一种脂蛋白电泳染色液及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种脂蛋白电泳染色液及其制备方法和应用，所述脂蛋白电泳染色液包括脂质染料、有机溶剂、助溶剂和水。本发明专利技术提供的脂蛋白电泳染色液在配置过程中，脂质染料可以完全溶解，一方面避免了脂质染料的损耗，另一方面完全溶解的脂质染料可以计算其浓度，进而可以在使用时精准定量。且本发明专利技术提供的脂蛋白电泳染色液的有效期长，染色效果好，对脂蛋白的染色更明显，分辨率更高，脂蛋白亚型的定性和定量分析更准确。

A Lipoprotein Electrophoretic Staining Solution and Its Preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种脂蛋白电泳染色液及其制备方法和应用
本专利技术属于生物医药检测领域，尤其涉及一种脂蛋白电泳染色液及其制备方法和应用。
技术介绍
在进行脂蛋白电泳分析时，多选用脂质染料对其进行染色分析，由于脂质染料的水溶性极差，通常使用的脂蛋白电泳染色液配制过程繁琐、耗时长，往往需要几个小时甚至几十个小时的配制时间，而且在染色液的配制时染料难以完全溶解，往往需要离心和/或过滤除去多余的染料沉渣，导致染料的终浓度无法确定，使用时难以精准定量染料用量；并且传统的脂蛋白电泳染色液溶质分散不均一、稳定性差、易沉淀、保质期短，难以长久维持染色效果，往往只能保存数天至数十天，而且保存温度具有局限性，利用低温保存会进一步降低脂质染料的溶解度，因此难以低温保存，多在室温条件下进行保存；另外，传统的脂蛋白电泳染色液在进行脂蛋白染色时花费时间较长，往往需要数十分钟到数小时，同时，由于脂质染料难与水混溶，导致在预染时(如血浆的预染)脂质染料从溶液中析出，不仅会降低脂蛋白的染色效果，而且在上样之前往往还需要经过离心除去沉渣，加大了工作量。总之，传统的脂蛋白电泳染色液及其配制方法不仅造成了大量人力和物力的浪费，也容易导致脂蛋白染色分析出现严重的误差。CN102181173A公开了一种苏丹黑B染色液及其制备方法和用途，所述苏丹黑B染色液中含有乙二醇或丙三醇和异丙醇，以乙二醇或丙三醇和异丙醇的总体积计，其中含有的异丙醇的体积百分比大于等于60％，该专利提供的苏丹黑B染色液稳定性和在溶液中的分散性较好，但是依旧不能长时间稳定保存，并且，配置时间较长，在制备过程中仍需要离心，因此仍无法做到染料的定量配制。因此，目前需要开发一种新的配制方法简单、使用方便且有效期长的脂蛋白电泳染色液。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种脂蛋白电泳染色液及其制备方法和应用，本专利技术提供的脂蛋白电泳染色液对脂蛋白的染色效果好，分辨率高，脂蛋白亚型的定性和定量分析更准确；并且本专利技术提供的脂蛋白电泳染色液配制简单、稳定性好，分散性好，脂质染料不会析出，可长期存储，稳定的染色效果可维持在18个月以上；同时，可存储范围较宽，在2-60℃范围内均能保存。为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：第一方面，本专利技术提供了一种脂蛋白电泳染色液，所述脂蛋白电泳染色液包括脂质染料、有机溶剂、助溶剂和水。其中，所述助溶剂选自聚乙二醇、聚丙二醇或聚乙烯吡咯烷酮中的任意一种或至少两种的组合。本专利技术所述的水为双蒸水，使用水是为了避免染色液过于黏稠，增加使用的便利性，并且可以减少使用过程中因染料黏稠粘附造成的不必要的损失。区别于现有技术中一般采用复合溶剂来增加脂质染料的溶解性，在本专利技术中，在脂蛋白电泳染色液中添加特定的助溶剂，可以增加脂质染料在有机溶剂中的溶解性以及稳定性。一方面，增加脂质染料在有机溶剂中的溶解性，使脂质染料可全部溶解在有机溶剂中，这样可以实现染料的定量配制，同时可避免脂质染料不必要的损耗，且可避免脂质染料在脂蛋白染色过程中析出的现象；另一方面，增加脂质染料在溶剂中的稳定性，可以维持脂蛋白电泳染色液的稳定的染色效果，并且有利于其长期保存，其可保存的温度范围广。在本专利技术中，只有添加聚乙二醇、聚丙二醇或聚乙烯吡咯烷酮中的任意一种或至少两种的组合才可以使本专利技术最后得到的脂蛋白电泳染色液具有优异的效果，添加其他助溶剂并不能对本专利技术的脂蛋白电泳染色液的稳定保存以及测试效果产生任何有益的效果。优选地，在所述脂蛋白电泳染色液中，所述脂质染料的浓度为0.001-2g/100mL，例如0.005g/100mL、0.01g/100mL、0.05g/100mL、0.1g/100mL、0.5g/100mL、1g/100mL、1.5g/100mL等，进一步优选0.001-1g/100mL，再进一步优选0.001-0.5g/100mL，更进一步优选0.003-0.2g/100mL。在本专利技术中，单位“g/100mL”的意思是，每100mL脂蛋白电泳染色液所含有的脂质染料的质量。优选地，以所述脂蛋白电泳染色液的体积为100％计，所述有机溶剂的体积百分含量为0.1-30％，例如1％、5％、10％、15％、20％、25％等，进一步优选0.5-20％，再进一步优选0.5-10％，更进一步优选0.5-5％。优选地，以所述脂蛋白电泳染色液的体积为100％计，所述助溶剂的质量百分含量为0.15-5％，例如0.2％、0.4％、0.8％、1.0％、1.5％、1.8％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％等，进一步优选0.25-4％，再进一步优选0.5-3％，更进一步优选0.5-2％。优选地，以所述脂蛋白电泳染色液的体积为100％计，所述水的体积百分含量为0.1-99.8％，例如1％、10％、20％、40％、60％、80％、90％等，进一步优选1-80％，再进一步优选5-60％，更进一步优选5-40％。在本专利技术中，有机溶剂和助溶剂在本专利技术的用量范围内不会对脂蛋白电泳产生干扰，亦不会改变脂蛋白的特性。具体的，所述助溶剂选自PEG200、PEG400、PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1450、PEG1500、PEG2000、PEG4000、PEG6000、PEG8000、PPG200、PPG400、PPG600、PVPK12、PVPK15、PVPK17、PVPK25、PVPK30、PVPK60、PVPK90中的任意一种或至少两种的组合。优选地，所述助溶剂选自PEG400、PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1450、PEG1500、PEG2000、PEG4000、PPG400、PPG600、PVPK12、PVPK15、PVPK17、PVPK25、PVPK30、PVPK60中的任意一种或至少两种的组合。优选地，所述助溶剂选自PEG1000、PEG1450、PEG1500、PEG2000、PPG400、PVPK12、PVPK15、PVPK17、PVPK25、PVPK30中的任意一种或至少两种的组合。优选地，所述有机溶剂包括甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮、乙醚、乙酸、氯仿、苯、甲苯、苯酚、二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺或1,4-二氧己环中的任意一种或至少两种的组合，进一步优选丙酮、乙醚、乙酸、苯酚、二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺或1,4-二氧己环中的任意一种或至少两种的组合，更进一步优选二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺或1,4-二氧己环中的任意一种或至少两种的组合。优选地，所述脂质染料包括苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹红7B、苏丹黑B、油红O、沃来西脱蓝B、尼罗蓝A、尼罗红、细胞膜橙红色荧光探针或苏丹红G中的一种，进一步优选苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹红7B、苏丹黑B、油红O、沃来西脱蓝B、尼罗蓝A或苏丹红G中的一种，更进一步优选苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹红7B、苏丹黑B、油红O或苏丹红G中的一种，再进一步优选苏丹Ⅰ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹红7B、苏丹黑B或油红O中的一种，最优选苏丹Ⅳ、苏丹红7B、苏丹黑B或油红O中的一种。在本专利技术中，所述脂蛋白电泳染色液中还包括增密剂。本专利技术所述的增密剂指的是可以增加脂质染料密度的添加剂，是在现有技术中蛋白电泳常用的添加剂，使用增密剂本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种脂蛋白电泳染色液，其特征在于，所述脂蛋白电泳染色液包括脂质染料、有机溶剂、助溶剂和水；其中，所述助溶剂选自聚乙二醇、聚丙二醇或聚乙烯吡咯烷酮中的任意一种或至少两种的组合。

【技术特征摘要】
1.一种脂蛋白电泳染色液，其特征在于，所述脂蛋白电泳染色液包括脂质染料、有机溶剂、助溶剂和水；其中，所述助溶剂选自聚乙二醇、聚丙二醇或聚乙烯吡咯烷酮中的任意一种或至少两种的组合。2.根据权利要求1所述的脂蛋白电泳染色液，其特征在于，在所述脂蛋白电泳染色液中，所述脂质染料的浓度为0.001-2g/100mL；以所述脂蛋白电泳染色液的体积为100％计，所述有机溶剂的体积百分含量为0.1-30％；以所述脂蛋白电泳染色液的体积为100％计，所述助溶剂的质量百分含量为0.15-5％；以所述脂蛋白电泳染色液的体积为100％计，所述水的体积百分含量为0.1-99.8％。3.根据权利要求1所述的脂蛋白电泳染色液，其特征在于，所述有机溶剂包括甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮、乙醚、乙酸、氯仿、苯、甲苯、苯酚、二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺或1,4-二氧己环中的任意一种或至少两种的组合；所述脂质染料包括苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹红7B、苏丹黑B、油红O、沃来西脱蓝B、尼罗蓝...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘亚，王政，王博伟，张宇婷，许骋，楼敬伟，
申请(专利权)人：上海宝藤生物医药科技股份有限公司，上海宝藤医学检验所有限公司，上海张江医学创新研究院，
类型：发明
国别省市：上海,31