奥利万星中间体的发酵方法技术

本发明专利技术公开了一种发酵制备A82846B的方法。该方法将东方拟无枝碱菌进行发酵培养后得到的发酵培养液进行提取后，提取得到的杂质废液进行碱降解，得到碱降解液。将碱降解液加入到发酵培养基后，再次进行发酵，培养25‑35h后，补加氯化钙，继续发酵。添加不同浓度的杂质碱降解液，且在发酵培养30h左右补加氯化钙，A82846B发酵单位有了大幅提高，同时组分有了显著改善。

Fermentation of Olivan Star Intermediates

【技术实现步骤摘要】
奥利万星中间体的发酵方法
本专利技术属于微生物发酵生产
，涉及糖肽类抗生素的发酵方法，具体涉及一种通过发酵制备奥利万星中间体A82846B的方法。
技术介绍
糖肽抗生素是由微生物产生，或由微生物产生并进行部分修饰的一大类物质。万古霉素和替考拉宁为市售的抗菌产品。在上世纪九十年代发现的糖肽中，包括称作A82846A(也称作ereomomycin)、A82846B(也称作氯东方霉素chloroorienticinA)、A82846C(也称作东方霉素orienticinC)及东方霉素A。已经对天然存在的糖肽进行了多种修饰，其中一种是对糖肽中的反应性胺的还原烷基化的修饰。2014年8月7日FDA批准抗生素奥利万星(oritavancin)用于由敏感革兰氏阳性菌导致的急性细菌性皮肤和皮肤结构感染成人患者的治疗。奥利万星是一种单剂量治疗方案的抗生素,具有良好的市场前景。A82846B是合成奥利万星的关键中间体，可由东方拟无枝酸菌(Amycolatopsisorientalis)发酵产生。除了A82846B，东方拟无枝酸菌发酵时还会产生两种主要成分A82846A和A82846C，其结构式如下本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种发酵制备奥利万星中间体A82846B的方法，该方法包括：(1)将东方拟无枝酸菌NRRL 18099接种到种子培养基中进行培养，得到种子液；(2)将种子液接种于发酵培养基中进行发酵培养；(3)对发酵得到的发酵液进行提取，提取得到的A82846B纯度在90％以上部分用于提取产品，纯度在90％以下的则是杂质废液；(4)将上述杂质废液进行碱降解，得到碱降解液；(5)将步骤(4)得到的碱降解液加入到发酵培养基后，将步骤(1)得到的种子液接种于该发酵培养基进行发酵，发酵培养25‑35h后，补加氯化钙，继续发酵培养得到A82846B。

【技术特征摘要】
1.一种发酵制备奥利万星中间体A82846B的方法，该方法包括：(1)将东方拟无枝酸菌NRRL18099接种到种子培养基中进行培养，得到种子液；(2)将种子液接种于发酵培养基中进行发酵培养；(3)对发酵得到的发酵液进行提取，提取得到的A82846B纯度在90％以上部分用于提取产品，纯度在90％以下的则是杂质废液；(4)将上述杂质废液进行碱降解，得到碱降解液；(5)将步骤(4)得到的碱降解液加入到发酵培养基后，将步骤(1)得到的种子液接种于该发酵培养基进行发酵，发酵培养25-35h后，补加氯化钙，继续发酵培养得到A82846B。2.如权利要求1所述的方法，步骤(1)的种子培养基为麦芽糊精20g/L，葡萄糖10g/L，黄豆粉15g/L，酵母提取物3g/L，碳酸钙1g/L，pH7.0。3.如权利要求1所述的方法，步骤(2)和步骤(5)的发酵培养基为麦芽糊精40g/L，糖蜜20g/L，黄豆粉20g/L，酵母粉10g/L，碳酸钙3g/L，氯化钙10g/L，pH7.0。4.如权利要求1所述的方法，步骤(3)提取的方法为：将步骤(2)得到的发酵培养液pH调节至10～11，固液分离得到滤液；将滤液pH调节至9.0-9.5后导入大孔吸附树脂进行富集；将树脂净化，然后用解吸液进行解吸并收集组分，得到A82846B解吸混合液；将解吸混合液进行浓缩后，进行反相填料层析分离，用极性溶剂与盐水的解吸混合液进行解吸，将层析分离得到的解析液...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁建栋，刘会明，
申请(专利权)人：重庆乾泰生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆,50