一种卵巢早衰相关基因全外显子扩增及检测方法技术

本发明专利技术涉及生物基因检测技术领域，旨在提供一种卵巢早衰相关基因全外显子扩增及检测方法。包括以下步骤：从检测材料中提取基因组DNA；利用SEQ ID NO：1～120共120条引物，针对FMR1、FOXL2、FSHR、POF1B、INHA、NOBOX、GDF9、BMP15、FIGLA共9个基因全部外显子进行扩增试验；扩增试验及阴性对照共计61个PCR反应是同步进行的，120条引物的Tm值范围为57～62℃；采用琼脂糖电泳和凝胶成像系统对扩增产物进行检测；使用自动测序仪对扩增产物的测序结果进行分析。本发明专利技术通过优化的PCR扩增特异性同步扩增了与卵巢早衰相关的9个基因的全部外显子，为下游的检测提供了检测原材料。操作简便，扩增时间短，特异性强，重复性好。大大提高了检出的阳性率，应用前景广阔。

A method of amplification and detection of all exons of genes related to premature ovarian failure

【技术实现步骤摘要】
一种卵巢早衰相关基因全外显子扩增及检测方法
本专利技术涉及生物基因检测
，具体为一种卵巢早衰相关基因全外显子扩增及检测方法。
技术介绍
卵巢早衰(prematureovarianfailure,POF)是指月经初潮年龄正常或延迟、第二性征发育正常的女性，在40岁之前出现围绝经期综合征等症状，持续6个月以上闭经，生殖器官萎缩，性功能降低甚至不孕，促卵泡激素(folliclestimulatinghormone,FSH)和黄体生成素(luteinizinghormone,LH)质量浓度升高，雌二醇(Estradiol2,E2)质量浓度降低的一种妇科内分泌性疾病。国内外对卵巢早衰的研究表明，卵巢早衰患者在基因组水平存在某些基因发生突变的现象，卵巢早衰与基因突变关联性研究成果使基因筛查成为可能。研究表明：FMR1、FOXL2、FSHR、POF1B、INHA、NOBOX、GDF9、BMP15、FIGLA9个基因与卵巢早衰发病显著相关。9个基因中FMR1位于X染色体上，为脆性X染色体智力低下1号基因，FMR1基因突变与POF发病之间存在显著关本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种卵巢早衰相关基因全外显子扩增及检测方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)从检测材料中提取基因组DNA；/n(2)利用SEQ ID NO：1～120共120条引物，针对FMR1、FOXL2、FSHR、POF1B、INHA、NOBOX、GDF9、BMP15、FIGLA共9个基因全部外显子进行扩增试验；扩增试验及阴性对照共计61个PCR反应是同步进行的，所述120条引物的Tm值范围为57～62℃；/n(3)采用琼脂糖电泳和凝胶成像系统对扩增产物进行检测；/n(4)使用自动测序仪对扩增产物的测序结果进行分析。/n

【技术特征摘要】
1.一种卵巢早衰相关基因全外显子扩增及检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)从检测材料中提取基因组DNA；
(2)利用SEQIDNO：1～120共120条引物，针对FMR1、FOXL2、FSHR、POF1B、INHA、NOBOX、GDF9、BMP15、FIGLA共9个基因全部外显子进行扩增试验；扩增试验及阴性对照共计61个PCR反应是同步进行的，所述120条引物的Tm值范围为57～62℃；
(3)采用琼脂糖电泳和凝胶成像系统对扩增产物进行检测；
(4)使用自动测序仪对扩增产物的测序结果进行分析。
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【专利技术属性】
技术研发人员：张丹，黄荷凤，张润驹，李静怡，刘益枫，陈松长，徐谷峰，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33