一种聚联乙炔脂质体在水环境中Pb制造技术

本发明专利技术公开了一种聚联乙炔脂质体在水环境中Pb

Pb in aqueous environment of polyacetylene liposome

The invention discloses a polydiacetylene liposome Pb in water environment

【技术实现步骤摘要】
一种聚联乙炔脂质体在水环境中Pb2+的可视化检测方法
本专利技术涉及聚联乙炔脂质体检测
，具体为一种聚联乙炔脂质体在水环境中Pb2+的可视化检测方法。
技术介绍
聚联乙炔(PDA)是一种具有特殊光学性能的共轭聚合物，被广泛的应用于传感器领域，PDA的单体在水溶液中很容易被分散且能进行自组装成脂质体结构，在254nm紫外光照射下，脂质体的内部会加速聚合形成聚合物，从而得到由无色透明变为蓝色的PDA聚合物，在体系内添加外部刺激后，PDA可以经历由蓝色到红色的比色过渡以及从非荧光到荧光的变化，因此，不但可以使用紫外可见吸收光谱和荧光光谱便捷的检测其光学变化，也可实现肉眼识别。这些特性使PDA成为设计和构建各种传感器的理想材料，近年来，已经报道了许多基于聚联乙炔的光学响应的生物传感器和化学传感器，这些传感器可实现被分析物的识别和分析，包括温度、金属离子、阴离子、表面活性剂、胺、水、气体、糖、碳氢化合物、病毒、肝素、酶、细菌和癌症，随着科技日新月异的发展和社会的不断进步，需要被识别和被检测的对象逐渐变得种类繁多且性质各异，因而，为扩大聚联乙炔的识别对象并提高其检测和分析性能，需要进一步开发新型的基于聚联乙炔的优异传感器，构建出灵敏度高，识别率更好的聚联乙炔识别体系。而传统的检测Pb2+的主要方法包括原子吸收光谱法、电感耦合等离子体原子发射光谱法和电感耦合等离子体质谱法等，此类方法可以灵敏的检测出Pb2+，但是需要大型仪器设备，复杂的样品预处理，冗长的分析周期等都限制了Pb2+快速实时的分析检测，虽然用于检测Pb2+的小分子荧光探针设计原理简单，检测灵敏度高，但是其合成过程通常需多步反应，常伴随官能团化困难，难以器件化，同时，多数小分子荧光探针的水溶性较差，荧光母核的发光性质极易受到水环境的影响，这些都严重制约了小分子荧光探针在水环境中的应用，所以我们提出了一种聚联乙炔脂质体在水环境中Pb2+的可视化检测方法，以便于解决上述中提出的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种聚联乙炔脂质体在水环境中Pb2+的可视化检测方法，以解决上述
技术介绍
中提出现有的聚联乙炔脂质体存在灵敏度低，识别率不高的现象，而且对聚联乙炔脂质体在水环境中Pb2+的可视化检测容易受到水环境影响，导致严重制约了小分子荧光探针在水环境中的应用的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种聚联乙炔脂质体在水环境中Pb2+的可视化检测方法，包括步骤1：准备多个干燥的圆底烧瓶将多个烧瓶固定在相应位置，并且对烧瓶进行顺序标号，如1、2、3、4、5、6、7、8；步骤2：准确称取NHS、EDC·HCl等原料将称取好的原料存储于1号圆底烧瓶中；步骤3：准备无水DCM溶剂将准备好的无水DCM溶剂加入1号圆底烧瓶中，用无水DCM将NHS和EDC·HCl溶解；步骤4：添加10，12-二十五烷二炔酸将10，12-二十五烷二炔酸添加至1号圆底烧瓶中，使其与溶解后的物质进行混合，并且在室温下进行搅拌；步骤5：真空浓缩将搅拌混合物用旋转蒸发仪进行真空浓缩，并且将浓缩后的混合物移至分液漏斗进行萃取；步骤6：洗涤、干燥处理将萃取后得到的有机层合并、用饱和食盐水进行洗涤，洗涤过后进行干燥、浓缩处理，得到PCDA-NS白色固体；步骤7：准备无水DCM溶剂和适量PCDA-NS准确称取229mgPCDA-NS溶于10mL无水DCM溶剂中，且放入2号烧瓶中备用；步骤8：混合处理将溶解的材料用注射器注入加到710mgEDEA的8mL无水DCM中，且反应的烧瓶为3号，然后在滴加结束后，室温下搅拌3小时；步骤9：真空浓缩、洗涤、干燥及纯化处理使用旋转蒸发仪进行真空浓缩，并且将浓缩后的混合物移至分液漏斗中进行萃取，合并有机相，然后加入NaCl溶液洗涤3次，洗涤过后加入无水MgSO4进行干燥，浓缩后将粗产物用柱色谱分离纯化，得到白色固体PCDA-EDEA；步骤10：PCDA-TAA的合成将称取的30mgNHS和54mgEDC·HCl加入到4号烧瓶中，然后加入DMF溶剂混合搅拌，经过真空浓缩、萃取、干燥，得到白色固体PCDA-TAA，并且置于样品瓶中。步骤11：聚联乙炔脂质体的制备将不同比例的PCDA-TAA和PCDA混合液溶于1mL的氯仿溶剂中，且在样品瓶中进行反应，经过加热、超声、冷却等反应后得到深蓝色的聚联乙炔脂质体溶液。步骤12：聚联乙炔脂质体的观察使用透射电子显微镜对制备的聚联乙炔脂质体的形态进行观察，并且对其颜色变化进行拍照。优选的，所述步骤2中的NHS和EDC·HCl质量分别为76mg和137.5mg。优选的，所述步骤3中的无水DCM体积为20mL。优选的，所述步骤4中10，12-二十五烷二炔酸的质量为215mg，且在室温下搅拌时间为2小时。优选的，所述步骤5中的萃取方式为：在分液漏斗中加入20mLEA萃取3-4次，合并有机相。优选的，所述步骤6中的洗涤、干燥方式为：有机层用饱和食盐水洗涤3次，然后用无水MgSO4进行干燥，除去溶剂，最终得229mgPCDA-NHS白色固体。优选的，所述步骤9中的真空浓缩、洗涤、干燥及纯化处理方式为：将混合物用旋转蒸发仪进行真空浓缩，并在分液漏斗中用20mLDCM萃取3次，合并有机相，再用饱和NaCl溶液洗涤3次，接着用无水MgSO4进行干燥，然后将粗产物用柱色谱分离纯化，洗脱剂为DCM：MeOH(15:1，v/v)，最终得192mg白色固体，产率为78.4％。优选的，所述步骤10中PCDA-TAA的合成方式为：称取30mgNHS和54mgEDC·HCl加入到4号烧瓶中，然后加入20mLDMF溶剂，再称取41mg胸腺嘧啶-1-乙酸加入到上述溶液中，接着在室温下搅拌3小时，然后旋出溶剂，将残留物用20mLEA萃取3-4次，合并有机相，再用饱和NaCl溶液洗涤，其中有机层用Na2SO4干燥，过滤，除去溶剂得到残留物，之后向上述残留物中加入25mLDMF溶剂，搅拌，再准确称取113.4mgPCDA-EDEA加入到上述溶液中，室温下搅拌过夜，待反应结束后，除去溶剂，用30mLDCM萃取3次，合并有机相，并且用饱和NaCl溶液洗涤3次，无水Na2SO4干燥，浓缩得到粗品，粗品经柱层析提纯，洗脱剂(DCM：MeOH，10：1，v/v)纯化，得到113mg白色固体PCDA-TAA，产率为73％。优选的，所述步骤11中聚联乙炔脂质体的制备方式为：称取不同摩尔比例(0:10、1:9、2:8、3:7、4:6)PCDA-TAA和PCDA混合液溶于1mL的氯仿溶液中，分别做好标记，然后，用氮气流除去有机溶剂，再加入适量的超纯净水，得到的溶液在80℃水浴温度下超声20分钟，得到清晰或半透明的溶液，浓度为1mM的脂质体，所形成的单体分散液放置在4℃的冰箱中静置6小时，然后取出放置至室温，之后在254nm紫外灯照射下进行光诱导聚合本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种聚联乙炔脂质体在水环境中Pb

【技术特征摘要】
1.一种聚联乙炔脂质体在水环境中Pb2+的可视化检测方法，包括：
步骤1：准备好化学试剂原料、多个干燥的圆底烧瓶及其他玻璃仪器
将圆底烧瓶固定在相应位置，并且对烧瓶进行顺序标号，如1、2、3、4、5、6、7、8；
步骤2：准确称取NHS、EDC·HCl等原料
将称取好的原料存储于1号圆底烧瓶中；
步骤3：准备无水DCM溶剂
将准备好的无水DCM溶剂加入1号圆底烧瓶中，用无水DCM将NHS和EDC·HCl溶解；
步骤4：添加10，12-二十五烷二炔酸
将10，12-二十五烷二炔酸添加至1号圆底烧瓶中，使其与溶解后的物质进行混合，并且在室温下进行搅拌；
步骤5：真空浓缩
将搅拌混合物用旋转蒸发仪进行真空浓缩，并且将浓缩后的混合物移至分液漏斗进行萃取；
步骤6：洗涤、干燥处理
将萃取后得到的有机层合并、用饱和食盐水进行洗涤，洗涤过后进行干燥、浓缩处理，得到PCDA-NS白色固体；
步骤7：准备无水DCM溶剂和适量PCDA-NS
准确称取229mgPCDA-NS溶于10mL无水DCM溶剂中，且放入2号烧瓶中备用；
步骤8：混合处理
将溶解的材料用注射器注入加到710mgEDEA的8mL无水DCM中，且反应的烧瓶为3号，然后在滴加结束后，室温下搅拌3小时；
步骤9：真空浓缩、洗涤、干燥及纯化处理
使用旋转蒸发仪进行真空浓缩，并且将浓缩后的混合物移至分液漏斗中进行萃取，合并有机相，然后加入NaCl溶液洗涤3次，洗涤过后加入无水MgSO4进行干燥，浓缩后将粗产物用柱色谱分离纯化，得到白色固体PCDA-EDEA；
步骤10：PCDA-TAA的合成
将称取的30mgNHS和54mgEDC·HCl加入到4号烧瓶中，然后加入DMF溶剂混合搅拌，经过真空浓缩、萃取、干燥，得到白色固体PCDA-TAA，并且置于样品瓶中。
步骤11：聚联乙炔脂质体的制备
将不同比例的PCDA-TAA和PCDA混合液溶于1mL的氯仿溶剂中，且在样品瓶中进行反应，经过加热、超声、冷却等反应后得到深蓝色的聚联乙炔脂质体溶液。
步骤12：聚联乙炔脂质体的观察
使用透射电子显微镜对制备的聚联乙炔脂质体的形态进行观察，并且对其颜色变化进行拍照。


2.根据权利要求1所述的一种聚联乙炔脂质体在水环境中Pb2+的可视化检测方法，其特征在于：所述步骤2中的NHS和EDC·HCl重量分别为76mg和137.5mg。


3.根据权利要求1所述的一种聚联乙炔脂质体在水环境中Pb2+的可视化检测方法，其特征在于：所述步骤3中的无水DCM体积为20mL。


4.根据权利要求1所述的一种聚联乙炔脂质体在水环境中Pb2+的可视化检测方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈淑伟，陈曦鹏，李杨，杨宁，姬广昊，陈文帅，胡飞虎，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61