一种灵芝发酵水飞蓟新技术制造技术

本发明专利技术公开了一种灵芝发酵水飞蓟新技术，包括以下步骤：灵芝发酵前的准备、和灵芝发酵水飞蓟获取灵芝多糖‑水飞蓟素混合物。本发明专利技术通过提高培养基的pH值，一方面确保灵芝菌丝体生长不受影响；另一方面提高培养基pH值所得的水飞蓟素含量比没调pH值的高20%左右；本发明专利技术提供的新技术可一次性获得两种成分：灵芝多糖—水飞蓟素混合物，方便且节能。

A new technology of silymarin fermentation by Ganoderma lucidum

The invention discloses a new technology of Ganoderma lucidum fermenting silymarin, which comprises the following steps: preparation before Ganoderma lucidum fermenting, and obtaining ganoderma polysaccharide \u2011 silymarin mixture with Ganoderma lucidum fermenting silymarin. By increasing the pH value of the culture medium, on the one hand, the invention ensures that the growth of ganoderma mycelium is not affected; on the other hand, the content of silymarin obtained by increasing the pH value of the culture medium is about 20% higher than that without adjusting the pH value; the new technology provided by the invention can obtain two components at one time: Ganoderma Polysaccharide silymarin mixture, which is convenient and energy-saving.

【技术实现步骤摘要】
一种灵芝发酵水飞蓟新技术
本专利技术涉及一种灵芝发酵水飞蓟新技术。
技术介绍
灵芝属担子菌纲、多孔菌科、灵芝属,是赤芝和紫芝的总称,在我国入药已达二千多年,是著名药用真菌。东汉时期的《神农本草经》、明代著名医药学家李时珍的《本草纲目》,都对灵芝的药用功效有着详细的记载。现代医学研究认为灵芝中的提取物具有多种生物活性,包括抗肿瘤、免疫调节、抗氧化、降血糖、抗衰老、保护肝脏、抗溃疡等功效。由于灵芝特殊的药用价值,灵芝有效成分的分析及其药理作用研究受到广泛的关注,其中以灵芝多糖的研究最为深入。灵芝液体深层发酵技术是将灵芝菌种置于液体培养基，在适当的培养条件和参数下，通入无菌空气于发酵罐，能保证灵芝菌丝体质量、数量及灵芝多糖含量的增加、且快速产生大量次级代谢产物的一种培养方式。与传统农业法栽培灵芝子实体相比，液体深层发酵技术不仅能显著提高灵芝多糖的含量，而且还能有效控制发酵条件，以保证液体培养始终在最佳条件进行。上百年来，水飞蓟素被用来治疗肝脏、脾脏和胆囊部位的疾病。它的保肝活性、抗氧化性、抗癌活性、消炎活性和防糖尿病活巧逐渐被大家熟知。作为一种保肝药剂，水飞蓟素适用于口服治疗毒性肝脏损伤和慢性肝炎疾病的治疗。黄酮类化合物因存在酚羟基结构，多为弱酸性，因此可用碱液对其进行提取。常用的碱性溶液有碳酸钠、氢氧化钠、氢氧化钙等。在进行提取时，应当根据不同的实验原料选择适合的碱性溶液进行提取。通过灵芝发酵水飞蓟来获得灵芝多糖和水飞蓟素，综合两者的保肝功能与提高机体免疫力，来进一步应用于动物兽药中。r>
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种灵芝发酵水飞蓟新技术，本专利技术通过提高培养基的pH值，一方面确保灵芝菌丝体生长不受影响；另一方面提高培养基pH值所得的水飞蓟素含量比没调pH值的高20％左右；本专利技术提供的新技术可一次性获得两种成分：灵芝多糖—水飞蓟素混合物，方便且节能。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种灵芝发酵水飞蓟新技术，包括以下步骤：灵芝发酵前的准备、和灵芝发酵水飞蓟获取灵芝多糖-水飞蓟素混合物。其中，灵芝发酵前的准备，包括以下步骤：(1)首先获得灵芝原种；(2)用PDA培养基对灵芝原种进行组织扩培：切取豆粒大小的灵芝组织块于PDA培养基中，置于28℃恒温箱中，直至菌丝体长满PDA培养基，然后转移至4℃冰箱中保存；(3)一级灵芝菌丝体种子制备：将长满PDA培养基的菌丝体，切成小块，放在一级摇瓶培养基中，过程中摇瓶培养基保持无菌，将摇瓶放在摇床中，于27℃、150rpm/min，培养3天，获得一级灵芝菌丝体种子；(4)二级灵芝菌丝体种子制备：将步骤(3)所得一级灵芝菌丝体种子以7％的接种量放在二级摇瓶培养基中，于27℃、150rpm/min，培养3天，获得二级灵芝菌丝体种子；优选的，步骤(2)所述PDA培养基的原料组成为：土豆200g，磷酸二氢钠4g，硫酸镁1g，水1000g，葡萄糖20g，琼脂18g。优选的，步骤(3)所述一级摇瓶培养基的原料组成为：葡萄糖4g，酵母粉1g，磷酸二氢钠0.6g，硫酸镁0.2g，水200g。优选的，步骤(4)所述二级摇瓶培养基的原料组成为：葡萄糖20g，酵母粉5g，磷酸二氢钠3g，硫酸镁1g，水1000g。所述灵芝发酵水飞蓟获取灵芝多糖-水飞蓟素混合物，包括以下步骤：(1)将水飞蓟进行磨碎，使其成为粉末状；(2)一级发酵罐发酵灵芝菌丝体：将二级灵芝菌丝体种子以10％的接种量接种在200L一级发酵罐里，其中罐压0.5Mpa，温度27℃，pH为5.5，搅拌转速150rpm/min，培养2.5天；(3)二级发酵前的准备：制备二级发酵培养基，用氢氧化钠调pH至9.5，接着对发酵罐进行高温高压灭菌，其中灭菌条件为0.1Mpa、121℃，维持30min，最后降温至室温，备用；(4)将步骤(1)所得灵芝菌丝体以8％的转种量转到2000L二级发酵罐中，其中罐压0.5Mpa，温度27℃，pH为10，搅拌转速150rpm/min，培养4天；(5)在二级发酵罐中于搅拌条件下，直接加热提取灵芝多糖-水飞蓟素混合物，具体加热温度为100℃，时间为一小时，结束提取；(6)将提取后的灵芝多糖-水飞蓟素发酵液，进行离心，离心条件为1200转/小时、140℃喷干处理，最终得到粉末状的灵芝多糖—水飞蓟素混合物。优选的，步骤(2)一级发酵罐中一级发酵培养基的组成为：葡萄糖3g，酵母粉0.562g，磷酸二氢钠0.15g，硫酸镁0.135g，水150g。优选的，步骤(3)所述二级发酵培养基组成为：葡萄糖24g，酵母粉4.5g，磷酸二氢钠1.2g，硫酸镁1.08g，水1200g，水飞蓟粉12g。本专利技术的有益效果体现在：(1)灵芝多糖能溶于热水，用热水提取灵芝菌丝体中的灵芝多糖较有机溶剂优点多，如无污染、安全、方便、降低成本等；(2)水飞蓟素能溶于碱性氢氧化钠中，水飞蓟粉末在发酵灭菌前加入，并用氢氧化钠调节pH至9.5，在高温高压下灭菌，水飞蓟素能大量溶于碱性液体中，且灵芝菌丝体生长不受影响；(3)灵芝发酵水飞蓟素结束时，对其在发酵罐中进行原位提取，可以一次性获得灵芝多糖—水飞蓟素混合保肝药物，方便且节能。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本专利技术，但不以任何形式限制本专利技术。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本专利技术的保护范围。实施例1一种灵芝发酵水飞蓟新技术，包括以下步骤：灵芝发酵前的准备、和灵芝发酵水飞蓟获取灵芝多糖-水飞蓟素混合物。其中，灵芝发酵前的准备，包括以下步骤：(1)首先获得灵芝原种；(2)用PDA培养基对灵芝原种进行组织扩培：切取豆粒大小的灵芝组织块于PDA培养基中，置于28℃恒温箱中，直至菌丝体长满PDA培养基，然后转移至4℃冰箱中保存；其中，PDA培养基的原料组成为：土豆200g，磷酸二氢钠4g，硫酸镁1g，水1000g，葡萄糖20g，琼脂18g。(3)一级灵芝菌丝体种子制备：将长满PDA培养基的菌丝体，切成小块，放在一级摇瓶培养基中，过程中摇瓶培养基保持无菌，将摇瓶放在摇床中，于27℃、150rpm/min，培养3天，获得一级灵芝菌丝体种子；其中，所述一级摇瓶培养基的原料组成为：葡萄糖4g，酵母粉1g，磷酸二氢钠0.6g，硫酸镁0.2g，水200g。(4)二级灵芝菌丝体种子制备：将步骤(3)所得一级灵芝菌丝体种子以7％的接种量放在二级摇瓶培养基中，于27℃、150rpm/min，培养3天，获得二级灵芝菌丝体种子；其中所述二级摇瓶培养基的原料组成为：葡萄糖20g，酵母粉5g，磷酸二氢钠3g，硫酸镁1g，水1000g。其中，一级灵芝菌丝体摇瓶转入二级灵芝菌丝体摇瓶相当于是一个扩培过程，使待接种的灵芝本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种灵芝发酵水飞蓟新技术，其特征在于，包括以下步骤：灵芝发酵前的准备、和灵芝发酵水飞蓟获取灵芝多糖-水飞蓟素混合物。/n

【技术特征摘要】
1.一种灵芝发酵水飞蓟新技术，其特征在于，包括以下步骤：灵芝发酵前的准备、和灵芝发酵水飞蓟获取灵芝多糖-水飞蓟素混合物。


2.根据权利要求1所述的一种灵芝发酵水飞蓟新技术，其特征在于，所述灵芝发酵前的准备，包括以下步骤：
（1）首先获得灵芝原种；
（2）用PDA培养基对灵芝原种进行组织扩培：切取豆粒大小的灵芝组织块于PDA培养基中，置于28℃恒温箱中，直至菌丝体长满PDA培养基，然后转移至4℃冰箱中保存；
（3）一级灵芝菌丝体种子制备：将长满PDA培养基的菌丝体，切成小块，放在一级摇瓶培养基中，过程中摇瓶培养基保持无菌，将摇瓶放在摇床中，于27℃、150rpm/min，培养3天，获得一级灵芝菌丝体种子；
（4）二级灵芝菌丝体种子制备：将步骤（3）所得一级灵芝菌丝体种子以7%的接种量放在二级摇瓶培养基中，于27℃、150rpm/min，培养3天，获得二级灵芝菌丝体种子。


3.根据权利要求2所述的一种灵芝发酵水飞蓟新技术，其特征在于，步骤（2）所述PDA培养基的原料组成为：土豆200g，磷酸二氢钠4g，硫酸镁1g，水1000g，葡萄糖20g，琼脂18g。


4.根据权利要求2所述的一种灵芝发酵水飞蓟新技术，其特征在于，步骤（3）所述一级摇瓶培养基的原料组成为：葡萄糖4g，酵母粉1g，磷酸二氢钠0.6g，硫酸镁0.2g，水200g。


5.根据权利要求2所述的一种灵芝发酵水飞蓟新技术，其特征在于，步骤（4）所述二级摇瓶培养基的原料组成为：葡萄糖20g，酵母粉5g，磷酸二氢钠3g，硫酸镁1g，水1000g。

【专利技术属性】
技术研发人员：杜新永，李先胜，马如霞，
申请(专利权)人：青岛润达生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37