一种脂质体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种脂质体及其应用。所涉及的脂质体包括脂质体制备材料、抗癌药物和核酸分子，所述核酸分子具有逆转癌细胞对所述包覆抗癌药物耐药性的功效。本发明专利技术利用脂质体作为药物载体，把核酸分子和抗癌药物包入其内，形成对癌细胞具有杀伤力并具有逆转癌细胞对抗癌药物耐药性的脂质体药物体系。该体系由于脂质体易于进入细胞、抗癌药物具有强大的细胞杀伤力、核酸分子具有抗癌药物耐药性逆转作用，在未来可以用于：(1)癌症患者的抗癌药物化疗；(2)对阿霉素已经形成耐药性的癌症患者的化疗；(3)大大提高抗癌药物疗效而降低由于药物耐药性而导致的低化疗效果和复发，改善目前癌症病人化疗的瓶颈问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药
，特别涉及一种含有抗癌药与miRNA101合成产物或其表达质粒DNA的脂质体及该脂质体用于制备抗癌药物的应用。
技术介绍
癌症(Cancer)目前是一种最常见的、严重威胁人们健康和生命的重大疾病，目前对于癌症的药物治疗仍然面临许多瓶颈问题，如高复发率、迅速形成的抗药性、高毒副作用，等等。现有抗癌药物大多基于对细胞内核酸复制、转录的抑制，或者对蛋白的抑制而对癌细胞产生明显杀伤效果，但易于形成抗药性而且毒性大。例如，阿霉素(Doxorubicin)是历史悠久的抗癌一线药物，具有强大的癌细胞杀伤作用。该药的抗癌机理是药物分子进入细胞核内并嵌入DNA双螺旋分子而使细胞基因组转录受到影响而杀死细胞，后来人们开发出了阿霉素脂质体，由于它更易于与细胞膜融合而进入细胞，从而进一步强化了其对癌细胞的杀伤力。但是，癌细胞往往会很快建立对抗癌药的多药耐药性(Multiple drug resistance，MDR)而导致药物治疗效率降低、毒性显著加强。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，提供一种以脂质体为运载物的抗癌药物和可以使抗癌药物MDR逆转的癌症化疗新型药物设计思路，这对于强化癌症化疗治疗效果、抑制癌复发等具有巨大应用价值。本专利技术的脂质体包括脂质体制备材料、包覆抗癌药物和包覆核糖核酸，所述包覆核糖核酸具有逆转癌细胞对所述包覆抗癌药物耐药性的功效。本专利技术的包覆核糖核酸为小核糖核酸101a(miR-101a)、小核糖核酸101b(miR-101b)、小核糖核酸1(miR-1)、小核糖核酸15b(miR-15b)、小核糖核酸130b(miR-130b)、小核糖核酸34a(miR-34a)、小核糖核酸16(miR-16)、小核糖核酸122(miR-122)、小核糖核酸129-2(miR-129-2)、小核糖核酸132(miR-132)、小核糖核酸195(miR-195)、小核糖核酸199a(miR-199a)、小核糖核酸223(miR-223)和小核糖核酸375(miR-375)中的一种。本专利技术的脂质体制备材料为天然材料或者化学材料，其中天然材料为卵磷脂(磷脂酰胆碱)、糖脂、鞘脂、胆固醇和紫杉醇中的一种或两种以上；化学材料为合成磷脂、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(DSPE)、二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)、十七烷酸磷脂、山梨醇、乙腈、甲醇、维生素E和聚乙二醇(PEG)中的一种或两种以上。本专利技术的包覆抗癌药物为阿霉素(doxorubicin)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、顺铂(cisplatin)、奥沙利铂(oxaliplatin)、卡铂(carboplatin)、环磷酰胺(cyclophosvnamide)、长春碱(vincaleukoblastinum)、长春新碱(vincristine，leurocristine)、阿糖胞苷(cytosine arabinoside)、氮芥(nitrogen mustard)、塞替派(thiotepa)、甲氨蝶呤(methotrexate)、替加氟(tegafur)、丝裂霉素(mitomycin)和柔红霉素(daunomycin，rubidomycin)中的一种。本专利技术所的包覆核糖核酸为小核糖核酸合成产物或者小核糖核酸质粒表达载体。本专利技术利用脂质体作为药物载体，把小核糖核酸和抗癌药物包入其内，形成对癌细胞具有杀伤力并具有逆转癌细胞对抗癌药物耐药性的脂质体药物体系。该体系由于脂质体易于进入细胞、抗癌药物具有强大的细胞杀伤力、小核糖核酸具有抗癌药物耐药性逆转作用，在未来可以用于：(1)癌症患者的抗癌药物化疗；(2)对阿霉素已经形成耐药性的癌症患者的化疗；(3)大大提高抗癌药物疗效而降低由于药物耐药性而导致的低化疗效果和复发，改善目前癌症病人化疗的瓶颈问题。附图说明图1：本专利技术技术方案示意图；图2：本专利技术思路示意图；图3：脂质体粒度测定结果，其中，以纳米粒度测试仪测定脂质体成品粒径为100nm-150nm，符合预期要求；图4：Lipo-miR101-DOX的体外肝癌细胞杀伤作用(5μg/ml)，其中，A,B：HepG2+Lipo-DOX；C、D：HepG2+Lipo-miR101-DOX；E,F：HepG2/ADR+Lipo-DOX；G,H：HepG2/ADR+Lipo-miR101-DOX。结果显示Lipo-miR101-DOX对普通和抗药性肝癌细胞都具有明显的体外杀伤力增强或抗药性逆转作用；图5：Lipo-miR101-DOX对HepG2细胞F-actin影响的初步观察，其中，A：Lipo-DOX；B：Lipo-miR101-DOX；图6：Lipo-miR101-DOX在体内对肝癌的治疗效果，其中，A：给药第二天，B：给药第十天。以下结合附图和具体实施实例对本专利技术作进一步说明。具体实施方式文献报道miR-101a在肝癌组织等明显低表达，提高其表达水平可明显促使肝癌细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性，也有文献报道在顺铂抗药性胃癌、肝内胆管癌、膀胱癌细胞强化miR-101a表达可以加强癌细胞对顺铂的敏感性。专利技术人据此设想miR-101a可能会抑制癌细胞形成MDR而逆转耐药性，于是选择阿霉素做了以下实例研究：以人肝癌细胞HepG2和阿霉素耐药性肝癌细胞HepG2/ADR进行了包含阿霉素和miR-101表达质粒的脂质体载药体系(Lipo-miR101-DOX)的抗癌效果研究，结果发现该体系可以大大降低癌细胞对阿霉素MDR的形成，并对阿霉素耐药性肝癌细胞HepG2/ADR具有很好的杀伤作用。适用于本专利技术方案的抗癌药物还有：氟尿嘧啶(fluorouracil)、顺铂(cisplatin)、奥沙利铂(oxaliplatin)、卡铂(carboplatin)、环磷酰胺(cyclophosvnamide)、长春碱(vincaleukoblastinum)、长春新碱(vincristine，leurocristine)、阿糖胞苷(cytosine arabinoside)、氮芥(nitrogen mustard)、塞替派(thiotepa)、甲氨蝶呤(methotrexate)、替加氟(tegafur)、丝裂霉素(mitomycin)或柔红霉素(daunomycin，rubidomycin)。适用于本专利技术方案的小核糖核酸还有：小核糖核酸101b(miR-101b)、小核糖核酸1(miR-1)、小核糖核酸15b(miR-15b)、小核糖核酸130b(miR-130b)、小核糖核酸34a(miR-34a)、小核糖核酸16(miR-16)、小核糖核酸122(miR-122)、小核糖核酸129-2(miR-129-2)、小核糖核酸132(miR-132)、小核糖核酸195(miR-195)、小核糖核酸199a(miR-199a)、小核糖核酸223(miR-223)、小核糖核酸375(miR-375)。根据在学术界已经报导或证明的可能参与形成抗癌药物MDR的有关基因，专利技术人分析了初步实验结果显示的本专利技术的组合设计引起MDR逆转的可能机理，如附图2的细胞内部分示意图。实施例：该实施例的技术路线如图1所示。1.主要实验材料1.1脂质体材料：大豆卵磷脂本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种脂质体，其特征在于，该脂质体包括脂质体制备材料、包覆抗癌药物和包覆核糖核酸，所述包覆核糖核酸具有逆转癌细胞对所述包覆抗癌药物耐药性的功效。

【技术特征摘要】
1.一种脂质体，其特征在于，该脂质体包括脂质体制备材料、包覆抗癌药物和包覆核糖核酸，所述包覆核糖核酸具有逆转癌细胞对所述包覆抗癌药物耐药性的功效。2.如权利要求1所述的脂质体，其特征在于，所述包覆核糖核酸为小核糖核酸101a、小核糖核酸101b、小核糖核酸1、小核糖核酸15b、小核糖核酸130b、小核糖核酸34a、小核糖核酸16、小核糖核酸122、小核糖核酸129-2、、小核糖核酸132、小核糖核酸195、小核糖核酸199a、小核糖核酸223和小核糖核酸375中的一种。3.如权利要求1所述的脂质体，其特征在于，所述脂质体制备材料为天然材料或者化学材料，所述天然材料为卵磷脂、...

【专利技术属性】
技术研发人员：侯颖春，肖丽，马妮，何慧敏，黎金媚，程思楠，杨倩，
申请(专利权)人：陕西师范大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61