【技术实现步骤摘要】
一种FMR1基因CGG重复序列的检测方法及其应用
本专利技术涉及分子生物学诊断领域，具体涉及一种FMR1基因PCR扩增方法与脆性X综合症相关基因FMR1基因核酸检测试剂盒及其应用。
技术介绍
脆性X综合症是仅次于唐氏症，造成智能障碍的第二原因，然而大部分的唐氏症不会遗传，但脆性X综合症是一种性联遗传性疾病。脆性X综合症具有范围广泛的病征，从轻微的学习障碍到严重智能障碍都有可能发生。除了智能障碍外，其他可能的现象包括:情绪问题、语言迟缓、注意力不集中、过动、自闭、不善与人接触等。根据统计，此症男性发生率约1/4,000，女性的发生率约1/5,000-1/8,000。致病的原因是FMR1基因内5’端非转录区发生CGG重复次数异常增加，导致FMRP基因产物的缺失或减少，FMRP是一种重要的脑部物质，为RNA结合蛋白，可调节许多突触蛋白的合成，缺乏时会会影响大脑发育和功能异常。美国医学遗传学会(ACMG)依据FMR1CGG重复次数，定义出CGG重复次数小于45为“正常型”、CGG重复次数45-54为“中间型”、CGG重复次5...
【技术保护点】
1.一种FMR1基因CGG重复数的PCR扩增反应检测方法，其特征在于：利用四种不同引物进行PCR反应，第一引物与第二引物位于FMR1基因5’端非转录区中CGG重复序列外的上游与下游，第三引物含CGG、GGC、GCG、CCG、GCC或CGC序列重复序列与非人源性基因组序列，第四引物包含第三引物的非人源性基因组序列。/n
【技术特征摘要】
1.一种FMR1基因CGG重复数的PCR扩增反应检测方法，其特征在于：利用四种不同引物进行PCR反应，第一引物与第二引物位于FMR1基因5’端非转录区中CGG重复序列外的上游与下游，第三引物含CGG、GGC、GCG、CCG、GCC或CGC序列重复序列与非人源性基因组序列，第四引物包含第三引物的非人源性基因组序列。
2.一种FMR1基因CGG重复数的PCR扩增反应检测方法，其特征在于：利用四种不同引物进行PCR反应，第一引物与第二引物为包含FMR1基因5’端非转录区中CGG重复序列以外的序列与非人源性基因组序列组成的上游与下游引物，第三引物含CGG、GGC、GCG、CCG、GCC或CGC序列重复序列与非人源性基因组序列，第四引物包含第一引物、第二引物和第三引物的非人源性基因组序列。
3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，第三引物在PCR扩增反应中的终浓度低于第一引物、第二引物与第四引物在PCR扩增反应中的终浓度至少1000倍。
4.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，第三引物的CGG、GGC、GCG、CCG、GCC或CGC重复序列，包含4到7个CGG、GGC、GCG、CCG、GCC或CGC重复序列。
5.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述四种引物中至少一种引物包含荧光修饰。
6.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述的第一引物与第二引物包括以下序列：
第一引物P1：5’-CGCTCAGCTCCGTTTCGGTTTCACTTCC-3’;
第二引物P2：5’-GTAGAAAGCGCCATTGGAGCCCCGCACT-3’。
7.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述的第三引物与第四引物包括以下序列：
第三引物P3：
5’-CTCGACGCACGCTCCTGCACAGCCTCCGGCGGCGGCGGCGG-3’;
第四引物P4：5’-CTCGACGCACGCTCCTGCACAGCCTC-3’;
其中划单线部分为非人源性基因组序列，加粗部分为CGG重复序列。
8.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述的第三引物与第四引物包括以下序列：
第三引物P5：
5...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭亦亦，萧羽乔，邱一帆，钟丽霞，李淑如，
申请(专利权)人：胜亚生物科技厦门有限公司，
类型：发明
国别省市：福建;35
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