细胞渗透增强肽、组合物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及细胞渗透增强肽，包含所述细胞渗透增强肽及其组合、多肽因子及任选的ATP的组合物，以及它们在化妆品或护肤品中的应用。本发明专利技术还涉及所述组合物的制备方法。本发明专利技术的细胞渗透增强肽及其组合能够有效增强多肽因子等活性大分子的透皮作用，进而更好地发挥其美容、护肤功效。

Cell permeation enhancing peptide, composition and Application

The invention relates to cell penetration enhancer peptide, including the cell penetration enhancer peptide and its combination, peptide factor and optional ATP composition, and their application in cosmetics or skin care products. The invention also relates to a preparation method of the composition. The cell penetration enhancer peptide and its combination can effectively enhance the transdermal effect of active macromolecules such as polypeptide factor, so as to better play its beauty and skin care effects.

【技术实现步骤摘要】
细胞渗透增强肽、组合物及其应用
本专利技术属于化妆品
，具体涉及细胞渗透增强肽，包含所述细胞渗透增强肽的组合物，以及它们在制备化妆品或护肤品中的应用。
技术介绍
透皮递送功效成分是一种引人注目的全身药物递送途径，具有无痛、可靠、有针对性、高效等特点。然而，由于使用受到皮肤屏障，特别是角质层的屏障限制，所以大分子的透皮递送仍然是一个挑战。在化妆品领域，寡肽、多肽因子、活性细胞提取物等生物大分子活性成分由于显著的功效越来越受到行业的认可，但是这些功效成分均需要透过皮肤屏障对皮肤细胞进行信号激活等作用，因此开发一种针对活性大分子功效成分的透皮方案，对增强生物护肤品功效具有重要作用。例如，中国专利申请CN106084006A公开了一种透皮肽及其应用，具体涉及具有序列ACSSTKKHCG的透皮增强肽，及其在美容制剂、美发制剂或药物组合物中的应用，并声称使用该透皮增强肽，能够在不损伤皮肤的情况下实现活性物质的透皮吸收。又如，中国专利申请CN108186392A公开了一种含有表皮细胞生长因子的护肤美容组合物及其制备方法和用途，具体涉及氨基酸序列为ACSSTPSKHCG、ACSTSPSKHCG、ACSTTPSKHCG、ACSSRPSKHCG、ACSRSPSKHCG、ACSRRPSKHCG的透皮肽，其与表皮细胞生长因子及水的组合物能够极大地增强表皮生长因子透过皮肤的能力，使得表皮细胞生长因子得以透过皮肤角质层进入皮肤真皮层，从而发挥更好的美容作用。可见，现有技术种已经提出了由约10-11个氨基酸组成的能够增强活性大分子功效成分的透皮方案，然而，专利技术人通过大量实验研究发现，当氨基酸序列改变时，促进大分子透皮的效果也会发生较大改变，缺乏预见性。为丰富产品种类，仍需要针对活性大分子功效成分的新的透皮方案。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供具有全新序列的细胞渗透增强肽，以及包含该增强肽的组合物，能够有效的促进化妆品功效寡肽、细胞分泌多肽因子的透皮效率。通过以下技术方案实现本专利技术的上述目的：本专利技术的一方面提供了细胞渗透增强肽(cellpenetrationenhancementpeptide，简写为CPEP)，其具有氨基酸序列SEQIDNO.1～SEQIDNO.4中任意一种的序列。氨基酸序列SEQIDNO.1～SEQIDNO.4具体为：SEQIDNO.1：CSSSSSKHC(CPEP-9)；SEQIDNO.2：CSSSSSKHCG(CPEP-10N)；SEQIDNO.3：ACSSSSSKHC(CPEP-10C)；和SEQIDNO.4：ACSSSSSKHCG(CPEP-11)。本专利技术的另一方面提供了组合物，所述组合物包含：多肽因子，以及上述细胞渗透增强肽中的任意一种或它们的任意组合。以重量计，多肽因子与细胞渗透增强肽之比为：5～10:1，优选8:1。优选地，所述组合物中包含四种细胞渗透增强肽的组合，并且以重量计，各细胞渗透增强肽的比例CPEP-9:CPEP-10N:CPEP-10C:CPEP-11为0.5～1.5:0.5～1.5:0.5～1.5:1～3，优选1:1:1:2。所述多肽因子例如人EGF因子、人PDGF因子以及HGF因子或它们的任意组合。优选地，所述组合物中含有ATP。优选地，ATP的加入量为所述细胞渗透增强肽的重量的1～5倍，例如1倍、2倍、3倍、4倍、5倍等。本专利技术的再一方面提供了所述组合物的制备方法，所述方法包括将多肽因子、细胞渗透增强肽和任选的ATP相混合。本专利技术的再一方面提供了所述细胞渗透增强肽和/或所述组合物在制备化妆品或护肤品中的应用。进一步地，根据制备或施用的需要，所述化妆品或护肤品还包含其它化妆用可接受的组分。专利技术人通过筛选，成功获得了上面所述的细胞渗透增强肽，通过GeneScript生物科技有限公司进行固相合成，并进行有效性试验，结果发现，所述四种细胞渗透增强肽能够有效促进化妆品功效寡肽、细胞分泌多肽因子的透皮效率。尤其是令人惊奇地发现，当将上述四种细胞渗透增强肽组合使用时，尤其是CPEP-9:CPEP-10N:CPEP-10C:CPEP-11的比例为1:1:1:2时，显示出相较于单一细胞渗透增强肽更优的头皮促进作用。另外，专利技术人还意外发现向组合物中加入ATP，能够进一步增强细胞渗透增强肽及其组合对多肽因子的透皮促进作用，且增强作用依赖于ATP的浓度。附图简要说明图1为实施例3所使用的Franz透皮扩散仪器中透皮槽的结构示意图。图2为实施例3中透皮测试2小时后取样，用BCA法测定的各组下槽总蛋白浓度的柱状图。图3为实施例3中不同时间取样，用BCA法测定的各组下槽总蛋白浓度的柱状图。图4为实施例3中透皮测试2小时后取样，用ELISA法测定的各组下槽EGF浓度的柱状图。图5为实施例3中透皮测试2小时后取样，用ELISA法测定的各组下槽PDGF浓度的柱状图。图6为实施例3中透皮测试2小时后取样，用ELISA法测定的各组下槽HGF浓度的柱状图。图7为实施例3中研究ATP对透皮效率的影响时，用BCA法测定的下槽HGF浓度的柱状图。具体实施方案除非另有说明，本文所使用的所有技术和科学术语都具有如本领域普通技术人员所通常理解的含义。一般来说，本文所使用的术语是公知的并且常规使用于本领域。本专利技术所使用的主要术语定义如下：当在本文中使用时，术语“细胞渗透增强肽”是指能够促进活性大分子的透皮递送，从而增强活性大分子功效的活性肽，通常由8至12个氨基酸残基组成。本专利技术优选的细胞渗透增强肽的氨基酸序列如SEQIDNO.1～SEQIDNO.4所阐述。当在本文中使用时，术语“多肽因子”又可以称为“多肽细胞因子”，是指一类能在细胞间传递信息、具有免疫调节功能的，由10～50个氨基酸组成的肽。多肽因子通过大多数细胞外信号传导调节多种生物功能，包括先天和获得性免疫、造血、炎症和修复以及增殖。细胞因子可作用于分泌它们的细胞(自分泌作用)，作用于邻近细胞(旁分泌作用)，或在某些情况下作用于远处细胞(内分泌作用)。在本专利技术中，所述多肽因子选自于人EGF因子、人PDGF因子、HGF因子中的任意一种或它们的任意组合。在一些实施方案中，本专利技术的组合物还包含ATP。当在本专利技术的组合物中包含ATP时，ATP的加入量为所述细胞渗透增强肽的重量的1至5倍，例如1倍、2倍、3倍、4倍或5倍，以及上述含量范围内的任意数值。在本专利技术的组合物的制备方法中，可以采用任何本领域中已知的混合工艺过程将多肽因子、细胞渗透增强肽与任选的ATP相混合，本文于此不再赘述具体混合工艺过程，本领域技术人员能够根据实际需要选择恰当的混合工艺。在一些实施方案中，本专利技术的组合物可用于制备化妆品或护肤品。当在本文中使用时，化妆品是指以涂抹、喷洒或者其他类似方法，散布于人体表面的任何部位，如皮肤、毛发本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.细胞渗透增强肽，其具有如SEQ ID NO.1-4中任一项所阐述的氨基酸序列。/n

【技术特征摘要】
1.细胞渗透增强肽，其具有如SEQIDNO.1-4中任一项所阐述的氨基酸序列。


2.组合物，其包含：
多肽因子，和
根据权利要求1所述的细胞渗透增强肽中的任意一种或它们的任意组合。


3.根据权利要求2所述的组合物，其中，以重量计，所述多肽因子与细胞渗透增强肽之比为5～10:1。


4.根据权利要求2所述的组合物，其中，所述组合物包含含有四种细胞渗透增强肽的组合，所述四种细胞渗透增强肽CPEP-9、CPEP-10N、CPEP-10C和CPEP-11分别具有如SEQIDNO.1-4所阐述的氨基酸序列，并且以重量计，各细胞渗透增强肽之比CPEP-9:CPEP-10N:CPEP-10C:CPEP-11为0.5～1.5:0.5～1.5:0.5～1.5:1～...

【专利技术属性】
技术研发人员：李钧翔，周碧柳，陆益，
申请(专利权)人：启迪禾美生物科技嘉兴有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33