The invention provides a new method for the analysis of oleanolic acid and ursolic acid by high performance liquid chromatography. Using cyclodextrin, oleanolic acid and ursolic acid can be identified differently. Adding different types of cyclodextrin in the mobile phase can separate and analyze oleanolic acid and ursolic acid of the same isomer easily, quickly and effectively, which can significantly improve the chromatographic separation High performance liquid chromatography (HPLC) provides a new method for the analysis of fruit acids.
【技术实现步骤摘要】
齐墩果酸和熊果酸的分析方法(一)
本专利技术涉及一种高效液相色谱分析同分异构体齐墩果酸和熊果酸的新方法。(二)
技术介绍
齐墩果酸(oleanolicacid)和熊果酸(ursolicacid)均为五环三萜类化合物,分子式为C30H48O3。齐墩果酸和熊果酸是多种中药材含有的活性成分,具有抗氧化,抗炎,抗肿瘤,抗HIV,抗菌,保胃和潜在的抗肥胖作用。其检测方法常有主要包括薄层色谱法、气相色谱法、毛细管胶束电动色谱法、毛细管电泳高频电导法、高效液相色谱法(HPLC)等方法。齐墩果酸和熊果酸互为同分异构体,仅29、30位的甲基位置不同,结构如下所示:从以上各化学成分的结构来看,齐墩果酸和熊果酸的结构非常类似,因此采用高效液相色谱法时,在同一色谱柱上进行以上两种组分的有效分离是相当困难的,事实上也是如此,通过改变二元或三元流动相比例、pH值、离子强度等方法结果均不是很理想。近年来采用HPLC测定的方法大多流动相以甲醇-水二元体系为主,根据柱效以及干扰成分不同选择流动相配比,甲醇浓度一般在87%~92%,流速在0.5~1mL/min。由于两种有机酸的极性相近,传统HPLC检测方法出峰时间长,峰形和分离度不太理想。如谢莹等人[谢莹,杭太俊,程赞,等.高效液相色谱法测定中药中齐墩果酸和熊果酸含量[J].中国中药杂志,2001,26(9):615.]采用传统的HPLC检测方法,采用甲醇:水:冰乙酸:三乙胺(87:13:0.04:0.02)的体系作为流动相,齐墩果酸和熊果酸色谱峰的保留时间分别为29.4,31.1mi ...
【技术保护点】
1.一种高效液相色谱分析同分异构体齐墩果酸和熊果酸的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:/n(1)将齐墩果酸和熊果酸的混合物样品用乙腈溶解,制成供试品溶液;/n(2)将供试品溶液注入液相色谱仪,记录色谱图,完成同分异构体齐墩果酸和熊果酸的分离与分析;/n色谱条件如下:/n色谱柱选用C
【技术特征摘要】
1.一种高效液相色谱分析同分异构体齐墩果酸和熊果酸的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
(1)将齐墩果酸和熊果酸的混合物样品用乙腈溶解,制成供试品溶液;
(2)将供试品溶液注入液相色谱仪,记录色谱图,完成同分异构体齐墩果酸和熊果酸的分离与分析;
色谱条件如下:
色谱柱选用C18色谱柱,填料粒径为1.7~10μm;
流动相由水相和有机相组成,所述水相和有机相的体积百分数为10%~50%:50%~90%;
所述水相为添加有环糊精的缓冲盐溶液,所述水相的pH值为3~8;所述环糊精为:羟丙基-β-环糊精、甲基-β-环糊精或磺丁基-β-环糊精;环糊精在水相中的浓度为5~75mmol/L;水相中所采用的缓冲盐选自以下化合物中的任意一种、两种或多种组成的缓冲系统:醋酸铵、醋酸钠、甲酸铵、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸钾、甲酸、醋酸、磷酸、水、二乙胺、三乙胺;
所述有机相选自以下任意一种或两种:甲醇、乙腈、四氢呋喃;
设置流动相的流速为0.5~1.5mL/min;
检测波长为205~220nm;
设置柱温为5℃~50℃。
2.如权利要求1所述高效液相色谱分析同分异构体齐墩果酸和熊果酸的新方法,其特征在于,步骤(1)中,所述供试品溶液中,混合物样品的浓度为0.01~2mg/mL。
3.如权利要求1所述高...
【专利技术属性】
技术研发人员:童胜强,王超越,王香,
申请(专利权)人:浙江工业大学,
类型:发明
国别省市:浙江;33
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