高效制作山羊子宫组织石蜡包埋的方法技术

本发明专利技术公开了一种高效制作山羊子宫组织石蜡包埋的方法。本发明专利技术在传统制作石蜡包埋的基础上进行改良，设计了一种操作简单、高效、无气泡的高效石蜡包埋的制作方法，建立了一套完善可靠的石蜡包埋的制作方法。此方法简单易行，成本低，不需要特殊设备即可成功，且能制作出效果好，无气泡的蜡块。

High efficient paraffin embedding method for goat uterus

【技术实现步骤摘要】
高效制作山羊子宫组织石蜡包埋的方法
本专利技术涉及生物科学
，特别涉及到高效制作山羊子宫组织石蜡包埋的方法。
技术介绍
石蜡包埋是组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。它能够用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。由于石蜡包埋技术操作简单、可靠性强、不需要特殊的设备，因此为临床诊断和组织学、免疫学及相关科研的发展做出了巨大贡献。其基本步骤包括样品的取材、固定、修块、脱水、透明、浸蜡、包埋一系列特殊处理。一般需要2-3天的时间，但常常有各种复杂状况的出现，每个细小环节出现问题都将会给后面的步骤以及切片结果造成严重的影响；因此需要对常规石蜡包埋技术进行一些改良。
技术实现思路
针对现有专利技术材料的不足，本专利技术提供了一种高效制作山羊子宫组织石蜡包埋的方法，它操作简单、成本低廉、制作切片效果好、且几乎没有气泡。为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：高效制作山羊子宫组织石蜡包埋的方法，包括如下步骤：(1)融蜡：将熔点为56-58℃的高效固体切片石蜡在65-68℃下烘烤6-12h，待固体石蜡完全融化为液体石蜡后，将液体石蜡进行加热搅拌6-8h；(2)固定：在母山羊屠宰后用已经消毒灭菌后的剪刀和镊子采取子宫组织，并立即放入体积分数为4％的多聚甲醛溶液中固定24-48h；(3)修块：修剪掉子宫组织周围多余的其它组织；(4)脱水：将修块之后的子宫组织置于梯度酒精进行脱水，酒精质量浓度与时间依次为75％乙醇浸润1-1.5h、80％乙醇浸润1-1.5h、95％乙醇I浸润55min-1h、95％乙醇II浸润55min-1h、无水乙醇I浸润50-55min、无水乙醇II浸润50-55min；(5)透明：将脱水后的子宫组织放入二甲苯和无水乙醇等体积的混合液中浸润1-1.5h，浸润过后将子宫组织转移至二甲苯中浸润25-30min，再将子宫组织放入新的纯二甲苯溶液中浸润25-30min；(6)透蜡：将二甲苯与液体石蜡等体积混合，并将之前已经透明后的子宫组织放入其中浸润1.5-2h，再将子宫组织放入液体石蜡I中浸润45-55min，液体石蜡II浸润45-55min；(7)包埋：先将子宫组织放入石蜡包埋模具的中间，然后将液体石蜡倒入包埋模具，直至其凝固。步骤(5)所述的二甲苯和无水乙醇的组成是按照体积比1:1的比例组成。上述的步骤(6)中所述的二甲苯与液体石蜡混合的比例为1:1，即1体积的二甲苯加入1体积的液体石蜡。所述步骤(2)、(4)-(6)中对子宫进行浸泡的液体要将子宫完全浸没。在进行步骤(7)前，将包埋模具与镊子须提前一小时放入烘箱内预热，直至包埋模具与镊子与烘箱同一温度才可以进行下一步操作，以保证液体石蜡倒入模具时无气泡产生。本专利技术同现有技术相比，本专利技术在传统制作石蜡包埋的基础上进行改良，设计了一种操作简单、高效、无气泡的高效石蜡包埋的制作方法，建立了一套完善可靠的石蜡包埋的制作方法。此方法简单易行，成本低，不需要特殊设备即可成功，且能制作出效果好，无气泡的蜡块。具体实施方式实施例：高效制作山羊子宫组织石蜡包埋的方法，包括如下步骤：(1)液体石蜡的准备：将生物公司订购的熔点为56-58℃的固体切片石蜡放到烧杯中，将烧杯置于65℃-68℃的烘箱内观察6-12h，待固体切片石蜡完全融化为液体石蜡时，将烧杯取出放置在磁力搅拌机中加热6-8h，待烧杯中的固体切片石蜡残留物完全被溶解时取出，在放置烘箱内以保存温度。(2)固定：在母山羊屠宰后用已经消毒灭菌后的剪刀和镊子采取子宫组织并立即放入体积分数为4％的多聚甲醛溶液中固定24-48h。4％多聚甲醛或10％福尔马林均可以当作固定液使用。其目的是为了使组织在石蜡包埋制作过程中保持细胞的形态结构,使之与存活的原有形态和结构相似而不发生变形。(3)修块：修剪掉子宫组织周围多余的其他组织，以便于下一步操作。(4)脱水：将修块之后的母山羊子宫组织置于梯度酒精进行脱水，酒精浓度与时间依次为75％乙醇浸润1-1.5h、80％乙醇浸润1-1.5h、95％乙醇I浸润55min-1h、95％乙醇II浸润55min-1h、无水乙醇I浸润50-55min、无水乙醇II浸润50-55min。高浓度无水乙醇时间不宜过长，避免破坏组织结构。(5)透明：将脱水后的子宫组织放入由二甲苯和无水乙醇按体积比1:1的比例组成的混合液中浸润1-1.5h，浸润过后将子宫组织转移至二甲苯中浸润25-30min，将原有的二甲苯溶液回收，在将子宫组织放入新的二甲苯中浸润25-30min。二甲苯浸润时间不宜过长，否则会使组织块变脆，切片时不易切出。(6)透蜡：配置体积比为1:1比例的二甲苯与液体石蜡混合液，并将之前已经透明后的子宫组织放入其中浸润1.5-2h，在将1:1的二甲苯与液体石蜡混合物回收，将子宫组织放入液体石蜡I中浸润45-55min，液体石蜡II浸润45-55min。(7)包埋：事先准备石蜡包埋模具与大小适中的镊子，先将子宫组织放入包埋模具的中间，在将液体石蜡倒入包埋模具，直至其凝固。包埋模具与镊子应提前放置烘箱内，直至包埋模具与镊子和烘箱一个温度时，在进行下面的操作，以保证在倒蜡时模具与液体石蜡温度一致，避免气泡的产生。本专利技术不局限于上述最佳实施方式，任何人在本专利技术的启示下可得到其他形式的产品。但是，无论在催化剂组成、结构和配比方面作任何的变化，凡是具有和本申请相同或相似的技术方案，均属于本专利技术的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高效制作山羊子宫组织石蜡包埋的方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)融蜡：将熔点为56‑58℃的高效固体切片石蜡在65‑68℃下烘烤6‑12h，待固体石蜡完全融化为液体石蜡后，将液体石蜡进行加热搅拌6‑8h；(2)固定：在母山羊屠宰后用已经消毒灭菌后的剪刀和镊子采取子宫组织，并立即放入体积分数为4％的多聚甲醛溶液中固定24‑48h；(3)修块：修剪掉子宫组织周围多余的其它组织；(4)脱水：将修块之后的子宫组织置于梯度酒精进行脱水，酒精质量浓度与时间依次为75％乙醇浸润1‑1.5h、80％乙醇浸润1‑1.5h、95％乙醇I浸润55min‑1h、95％乙醇II浸润55min‑1h、无水乙醇I浸润50‑55min、无水乙醇II浸润50‑55min；(5)透明：将脱水后的子宫组织放入二甲苯和无水乙醇等体积的混合液中浸润1‑1.5h，浸润过后将子宫组织转移至二甲苯中浸润25‑30min，再将子宫组织放入新的二甲苯中浸润25‑30min；(6)透蜡：将二甲苯与液体石蜡等体积混合，并将之前已经透明后的子宫组织放入其中浸润1.5‑2h，再将子宫组织放入液体石蜡I中浸润45‑55min，液体石蜡II浸润45‑55min；(7)包埋：先将子宫组织放入石蜡包埋模具的中间，然后将液体石蜡倒入包埋模具，直至其凝固。...

【技术特征摘要】
1.一种高效制作山羊子宫组织石蜡包埋的方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)融蜡：将熔点为56-58℃的高效固体切片石蜡在65-68℃下烘烤6-12h，待固体石蜡完全融化为液体石蜡后，将液体石蜡进行加热搅拌6-8h；(2)固定：在母山羊屠宰后用已经消毒灭菌后的剪刀和镊子采取子宫组织，并立即放入体积分数为4％的多聚甲醛溶液中固定24-48h；(3)修块：修剪掉子宫组织周围多余的其它组织；(4)脱水：将修块之后的子宫组织置于梯度酒精进行脱水，酒精质量浓度与时间依次为75％乙醇浸润1-1.5h、80％乙醇浸润1-1.5h、95％乙醇I浸润55min-1h、95％乙醇II浸润55min-1h、无水乙醇I浸润50-55min、无水乙醇II浸润50-55min；(5)透明：将脱水后的子宫组织放入二甲苯和无水乙醇等体积的混合液中浸润1-1.5h，浸润过后将子宫组织转移至二甲苯中浸润25-30min，再将子宫组织放入新的二甲苯中浸润25-30min；(6)透蜡：将二甲苯与液体石蜡等体积混合，并将...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈祥，周志楠，洪磊，敖叶，吴雨，韦仕南，唐文，
申请(专利权)人：贵州大学，
类型：发明
国别省市：贵州,52