The invention discloses a CRISPR \u2011 CAS system for diagnosing spinal muscular atrophy, including cas12. Preferably, the CRISPR \u2011 CAS system includes cas12, crrna, dsDNA and report RNA chains. At the same time, the invention also discloses the use of CRISPR \u2011 CAS system in the preparation of diagnostic spinal muscular atrophy kit. The CRISPR \u2011 CAS system provided by the invention can quickly detect the mutation of SMN1 gene, which is a pathogenic gene of spinal muscular atrophy. It has the advantages of high specificity and sensitivity, intuitionistic analysis of results, and accuracy of up to 100%. It is very suitable for large-scale clinical sample detection.
【技术实现步骤摘要】
一种诊断脊髓性肌萎缩症的CRISPR-Cas系统及其应用
本专利技术属于基因检测
，具体涉及一种诊断脊髓性肌萎缩症的CRISPR-Cas系统及其应用。
技术介绍
脊髓性肌萎缩症(SpinalMuscularAtrophy,SMA)，又称脊肌萎缩症，是常染色体隐性遗传性疾病，病理特点是脊髓前角细胞及脑干运动神经核变性，临床表现为进行性肌无力和肌萎缩，患者最终死于呼吸衰竭和肺部感染，居致死性常染色体遗传病第二位。该病在新生婴儿中的发病率约1/6000至1/10000，正常人群的携带率约1/40至1/50。按发病年龄、预后和遗传方式分为四型，儿童型有3上临床型(Ⅰ～Ⅰ型)，Ⅳ型为成人型。研究表明，该病的主要致病基因是运动神经元存活基因1(survivalmotorneuron,SMN1)，定位于5号染色体长臂1区3带。SMN1基因在全身组织中普遍表达，大部分细胞可以耐受低水平的SMN蛋白，但脊髓前角细胞(脊髓运动神经元)无法耐受低水平的SMN蛋白。人类基因组存在一个和SMN1高度同源的SMN2基因，两者的外显子区域只...
【技术保护点】
1.一种诊断脊髓性肌萎缩症的CRISPR-Cas系统，其特征在于，包括Cas12。/n
【技术特征摘要】
1.一种诊断脊髓性肌萎缩症的CRISPR-Cas系统，其特征在于，包括Cas12。
2.根据权利要求1所述的诊断脊髓性肌萎缩症的CRISPR-Cas系统，其特征在于，所述CRISPR-Cas系统包括Cas12、crRNA、dsDNA和报告RNA链。
3.根据权利要求1所述的诊断脊髓性肌萎缩症的CRISPR-Cas系统，其特征在于，所述crRNA序列如SEQIDNo.1所示；所述dsDNA扩增引物包括如SEQIDNo.2所示的上游引物和SEQIDNo.3所示的下游引物；所述报告RNA链序列如SEQIDNo.4所示，且报告RNA链的5’端修饰有荧光基团，3’端修饰有猝灭基团。
4.根据权利要求3所述的诊断脊髓性肌萎缩症的CRISPR-Cas系统，其特征在于，所述crRNA制备方法包括以下步骤：(1)设计并合成序列如SEQIDNo.1所示的crRNA；(2)用T7启动子转录试剂盒对步骤(1)获得的crRNA进行转录，即得所述crRNA。
5.根据权利要求3所述的诊断脊...
【专利技术属性】
技术研发人员：罗良平，唐佳，李旭，马巍，
申请(专利权)人：暨南大学，唐佳，
类型：发明
国别省市：广东;44
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