灵芝液体发酵液制备含灵芝活性成分的饲料和饲料添加剂的方法，属于生物发酵与饲料领域。本发明专利技术步骤为：ａ．灵芝液体发酵液在５０００转每分钟离心分离获得灵芝发酵上清液和灵芝菌渣；ｂ．按照每公斤饲料添加０．５～１．５毫升的比例，采用后喷涂工艺将灵芝发酵上清液与饲料混合，制备含灵芝活性成分的饲料；ｃ．将灵芝菌渣进行二次发酵制备成含灵芝活性成分的饲料添加剂。本发明专利技术将灵芝发酵液全部充分利用，无废水废渣排放，步骤简单、成本低廉，易于大规模产业化。产品中含有丰富的灵芝多糖和灵芝酸，具有调剂免疫系统，抗菌、抗病毒、抗寄生虫、抗肿瘤、抗辐射等广泛的生理活性，可以大大提高免疫抗病能力，维持动物肠道的健康，提高动物的生产性能和市场效率。
【技术实现步骤摘要】
木专利技术涉及一种利用灵芝液体发酵液制备含灵芝活性成分饲料和饲料添加剂的方法，属于生物发酵与饲料领域。
技术介绍
灵芝(Ga"ode/"wa /M"Wwm (Leyss ex Fr.) Karst.)是中国传统的珍稀药用真菌，属担子菌纲。儿千年来，灵芝由于其优良的疗效而被誉为"仙草"。现代科技研究结果表明灵芝的主要活性成分为灵芝多糖和灵芝酸。灵芝多糖是一大类以(3-(1， 3)和|3- (1， 4)键连接而成的多糖或杂多糖类大分子物质，是一种重要的免疫增强剂，可显著激活自身免疫系统，同时它还具有抗菌、抗病毒、抗寄生虫、抗肿瘤、抗辐射以及改善动物生产性能等一系列生物活性。灵芝酸为一类三萜类化合物，研究表明灵芝酸口T以抑制7种致病菌(如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓假单胞菌、肺炎克雷伯菌、痢疾志贺氏菌、宋内氏志贺氏菌、伤寒沙门氏菌)的生长，维持动物肠道的健康；它与灵芝多糖同时使用，对灵芝多糖具有增效作用。灵芝的生产目前主要采用液体发酵和固体栽培两种方式。采用液体发酵方式，在发酵过程中， 一部分多糖和灵芝酸直接分泌于发酵液中，形成胞外多糖和胞外灵芝酸；而灵芝菌丝体内则存在着胞内多糖和胞内灵芝酸，需要先进行破壁处理后才能进行进一步的提取。研究表明灵芝液体发酵获得的胞内、胞外的灵芝活性物质均有相类似的活性。采用固体栽培方式，其多糖和灵芝酸成分均存在于胞内，同样需要先进行破壁处理后才能进行进一步的提取。饲料添加剂在畜禽养殖过程中提高动物免疫力、加速生长、提高饲料转化率、降低饲养成本等方面起着不可或缺的作用。随着人们食品安全意识的提高和健康意识的增强，以及畜禽产品的国际市场化步伐的进一步加快，发展无公害畜牧业，生产绿色畜禽产品，增强我国畜禽产品的市场竞争力已经成为我国畜牧产业的首要任务。而研究开发高效无公害的绿色饲料添加剂则成为本研究领域的当务之急。绿色饲料添加剂从广义上讲是指无污染、无残留、抗疾病、促生长的天然添加剂，国外在30多年前已着手相关的研究与开发，而国内只在近些年才启动。目前，科学工作者已经研究开发了中草药制剂、酶制剂、微生物制剂、酸化剂、防霉剂、益生元或化学益生素等绿色饲料添加剂。但这些添加剂都存在着下述一种或几种不足之处，如热稳定性差，容易失活，添加比例偏大，成本高，资源有限等。由于灵芝所含活性物质具有高效、无毒、提高免疫力、抗菌抗病毒、无残留等特点，符合绿色饲料及绿色养殖的要求，是一种全新的天然绿色饲料添加剂。目前，己有少量关于灵芝制备饲料添加剂的报道，有学者将固体栽培的灵芝子实体或/和菌丝体直接烘干粉碎制备饲料添加剂，也有学者将固体栽培的灵芝子实体或/和菌丝体通过进一步提取灵芝多糖，将灵芝多糖制备伺料添加剂。但是采用固体栽培的方式存在着生物周期长，由于培养基的不均一性而导致其生物活性成分的含量波动从而影响饲料添加剂质量等缺点；而a如将灵芝子实体或/和菌丝体直接烘干粉碎制备饲料添加剂，其有效成分灵芝多糖和灵芝酸依旧在胞内，很难被动物充分吸收消化，达不到预期效果；而从灵芝子实体或/和菌丝体中获取灵芝多糖进一步制备饲料添加剂，需要提取、浓縮、醇沉、固液分离等更为复杂的提取步骤，生产成本大大提高。而专利ZL200410042719.8提供了一种糖肽复合物免疫强化饲料添加剂的制备方法，其主要成分为灵芝或/和云芝的发酵液，经过进一步后加工后分别得到四种剂型的饲料添加剂即结晶精制品、吸附粉剂、液剂、菌丝体粉剂，其中前三种是通过液体发酵液制备获得，第四种是通过液体菌种固体栽培的方式获得菌丝体后进一步加工制备获得。该专利在一定程度上克服了固体栽培方式获得的灵芝子实体或菌丝体制备饲料添加剂的不足。但是，该方法在灵芝发酵液的处理上需要较多的步骤(如制备结晶精制品、吸附粉剂过程)，或者不能完全充分利用灵芝发酵液中所有的有效成分(如制备结晶精制品和液剂过程)。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对上述绿色饲料添加剂的一些不足，提供了一种成本低、步骤少、灵芝发酵液有效成份完全充分利用的含灵芝活性成分的饲料和饲料添加剂的方法。实现本专利技术的目的是通过以下步骤来实现的步骤一灵芝发酵液的固液分离采用液体发酵方式，将发酵结束的灵芝发酵液在5000转每分钟的条件下离心分离，得到灵芝发酵上清液和灵芝菌渣。步骤二含灵芝活性成分饲料的制备采用后喷涂工艺将步骤一所获得的灵芝发酵上清液与词料混合，制备含灵芝活性成分的饲料，添加比例为每公斤饲料添加0.5 1.5毫升灵芝发酵上清液。所述饲料主要为禽类动物饲料，所述的后喷涂工艺可以采用压力喷涂工艺，其操作条件为喷雾压力0.2 0.5MPa，物料温度20 40'C，进料速度10mL/s;也可以采用真空喷涂工艺，其操作条件为真空度0.02 0.04MPa，泻压时间80 120s，液体温度30 50°C。步骤三灵芝菌渣二次发酵制备含灵芝活性成分的饲料添加剂将步骤一所获得的灵芝菌渣为基础组成二次发酵的培养基，接入乳酸菌种，接种量为5% 8% (体积质量比)，在30 4(TC条件下发酵24 48小时，发酵结束后可以按本领域常规方法进行干燥。本专利技术所述的二次发酵培养基的组成为灵芝菌渣、玉米粉、麸皮，其中玉米粉和麸皮添加比例为1 : 1，将灵芝菌渣和一定量的玉米粉、麸皮混合后，使得二次发酵培养基中所含水份控制在60% 65% (质量百分比)；将培养基加热至10(TC，并保持40min;冷却至6(TC，按培养基中每克玉米粉添加100个国际单位的量在培养基中加入糖化酶并混合均匀；继续冷却至4(TC以下即可接入乳酸菌屮发酵。本专利技术所述的乳酸菌种为常用的嗜酸乳杆菌，例如可以是购自中国普通微生物齒种保藏管理中心(CGMCC)的CGMCCNo. 1.1854。乳酸种子的制备采用本领域常用的技术方法。本专利技术所述的灵芝发酵液的制备可以采用本领域常用的制备方法。如灵芝菌可以是购自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)的CGMCC No.5.535;灵芝发酵液的制备可以采用如下过程a、斜面培养将灵芝菌种接种于斜面培养基上，在25t:下培养至菌丝体长满斜面。所述的斜面培养基的具体制备方法为将马铃薯去皮后切成小片状或小块状，称取200克加入500毫升水中煮沸40分钟后用4层纱布过滤，在滤汁中加入20克葡萄糖，然后加水定容至1000毫升，再加入20克琼脂并加热，待琼脂完全溶解后分装，灭菌，备用。b、种子培养将斜面长好的菌种接入种子培养基中，摇床转速150转每分钟，25。C培养7天。所述种子培养基为(单位为克每升)玉米粉20，蔗糖20，麸皮15，磷酸二氢钾0.75，七水硫酸镁0.5，起始pH为自然pH。 c、液体发酵培养将获得的液体种子按10% (体积百分比)的接种量转接入装有发酵培养基的发酵罐中，28'C培养，发酵罐压力0.05Mpa，搅拌速率120转每分钟，通风量1 : 0.5v/v/m，培养3天。所述发酵培养基为(单位为克每升)玉米粉22，蔗糖18，麸皮IO，磷酸二氢钾1.5，硫酸镁l.O，起始pH为自然pH。本专利技术所提供的含灵芝活性成分饲料主要可以作为禽类动物饲料使用，使用该饲料能够达到促进动物的生长速度，增加免疫力和抗病能力，降低料肉比的效果。本专利技术所提供的含灵芝活性成分饲料添加剂主要可以作为禽类动物饲料的添加剂使用，本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种利用灵芝液体发酵液制备含灵芝活性成分的饲料和饲料添加剂的方法，其特征在于通过以下步骤实现： ａ、灵芝液体发酵获得的发酵液在５０００转每分钟的条件下离心分离获得灵芝发酵上清液和灵芝菌渣； ｂ、按照每公斤饲料添加０．５～１．５毫 升的比例，采用后喷涂工艺将灵芝发酵上清液与饲料混合，制得含灵芝活性成分的饲料； ｃ、将灵芝菌渣进行二次发酵制备成含灵芝活性成分的饲料添加剂，二次发酵的培养基组成为灵芝菌渣、玉米粉和麸皮，玉米粉和麸皮添加比例为１∶１；灵芝菌渣和玉米粉、 麸皮混合后，将二次发酵培养基中所含水份控制在６０％～６５％；发酵条件为：将培养基加热至１００℃，并保持４０ｍｉｎ；冷却至６０℃，按培养基中每克玉米粉添加１００个国际单位的量在培养基中加入糖化酶并混合均匀；继续冷却至４０℃以下即可接入乳酸菌种发酵，接入体积质量比５％～８％的乳酸菌种，在３０～４０℃条件下发酵２４～４８小时，发酵结束后干燥，制得含灵芝活性成分的饲料添加剂。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：丁重阳，章克昌，王玉红，张梁，石贵阳，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]
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