一种屏边三七总皂苷的制备方法与抗凝血药物的应用技术

本发明专利技术涉及一种屏边三七总皂苷的制备方法与抗凝血药物的应用，属于生物医药技术领域。本发明专利技术将屏边三七粉末加入到提取溶剂中，在温度为60~100℃条件下微波提取20~40 min，过滤后得到残渣和提取液，再在相同提取条件下对残渣进行提取2~3次，合并提取液，再减压浓缩得到浸膏，采用饱和正丁醇萃取浸膏得到正丁醇浸膏，正丁醇浸膏采用MCI柱色谱分离，以乙醇/水溶剂体系进行洗脱得到乙醇洗脱液，乙醇洗脱液经浓缩、干燥即得屏边三七总皂苷。本发明专利技术屏边三七总皂苷可用于制备治疗血栓性疾病和/或抗凝血的药物组合物。

Preparation of Panax Notoginseng Saponins from Pingbian and Application of Anticoagulant Drugs

【技术实现步骤摘要】
一种屏边三七总皂苷的制备方法与抗凝血药物的应用
本专利技术涉及一种屏边三七总皂苷的制备方法与抗凝血药物的应用，属于生物医药

技术介绍
血栓是血纤维蛋白与血液有形成份在血管内的沉积。抗凝因子和纤维蛋白溶解系统的功能障碍可以导致中风、血栓及心肌梗死等疾病。目前，血栓的病死率仅次于恶心肿瘤和心肌梗塞。抗凝药可抑制凝血酶的生成和纤维蛋白的形成，从而加速血栓的溶解。市面上用于抗凝血的临床药物副作用较大，容易诱发出血症、高血钾症等疾病，而天然抗凝药物来源丰富，具有高效低毒的特性，在治疗血栓性疾病方面具有巨大的潜力。屏边三七PanaxstipuleanatusH.T.TsaietK.M.Feng为五加科人参属Panaxlinn的名贵药材，以根部入药，具有强筋健骨、化瘀疗伤、定痛通络的功效。屏边三七又名野三七，为三七的野生近缘种，从外观形态上二者有明显区别。三七主根多呈短圆锥形，而屏边三七根茎匍匐，具凹陷茎痕。屏边三七、三七主要的功效成分为皂苷类成分，但屏边三七总皂苷中主要成分为齐墩果烷型五环三萜皂苷，明显区别于三七总皂苷中达玛烷型四环三萜皂苷。皂苷类成分在三七、屏边三七药材中种类的差异，会导致其功能主治的差异，不可将二者混用。目前，国内外学者对屏边三七的研究集中在其化学成分、种植方法、快速鉴定方法、保育方法、干燥方法、抗炎活性、抗癌活性以及降血脂降血糖活性等方面的研究，但是对于屏边三七的抗血栓病尚未有报道。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术存在的问题，提供一种屏边三七总皂苷的制备方法与抗凝血药物的应用，本专利技术可有效制备高纯度屏边三七总皂苷，实现屏边三七在制备治疗血栓疾病药物中的应用。一种屏边三七总皂苷的制备方法，具体步骤如下：将屏边三七粉末加入到提取溶剂中，在温度为60～100℃条件下微波提取20～40min，过滤后得到残渣和提取液，再在相同提取条件下对残渣进行提取2～3次，合并提取液，再减压浓缩干燥得到浸膏，采用饱和正丁醇萃取浸膏得到正丁醇浸膏，正丁醇浸膏采用MCI柱色谱分离，以乙醇/水溶剂体系进行阶梯洗脱，收集乙醇/水溶剂体系中乙醇体积分数为50％～90％的乙醇洗脱液，乙醇洗脱液经浓缩、干燥即得屏边三七总皂苷。所述屏边三七粉末为屏边三七主根和/或屏边三七根茎的粉末。所述屏边三七粉末与提取溶剂的固液比g:mL为1:(5～30)；提取溶剂为水、甲醇、乙醇的一种或多种。优选的，所述屏边三七粉末与提取溶剂的固液比g:mL为1:(15～20)；优选的，所述提取溶剂为乙醇-水溶液或甲醇-水溶液，乙醇-水溶液中乙醇的体积含量为50％～70％；甲醇-水溶液中甲醇的体积含量为50％～70％。所述微波功率为300～700W。优选的，所述微波功率为400～500W；优选的，微波提取温度为70～80℃，微波提取时间为20～30min；优选的，收集乙醇/水溶剂体系中乙醇体积分数为60％～80％的乙醇洗脱液。所述屏边三七总皂苷中皂苷质量含量为50％～90％；所述屏边三七总皂苷中含有R1即式Ⅰ和R2即式Ⅱ所示的化合物；本专利技术所述屏边三七总皂苷可用于制备治疗血栓性疾病和/或抗凝血的药物组合物。所述药物组合物包括一种或多种药学上可接受的辅料，辅料可以为药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。所述药物组合物为片剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、滴丸剂、栓剂或气雾剂。所述血栓性疾病主要包括脑血管血栓、静脉血栓、心血管血栓等。本专利技术的有益效果是：(1)本专利技术制备的屏边三七总皂苷溶于水，纯度高，且制备方法简单；(2)本专利技术制备的高纯度屏边三七总皂苷，为天然药物，毒副作用小，可实现屏边三七在制备治疗血栓疾病药物中的应用。附图说明图1为实施例1屏边三七总皂苷的高效液相色谱图；其中1-屏边三七皂苷R1、2-屏边三七皂苷R2。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利技术作进一步详细说明，但本专利技术的保护范围并不限于所述内容。实施例1：一种屏边三七总皂苷的制备方法，具体步骤如下：将200g屏边三七粉末(屏边三七主根及根茎粉末)加入到1L提取溶剂(乙醇-水溶液)中，在温度为60℃条件下微波提取20min，过滤后得到残渣和提取液，再在相同提取条件下对残渣进行提取3次，合并提取液，再减压浓缩干燥得到浸膏即屏边三七提取物(79.4g)，采用饱和正丁醇萃取浸膏得到正丁醇浸膏(64.8g)，正丁醇浸膏采用MCI柱色谱分离(溶剂系统按体积比为乙醇:水＝30:70，40:60，50:50，60:40，70:30，80:20，90:10，100:0洗脱)，以乙醇/水溶剂体系进行阶梯洗脱，收集乙醇/水溶剂体系中乙醇体积分数为60％～80％的乙醇洗脱液，乙醇洗脱液经浓缩、干燥即得屏边三七总皂苷(51.5g)；其中屏边三七粉末与提取溶剂的固液比g:mL为1:5，乙醇-水溶液中乙醇的体积含量为50％；微波功率为300W；屏边三七总皂苷的高效液相色谱图见图1；从图1可知，在此条件下，屏边三七总皂苷的色谱图基线平稳，屏边三七皂苷R1和R2成分分离度较好；屏边三七总皂苷中含有R1即式Ⅰ和R2即式Ⅱ所示的化合物；采用紫外分光光度法测定屏边三七总皂苷中皂苷含量为80.5％；经高效液相色谱法测定，屏边三七皂苷R1和R2重量之和在屏边三七总皂苷中的含量为54.8％。实施例2：一种屏边三七总皂苷的制备方法，具体步骤如下：将200g屏边三七粉末(屏边三七主根及根茎粉末)加入到4L提取溶剂(乙醇-水溶液)中，在温度为80℃条件下微波提取25min，过滤后得到残渣和提取液，再在相同提取条件下对残渣进行提取3次，合并提取液，再减压浓缩干燥得到浸膏即屏边三七提取物(98.4g)，采用饱和正丁醇萃取浸膏得到正丁醇浸膏(82.9g)，正丁醇浸膏采用MCI柱色谱分离(溶剂系统按体积比为乙醇:水＝30:70，40:60，50:50，60:40，70:30，80:20，90:10，100:0洗脱)，以乙醇/水溶剂体系进行阶梯洗脱，收集乙醇/水溶剂体系中乙醇体积分数为60％～80％的乙醇洗脱液，乙醇洗脱液经浓缩、干燥即得屏边三七总皂苷(63.6g)；其中屏边三七粉末与提取溶剂的固液比g:mL为1:20，乙醇-水溶液中乙醇的体积含量为60％；微波功率为500W；屏边三七总皂苷中含有R1即式Ⅰ和R2即式Ⅱ所示的化合物；采用紫外分光光度法测定屏边三七总皂苷中皂苷含量为82.6％；经高效液相色谱法测定，屏边三七皂苷R1和R2重量之和在屏边三七总皂苷中的含量为58.4％。实施例3：一种屏边三七总皂苷的制备方法，具体步骤如下：将200g屏边三七粉末(屏边三七主根及根茎粉末)加入到6L提取溶剂(乙醇-水溶液)中，在温度为100℃条件下微波提取30min，过滤后得到残渣和提取液，再在相同提取条件下对残渣进行提取3次，合并提取液，再减压浓缩干燥得到浸膏即屏边三七提取物(83.5g)，采用饱和正丁醇萃取浸膏得到正丁醇浸膏(66.4g)，正丁醇浸膏采用MCI柱色谱分离(溶剂系统按体积比为乙醇:水＝30:70，40:60，50:50，60:40，70:30，80:20，90:10，100:0洗脱)，以乙醇/水溶剂体系进行洗脱，收集乙醇/水溶剂体系中乙醇体积分数为60％～80％的乙醇洗脱液，乙醇洗脱液经浓缩、干燥即得屏边三七总皂苷(54.2g)；其中屏本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种屏边三七总皂苷的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：将屏边三七粉末加入到提取溶剂中，在温度为60~100℃条件下微波提取20~40 min，过滤后得到残渣和提取液，再在相同提取条件下对残渣进行提取2~3次，合并提取液，再减压浓缩干燥得到浸膏，采用饱和正丁醇萃取浸膏得到正丁醇浸膏，正丁醇浸膏采用MCI柱色谱分离，以乙醇/水溶剂体系进行阶梯洗脱，收集乙醇/水溶剂体系中乙醇体积分数为50%~90%的乙醇洗脱液，乙醇洗脱液经浓缩、干燥即得屏边三七总皂苷。

【技术特征摘要】
1.一种屏边三七总皂苷的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：将屏边三七粉末加入到提取溶剂中，在温度为60~100℃条件下微波提取20~40min，过滤后得到残渣和提取液，再在相同提取条件下对残渣进行提取2~3次，合并提取液，再减压浓缩干燥得到浸膏，采用饱和正丁醇萃取浸膏得到正丁醇浸膏，正丁醇浸膏采用MCI柱色谱分离，以乙醇/水溶剂体系进行阶梯洗脱，收集乙醇/水溶剂体系中乙醇体积分数为50%~90%的乙醇洗脱液，乙醇洗脱液经浓缩、干燥即得屏边三七总皂苷。2.根据权利要求1所述屏边三七总皂苷的制备方法，其特征在于：屏边三七粉末与提取溶剂的固液比g:mL为1:(5~30)；提取溶剂为水、甲醇、乙醇的一种或多种。3.根据权利要求2所述屏边三七总皂苷的制备方法，其特征在于：提取溶剂为乙醇-水溶液或甲...

【专利技术属性】
技术研发人员：曲媛，李璐茜，杨野，崔秀明，杨晓艳，
申请(专利权)人：昆明理工大学，
类型：发明
国别省市：云南,53