一种检测单核苷酸多态性的方法技术

本申请公开了一种检测单核苷酸多态性的方法，所述方法至少包括以下步骤：1)根据野生型目标DNA的序列合成互补的PNA链；2)待测目标DNA与所述步骤1)中合成的PNA链配对得到均一溶液；3)向步骤2)所述溶液中加入核酸酶；4)将单壁碳纳米管与氯化血红素孵育后得到复合物溶液；5)将所述步骤3)和4)的溶液混合，加入盐溶液并离心；6)将所述步骤5)的溶液取上清液加入到显色溶液中，根据溶液的光谱信息，定性或定量判断所述待测样品中野生型目标DNA的浓度。

A Method for Detecting Single Nucleotide Polymorphism

【技术实现步骤摘要】
一种检测单核苷酸多态性的方法
本专利技术涉及基因单核苷酸多态性(SNP)的检测，属于分子生物学领域。
技术介绍
单核苷酸多态性(SNP)主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性，包括转换、颠换、插入和缺失，在人类基因组中广泛存在，是人类可遗传的变异中最常见的一种。SNP既可能在基因序列内，也可能在基因以外的非编码序列上，会导致基因突变，破坏正常细胞的基本机制，进而演变成癌症，这也是目前人体突发癌症的主要原因之一。有些处于编码基因上的SNP位点还会影响蛋白质的转录和翻译，引起蛋白质功能转变或缺失，进一步影响个体的耐药性和不良反应。一些研究表明，SNP有可能成为新一代疾病标志物，在疾病的早期诊断、临床预后与疾病预防等方面发挥重要作用。人类肿瘤抑制基因TP53在生物体内能够抑制正常基因癌变，位于17号染色体p13。当TP53基因出现SNP位点后，不仅失去了原本抑制肿瘤细胞增殖的作用，反而还会使一些癌变基因转录失控，从而导致肿瘤发生。肽核酸(peptidenucleicacids,PNA)是一种人工合成的脱氧核糖核酸(DNA)类似物，其主链由N-2-(氨乙基)-甘氨酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测单核苷酸多态性的方法，其特征在于，所述方法至少包括以下步骤：1)根据野生型目标DNA的序列合成互补的PNA链；2)待测目标DNA与所述步骤1)中合成的PNA链配对得到均一溶液；3)向步骤2)所述溶液中加入核酸酶；4)将单壁碳纳米管与氯化血红素孵育后得到复合物溶液；5)将所述步骤3)和4)的溶液混合，孵育，加入盐溶液并离心；6)将所述步骤5)的溶液取上清液加入到显色溶液中，根据溶液的光谱信息，定性或定量判断所述待测样品中野生型目标DNA的浓度。

【技术特征摘要】
1.一种检测单核苷酸多态性的方法，其特征在于，所述方法至少包括以下步骤：1)根据野生型目标DNA的序列合成互补的PNA链；2)待测目标DNA与所述步骤1)中合成的PNA链配对得到均一溶液；3)向步骤2)所述溶液中加入核酸酶；4)将单壁碳纳米管与氯化血红素孵育后得到复合物溶液；5)将所述步骤3)和4)的溶液混合，孵育，加入盐溶液并离心；6)将所述步骤5)的溶液取上清液加入到显色溶液中，根据溶液的光谱信息，定性或定量判断所述待测样品中野生型目标DNA的浓度。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述野生型目标DNA来自人类肿瘤抑制基因TP53、肺癌EGFR、KRAS、p16基因中的至少一种。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，当所述野生型目标DNA为人类肿瘤抑制基因TP53时，PNA链的碱基序列至少包括序列为TCCACGCACAAA的12个碱基。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤2)中，将待测目标DNA与PNA链混合后，加热5～15分钟，室温冷却，所述加热在80～100℃的条件下进行，获得的DNA-P...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐梦佳，赵超，徐皖星，邢淑，
申请(专利权)人：中国科学院宁波工业技术研究院慈溪生物医学工程研究所，中国科学院宁波材料技术与工程研究所，
类型：发明
国别省市：浙江,33