一种通过序列一致性制备的谷氨酸脱羧酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种通过序列一致性制备的谷氨酸脱羧酶突变体及其应用，该谷氨酸脱羧酶突变体为下列之一：将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第383位的苏氨酸突变为赖氨酸；将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第163位的丙氨酸突变为丝氨酸。本发明专利技术通过序列一致性方法对GAD1407基因编码的氨基酸序列中出现频率最高(保留阈值在60％以上)的8个位点进行定点突变，筛选获得酶活力性和热稳定性显著高于野生型酶的谷氨酸脱羧酶突变体(突变体T383K和A163S)的t1/2分别是野生型的1.74和1.45倍，T50

A Glutamate Decarboxylase Mutant Prepared by Sequence Consistency and Its Application

【技术实现步骤摘要】
一种通过序列一致性制备的谷氨酸脱羧酶突变体及其应用
本专利技术涉及酶工程
，尤其涉及一种通过序列一致性制备的谷氨酸脱羧酶突变体及其应用。
技术介绍
GABA(γ-Aminobutyricacid或γ-Aminobutanoicacid，简称GABA)是一种有生物活性的化合物，是哺乳动物中枢神经系统中重要的抑制性神经递质，具有预防癌症、减缓心血管疾病、抗惊厥、降血压、镇静安神、醒酒等作用。此外，GABA可用于合成N-吡咯烷酮和尼龙4，在食品、医药和化工等领域应用广泛。谷氨酸脱羧酶(glutamatedecarboxylase，GAD；EC4.1.1.15)是利用生物法制备GABA的关键酶。在辅酶磷酸吡哆醛(Pyridoxal5'-phosphate,PLP)存在下，GAD可专一性地催化L-谷氨酸(L-glutamicacid，L-Glu)脱去α-羧基生成GABA。由于天然的GAD催化效率低和稳定性差等缺点，在工业上的应用有限。因此，提高GAD的催化性能对其在工业上的应用有重要的意义。提高酶催化性能的方法有：利用半理性设计的方法在蛋白质底物口袋区域进行饱和突变；定点突变；引入二硫键本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种谷氨酸脱羧酶突变体，其特征在于，为下列之一：(1)将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第383位的苏氨酸突变为赖氨酸；(2)将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第163位的丙氨酸突变为丝氨酸。

【技术特征摘要】
1.一种谷氨酸脱羧酶突变体，其特征在于，为下列之一：(1)将SEQIDNO.1所示氨基酸序列第383位的苏氨酸突变为赖氨酸；(2)将SEQIDNO.1所示氨基酸序列第163位的丙氨酸突变为丝氨酸。2.如权利要求1所述的谷氨酸脱羧酶突变体的编码基因。3.如权利要求2所述的编码基因，其特征在于，所述编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2或SEQIDNO.3所示。4.一种包含权利要求2或3所述编码基因的表达单元。5.一种包含权利要求4所述表达单...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄俊，花雨娇，梅乐和，吕常江，王宏鹏，胡升，赵伟睿，
申请(专利权)人：浙江科技学院，
类型：发明
国别省市：浙江,33