登氏菌、喜盐微球菌、脱氮硫杆菌、短小芽孢杆菌、亚硝化单胞菌、球形芽孢杆菌、短杆菌或嗜麦芽寡养单胞菌中的至少一种。进一步地，所述目标菌种还包括经过诱导处理的厌氧菌；所述厌氧菌包括丁酸梭菌、乳酸杆菌或双歧杆菌中的至少一种；所述诱导处理包括：在厌氧菌的培养过程中，每1-5h加入超氧化物歧化酶0.005-0.5w/v％，和，每2-3天增加O2含量1％-5％；优选地，所述超氧化物歧化酶的加入量为0.005-0.1w/v％，进一步优选为0.005-0.05w/v％。进一步地，所述诱导处理中在增加O2含量时，将CO2含量降低到0.02％-0.5％。进一步地，所述共同发酵培养基每1L包括：牛肉膏4-6g、明胶胨15-17g、K2SO49-11g、MgCl21.2-1.6g、NaCl4-6g、红糖5-10g和溴化十六烷基三甲胺0.1-3g，pH7.2±0.2。微生物共生培养菌剂在石油油污处理中的应用。进一步地，所述石油油污包括石油污水或石油油泥。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：本专利技术提供了一种微生物共生培养菌剂，具体包括假单胞菌、枯草芽孢杆菌、假丝酵母和黄单胞菌。该菌剂避免了多种菌种需要联合依次使用的繁杂过程，降低了石油油污的处理成本。并且该菌剂环境适应性好，抗有毒污染能力强，可以良好的应用于各种污染环境中，通过共生培养，菌种间达到了稳定的平衡，生长速度快，可以大规模发酵制备。此外，该微生物共生培养菌剂石油分解效率高，处理后的污水达到处理标准，可以直接排放。本专利技术提供上述微生物共生培养菌剂的制备方法，该方法通过将目标菌种共同培养，利用菌种间的相互作用形成稳定的共生体系，制备方法简单，制备得到的微生物共生培养菌剂菌种之间平衡稳定，环境适应能力强。具体实施方式下面将结合实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限制本专利技术的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。本专利技术中，如果没有特别的说明，本文所提到的所有实施方式以及优选实施方法可以相互组合形成新的技术方案。本专利技术中，如果没有特别的说明，本文所提到的所有技术特征以及优选特征可以相互组合形成新的技术方案。除非另有说明，本文中所用的专业与科学术语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法或材料也可应用于本专利技术中。一种微生物共生培养菌剂，包括：假单胞菌、枯草芽孢杆菌、假丝酵母和黄单胞菌。假单胞菌具有极强的有机物分解能力，多种有机物均可作为能量来源；枯草芽孢杆菌生长速度快，对环境要求低，具有较强的降解蛋白质等大分子物质的酶系；假丝酵母对日光、化学制剂等抵抗力较强，可用于石油发酵脱蜡；黄单胞菌可用于石油降解中，对石油烃的降解具有良好的作用。该菌剂避免了多种菌种需要联合依次使用的繁杂过程，降低了石油油污的处理成本。并且该菌剂中各菌种配合使用，环境适应性好，抗有毒污染能力强，可以良好的应用于各种石油污染环境中，通过共生培养，菌种间达到了稳定的平衡，生长速度快，可以大规模发酵制备。此外，该微生物共生培养菌剂石油分解效率高，处理后的污水达到处理标准，可以直接排放。在优选地实施方式中，微生物共生培养菌剂还包括产碱杆菌、节杆菌、巴氏醋杆菌、友好戈登氏菌、喜盐微球菌、脱氮硫杆菌、短小芽孢杆菌、亚硝化单胞菌、球形芽孢杆菌、短杆菌或嗜麦芽寡养单胞菌中的至少一种。产碱杆菌、节杆菌、巴氏醋杆菌、友好戈登氏菌、喜盐微球菌、脱氮硫杆菌、短小芽孢杆菌、亚硝化单胞菌、球形芽孢杆菌、短杆菌以及嗜麦芽寡养单胞菌均为好氧菌，与假单胞菌、枯草芽孢杆菌、假丝酵母和黄单胞菌的需氧量相近，可以直接与假单胞菌、枯草芽孢杆菌、假丝酵母和黄单胞菌共同培养制得共生菌剂。可以理解的是，本申请中的微生物共生培养菌剂除了假单胞菌、枯草芽孢杆菌、假丝酵母和黄单胞菌外，例如但不限于还含有产碱杆菌、节杆菌、巴氏醋杆菌、球形芽孢杆菌、短杆菌、巴氏醋杆菌和短杆菌、短杆菌和嗜麦芽寡养单胞菌、或者球形芽孢杆菌和巴氏醋杆菌和嗜麦芽寡养单胞菌等。上述菌种的加入增加了微生物共生培养菌剂的生物多样性，菌种之间相互作用关系更加多样，代谢途径更加复杂，提高了石油降解能力和环境适应能力。在优选地实施方式中，微生物共生培养菌剂还包括丁酸梭菌、乳酸杆菌或本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种微生物共生培养菌剂，其特征在于，包括：假单胞菌、枯草芽孢杆菌、假丝酵母和黄单胞菌。/n

【技术特征摘要】
1.一种微生物共生培养菌剂，其特征在于，包括：假单胞菌、枯草芽孢杆菌、假丝酵母和黄单胞菌。


2.根据权利要求1所述的微生物共生培养菌剂，其特征在于，所述微生物共生培养菌剂还包括产碱杆菌、节杆菌、巴氏醋杆菌、友好戈登氏菌、喜盐微球菌、脱氮硫杆菌、短小芽孢杆菌、亚硝化单胞菌、球形芽孢杆菌、短杆菌或嗜麦芽寡养单胞菌中的至少一种。


3.根据权利要求1所述的微生物共生培养菌剂，其特征在于，所述微生物共生培养菌剂还包括丁酸梭菌、乳酸杆菌或双歧杆菌中的至少一种。


4.权利要求1所述的微生物共生培养菌剂的制备方法，其特征在于，将目标菌种混合，进行诱导共同培养，得到微生物共生培养菌剂；
所述目标菌种包括假单胞菌、枯草芽孢杆菌、假丝酵母和黄单胞菌。


5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，目标菌种均独立地以2-3％的接种量接种于共同发酵培养基中，25-40℃培养2-3天，得到微生物共生培养菌剂；
所述目标菌种包括假单胞菌、枯草芽孢杆菌、假丝酵母和黄单胞菌；
所述目标菌种的初始浓度均独立地为105-107cfu/mL。


6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述目标菌种还包括产碱杆菌、节杆菌、...

【专利技术属性】
技术研发人员：王代军，
申请(专利权)人：浙江黛君生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33