【技术实现步骤摘要】
纳米二氧化硅包裹胰蛋白酶及其制备方法
本专利技术涉及一种蛋白酶及其制备方法,特别是涉及一种具有核壳结构的蛋白酶及其制备方法,应用于酶制剂
技术介绍
蛋白酶作为一种安全、清洁、高效的酶制剂,其应用较为广泛。例如,酿酒工业中使用的酵母菌,酶的作用是将淀粉等物质水解、氧化,最后转化为酒精;同样在食品行业中,酱油和食醋的生产也离不开酶的作用;饲料经过淀粉酶和纤维素酶处理后,其营养价值有所提高;在洗衣粉中添加酶,可以去除不易清洗的汗渍等顽固污渍,进而提高了洗衣粉的去污功效。然而,酶在其天然形态中的使用常常受到一些限制,如操作稳定性低,即热稳定性、pH稳定性、水解稳定性等不佳,以及使用游离蛋白酶的限制,因此影响了酶在工业领域中的研究和应用。针对提高蛋白酶的稳定性问题,包封法固定蛋白酶是一种有效地方式,则是将蛋白酶固定在纳米材料内,进而提高了蛋白酶的稳定性。但是,目前包封酶的研究均是将蛋白酶完全包裹在纳米材料之中,因而也影响了酶与底物反应的传质效率。
技术实现思路
为了解决现有技术问题,本专利技术的目的在于克服已有技术存在的不足,提供一种纳米二氧化硅包裹胰蛋白酶及其制备方 ...
【技术保护点】
1.一种纳米二氧化硅包裹胰蛋白酶,其特征在于:将胰蛋白酶(BT)包裹在纳米二氧化硅之中,形成具有胰蛋白酶@SiO2核壳结构的复合纳米颗粒,且胰蛋白酶的催化口袋不被纳米二氧化硅壳包裹,形成胰蛋白酶的催化口袋外露的传质窗口。
【技术特征摘要】
1.一种纳米二氧化硅包裹胰蛋白酶,其特征在于:将胰蛋白酶(BT)包裹在纳米二氧化硅之中,形成具有胰蛋白酶@SiO2核壳结构的复合纳米颗粒,且胰蛋白酶的催化口袋不被纳米二氧化硅壳包裹,形成胰蛋白酶的催化口袋外露的传质窗口。2.一种权利要求1所述纳米二氧化硅包裹胰蛋白酶的制备方法,其特征在于,采用包封法,固定胰蛋白酶,并使胰蛋白酶的催化口袋不被包裹,包括如下步骤:(1)使用胰蛋白酶抑制剂和胰蛋白酶进行混合,形成胰蛋白酶-胰蛋白酶抑制剂基团复合物,再使用APTS修饰胰蛋白酶-胰蛋白酶抑制剂基团复合物,形成具有APTS-胰蛋白酶-胰蛋白酶抑制剂基团-APTS结构的中间体,使胰蛋白酶的催化口袋被胰蛋白酶抑制剂基团占据且不被APTS修饰;(2)使用未被APTS修饰的胰蛋白酶抑制剂,来置换在所述步骤(1)中被APTS修饰的具有APTS-胰蛋白酶-胰蛋白酶抑制剂基团-APTS结构的中间体的胰蛋白酶抑制剂基团-APTS部分,形成APTS-胰蛋白酶-胰蛋白酶抑制剂基团产物,从而去除具有APTS-胰蛋白酶-胰蛋白酶抑制剂基团-APTS结构的中间体一端的APTS基团;(3)利用水解反应方法,将在所述步骤(2)中制备的APTS-胰蛋白酶-胰蛋白酶抑制剂基团产物作为核,形成纳米二氧化硅包裹层,而复合纳米材料中的胰蛋白酶抑制剂基团没有被APTS修饰,进而不会被纳米二氧化硅壳包裹,从而制备得到胰蛋白酶@SiO2-胰蛋白酶抑制剂基团复合纳米颗粒;(4)去除在所述步骤(3)...
【专利技术属性】
技术研发人员:曹傲能,罗娜娜,王海芳,
申请(专利权)人:上海大学,
类型:发明
国别省市:上海,31
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