一种基于GQDs的共振光散射探针结合CHA技术定量检测突变DNA的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于GQDs的共振光检测探针结合CHA技术定量检测突变DNA的方法。本发明专利技术首先合成石墨烯量子点，接着针对目标物设计了两种发夹探针H1、H2，然后将探针与GQDs通过缩合反应制备两种探针GQDs‑H1,GQDs‑H2。在PBS缓冲溶液反应体系中，当加入p53突变DNA时，会引起GQDs‑H1和GQDs‑H2的聚集，产生显著增强的共振光信号，实现对p53突变DNA的定量检测。本发明专利技术具有很高的灵敏度和选择性，线性范围为1pM到50nM，检测限为0.8pM，能有效地定量检测目标物。

A Quantitative Detection Method of Mutant DNA Based on GQDs Resonance Light Scattering Probe and CHA Technology

The invention discloses a method for quantitative detection of mutant DNA based on GQDs resonance light detection probe combined with CHA technology. The invention first synthesizes graphene quantum dots, then designs two kinds of hairpin probes H1 and H2 for the target, and then synthesizes two kinds of probes GQDs H1 and GQDs H2 by condensation reaction between the probes and GQDs. In PBS buffer solution reaction system, when p53 mutant DNA is added, GQDs H1 and GQDs H2 will be aggregated, which will produce a significantly enhanced resonance light signal and realize the quantitative detection of p53 mutant DNA. The method has high sensitivity and selectivity, the linear range is from 1pM to 50nM, the detection limit is 0.8pM, and the target can be quantitatively detected effectively.

【技术实现步骤摘要】
一种基于GQDs的共振光散射探针结合CHA技术定量检测突变DNA的方法
本专利技术涉及分子检测领域，尤其涉及一种基于GQDs共振光散射探针结合CHA技术定量检测突变DNA的方法。
技术介绍
石墨烯量子点(GQDs)由于具有光稳定性好，水溶性好，毒性低，生物相容性好等特点，所以被广泛应用于生物医药各个领域。例如：石墨烯量子点可以作为药物递送的有效载体(Zheng,X.T.,Than,A.,Ananthanaraya,A.,Kim,D.H.,Chen,P.,AcsNano,2013,7,6278-6286)，石墨烯量子点也具有良好的药物负载能力(Wang,J.,Liu,C.H.,Shuai,Y.,Cui.X.Y.,B.,Xia,Y.Z.,Zhang,Niel.L.,ColloidsSurf.BBiointerfaces,2013,112,192-6)。除此之外，石墨烯量子点也可用于小分子检测(Lin,L.P.,Rong,M.C.,L,S.S.,Song,X.H.,Zhong,Y.X.,Yan,J.W.,Wang,Y.R.,Chen,X.,Nanoscale,2015,7,1872.)，D本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于GQDs的共振光散射探针结合CHA技术定量检测突变DNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：(一)石墨烯量子点的制备将2g柠檬酸置于圆底烧瓶中，在200℃下用加热套加热30分钟，柠檬酸逐渐溶化,其颜色从无色变为橙色。然后，在剧烈搅拌下将100mL 10mg mL

【技术特征摘要】
1.一种基于GQDs的共振光散射探针结合CHA技术定量检测突变DNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：(一)石墨烯量子点的制备将2g柠檬酸置于圆底烧瓶中，在200℃下用加热套加热30分钟，柠檬酸逐渐溶化,其颜色从无色变为橙色。然后，在剧烈搅拌下将100mL10mgmL-1NaOH溶液逐滴加入到反应混合物,并搅拌30分钟，得到的GQDs溶液调节至中性并储存在冰箱中。(二)一种发夹型DNA探针的设计，具有：茎环结构H1：NH2C6-GACTCCGGTTCATGCATATAGGAGTCCGAGCATGAACCG发夹H2：NH2C6-TCATGCTCGGACTCCTATATGCATGAACCGGAGTCCGAG(三)石墨烯量子点和氨基修饰的发夹探针的缀合取10mL的离心管，加入0.1mgmL-1的石墨烯量子点溶液，超声15min。然后，再加入50mMEDC和10mMNHS，在室温下搅拌30min，以使石墨烯量子点上的羧基活化。将GQDs溶液分成两份相等的体积。分别加入两份体积相同的氨基修饰的发夹探针H1、H2,在室温下进行缩合反应,持续反应一夜，得到GQDs-H1,G...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡昌群，韩云鹏，王双，龚行，
申请(专利权)人：湘潭大学，
类型：发明
国别省市：湖南,43