染料木素桥连哌嗪类衍生物合成方法及其抗肿瘤方向应用技术

本发明专利技术提供了一种染料木素衍生物，如式(I)所示，其中，R为吡啶基，醛基，羟乙基，叔丁氧羰基，与现有技术相比，本发明专利技术提供的染料木素衍生物对多种肿瘤细胞具有良好的生长抑制作用，尤其R为吡啶取代基时，对于A549细胞、Hela细胞、MCF‑7细胞、SH‑SY5Y细胞与HepG2细胞五类肿瘤细胞具有较高的抑制生长活性。

Synthesis and antitumor application of genistein bridged piperazine derivatives

The invention provides a genistein derivative, as shown in formula (I), wherein R is pyridyl, aldehyde, hydroxyethyl, tert butoxycarbonyl. Compared with the prior art, the genistein derivative provided by the invention has good growth inhibition effect on a variety of tumor cells, especially for A549 cells, HeLa cells, MCF \u2011 7 cells, sh \u2011 SY5Y cells and he cells when R is pyridyl substituent Five kinds of tumor cells of PG2 cells have high inhibitory activity.

【技术实现步骤摘要】
染料木素桥连哌嗪类衍生物合成方法及其抗肿瘤方向应用
本专利技术属于药物化学
，尤其涉及一种染料木素衍生物、其制备方法及应用。
技术介绍
如今，癌症对人类的威胁越来越大，而治疗癌症的手段和药物并不能完全满足人们的需求，所以，人们加速了抗癌药物的研发进程。染料木素，别名金雀异黄素，其化学结构与内源性雌激素雌二醇极为相似，而该化合物及其合成的衍化物具有广泛的生物学活性，包括抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、抗寄生虫、抗炎活性及心血管活性等，引起人们的广泛关注。哌嗪是具有两个氮原子的六元杂环，是一个重要的医药中间体，主要用于生产驱肠虫药磷酸哌嗪、枸橼酸哌嗪，以及强痛定、利福平。本专利技术利用烷基将哌嗪类化合物和染料木素桥连起来，合成一系列新型的化合物，不同的哌嗪类取代基将大大改变其生物活性，并采用MTT研究法对该类化合物进行抗肿瘤活性研究，实验结果显示，该类化合物对于多种癌细胞的生长都具有良好的抑制效果，说明本专利技术中合成的化合物能够作为一类新型的抗癌药物进行研究开发。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供一种具有抗肿瘤活性的染料木素衍生物、其制备方法及应用。本专利技术提供了一种染料木素衍生物，如式(I)所示：其化学通式如上所示，其中，R为吡啶基，醛基，羟乙基，叔丁氧羰基，异丙基，氨乙基，甲酸乙酯基。优选的，如式(I-1)～式(I-4)所示：本专利技术还提供了一种染料木素衍生物的制备方法，包括：r>步骤一：将哌嗪衍生物与甲醇在酸性条件下反应，得到式(II)所示的化合物中间体；步骤二：将所述式(II)所示的化合物与染料木素反应，得到式(I)所示的化合物；本专利技术还提供了上述染料木素衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用。本专利技术提供了一种染料木素衍生物，如式(I)所示，其中，R为吡啶基，醛基，羟乙基，叔丁氧羰基，。与现有技术相比，本专利技术提供的染料木素衍生物对多种肿瘤细胞具有良好的生长抑制作用，尤其R为吡啶取代基时，对于A549细胞、Hela细胞、MCF-7细胞、SH-SY5Y细胞与HepG2细胞五类肿瘤细胞具有较高的抑制生长活性。附图说明在说明书附图中：图1为本专利技术合成化合物结构通式；图2为本专利技术涉及化合物与阳性化合物5-氟尿嘧啶和染料木素在不同浓度下对HeLa细胞的生长抑制率评价图；图3为本专利技术涉及化合物与阳性化合物5-氟尿嘧啶和染料木素在不同浓度下对HepG2细胞的生长抑制率评价图；图4为本专利技术涉及化合物与阳性化合物5-氟尿嘧啶和染料木素在不同浓度下对A549细胞的生长抑制率评价图；图5为本专利技术涉及化合物与阳性化合物5-氟尿嘧啶和染料木素在不同浓度下对SH-SY5Y细胞的生长抑制率评价图；图6为本专利技术涉及化合物与阳性化合物5-氟尿嘧啶和染料木素在不同浓度下对MCF-7细胞的生长抑制率评价图；具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。将染料木素与式(II)所示化合物反应；所述染料木素与式(II)所示的化合物的摩尔比优选为1：(1～3)，更优选为1：(1.1～2)，再优选为1：1.2；所述酸性条件优选加入酸性试剂提高；所述酸性试剂为本领域技术人员熟知的酸性试剂即可，并无特殊的限制，本专利技术中优选为浓盐酸；在本专利技术中该反应优选在有机溶剂中进行；所述有机溶剂为本领域技术人员熟知的质子化试剂即可，并无特殊的限制，本专利技术中优选为甲醇；所述甲醇与染料木素的比例优选为(20～100)ml：1g，更优选为(50～80)ml：1g，再优选为67ml：1g；所述反应的温度优选为25℃～80℃，更优选为25℃～50℃，再优选为35℃；所述反应的时间优选为2～24h，更优选为8～20h，再优选为18h。反应结束后，将产物从反应体系中分离，所述分离的方法为本领域技术人员熟知的方法即可，并无特殊的限制，分离后，得到产物。此步骤的反应式如下：本专利技术还提供了一种上述式(I)所示的染料木素衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用。本专利技术目标化合物的抗肿瘤活性，可以采用MTT研究法，通过目标化合物与各种肿瘤细胞的相互作用，研究其在不同浓度条件下，抑制肿瘤生长的效果作为评价手段之一，用肿瘤细胞的抑制率予以表现。在活细胞的线粒体中含有琥珀酸脱氢酶，它能使外源性MTT还原为不溶于水的蓝紫色结晶甲瓒，并沉积在细胞中，而死亡后细胞无此功能。MTT与细胞作用后，用二甲基亚砜溶解细胞中的甲瓒，利用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映肿瘤细胞生长的抑制情况。在一定细胞数范围内，MTT结晶甲瓒形成的量与活细胞数成正比。为了进一步说明本专利技术，以下结合实施例对本专利技术提供的染料木素衍生物、其制备方法及应用进行详细描述。以下实施例中所用的试剂均为市售。实施例1步骤一：式(I-1)所示化合物的制备将680.1(2.5mmol)染料木素、45ml甲醇，200μL(2.5mmol)37％甲醛，加入100ml圆底烧瓶，30℃下搅拌回流30min，再加入405.51mg(3mmol)1-乙酰哌嗪于圆底烧瓶中，30℃下搅拌回流8h，常温反应5h。然后停止反应，减压抽滤，固液分离。收集固体，固体中包含有少量1-乙酰哌嗪哌嗪，甲醛和少量染料木素和产物；液体中包含有染料木素、溶于甲醇的1-乙酰哌嗪。用甲醇对固体进行洗涤5次，每次7ml甲醇，即可得到660.6mg的白色固体，产率64.43％。对中间产物进行测定：利用核磁共振对得到的白色固体进行检测，得到1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.35(s,1H),7.35(d,J＝7.34Hz,2H),6.80(d,J＝6.78Hz,2H),6.24(s,1H),3.71(s,4H),3.40(q,J＝3.4Hz,5H),2.41(s,2H),1.39(s,3H).利用质谱仪对得到的白色固体进行检测，得到ESI-MSm/z[M+H]+＝411.1456。利用熔点仪对得到的白色固体进行检测，得到熔点268℃～272℃。将上述合成的本专利技术的式(I-3)所示的化合物，实验采用MTT研究方法，评价目标化合物抑制不同肿瘤细胞生长的抑制率以及IC50值。实验采用的细胞培养均在37℃、5％CO2的无菌培养箱的环境下进行，培养基采用含10％FBS的DMEM培养基。目标化合物浓度设置：将本专利技术目标化合物配制成浓度梯度为5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L、40μmol/L、50μmol/L、60μmol/L、80μmol/L的试验用样品。培养基作为空白对照，即化合本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种哌嗪类修饰染的料木素衍生物，其特征在于，是通式(Ⅰ)所示的化合物：/n

【技术特征摘要】
1.一种哌嗪类修饰染的料木素衍生物，其特征在于，是通式(Ⅰ)所示的化合物：



其中，R为吡啶基，醛基，羟乙基，叔丁氧羰基，异丙基，氨乙基，甲酸乙酯基。


2.根据权利要求1所述的染料木素衍生物，其特征在于，如式(I-1)～式(I-4)所示。








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【专利技术属性】
技术研发人员：延玺，于渼璇，宋静磊，
申请(专利权)人：北京师范大学，
类型：发明
国别省市：北京;11