瓜氨酸化抗原修饰肽及其应用制造技术

本发明专利技术提供了瓜氨酸化抗原修饰肽及其应用，涉及类风湿关节炎治疗技术领域，所述瓜氨酸化抗原修饰肽具有SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。所述瓜氨酸化抗原修饰肽与类风湿关节炎相关的HLA‑DRB1特异性结合，抑制抗原肽与HLA‑DRB1的结合，从而使T细胞的激活受到抑制，达到治疗类风湿关节炎的目的。

Citrullinated Antigen Modified Peptide and Its Application

【技术实现步骤摘要】
瓜氨酸化抗原修饰肽及其应用
本专利技术涉及类风湿关节炎治疗
，具体涉及瓜氨酸化抗原修饰肽及其应用。
技术介绍
类风湿关节炎是一种以慢性进行性关节病变为主的全身性自身免疫病。病变主要累积全身多个关节，呈多发性和对称性慢性滑膜炎，进而引起软骨和骨质的破坏，严重者可导致关节畸形，甚至残疾。类风湿关节炎是造成劳动力丧失与致残的主要疾病之一。类风湿关节炎的病因尚未明确，普遍认为，遗传因素在类风湿关节炎的发病机制中发挥重要作用。近年来对类风湿关节炎发病机制的研究显示，自身抗原驱动的T细胞激活是类风湿关节炎发病及病情演变的基础。抗原多肽通过体内的抗原提呈细胞识别与提呈，进而被抗原特异性T细胞表面T细胞受体(TCR)识别，形成MHC-抗原肽-TCR三分子复合物，激活抗原特异性T及B细胞，导致炎性细胞因子、免疫球蛋白等产生增多，引起滑膜炎症、血管翳形成，导致软骨及骨质破坏等类风湿关节炎的特征性病理性变化。目前，尚无从根本上控制类风湿关节炎的药物。临床上主要应用改善病情抗风湿药物和生物制剂来减轻症状，抑制炎症，延缓关节损害和改善患者的功能。近年来，生物制剂和小分子靶向药物的应用，使类风湿关节炎患者的治疗有了更多的选择，缓解率也有进一步的提高。尽管如此，依旧有部分患者治疗效果不佳。生物制剂和小分子靶向药物价格昂贵，给患者和社会带来了巨大的经济负担。而且，这些药物并非作用于发病的起始环节，难以针对性地控制病变。而且，其骨髓抑制、肝功能损害、增加感染风险等不良反应较多，导致很多患者不能耐受这些药物的治疗。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供了瓜氨酸化抗原修饰肽及其应用，所述瓜氨酸化抗原修饰肽与类风湿关节炎相关的HLA-DRB1特异性结合，抑制抗原肽与HLA-DRB1的结合，从而使T细胞的激活受到抑制，达到治疗类风湿关节炎的目的。本专利技术提供了瓜氨酸化抗原修饰肽，所述瓜氨酸化抗原修饰肽具有SEQIDNo.1或SEQIDNo.2所示的氨基酸序列。优选的，在所述瓜氨酸化抗原修饰肽的氮端连接豆蔻酸。本专利技术还提供了上述技术方案所述的瓜氨酸化抗原修饰肽在制备防治类风湿关节炎药物中的应用。优选的，所述药物还包括瓜氨酸化抗原修饰肽在药学上可接受的药用载体或佐剂。优选的，所述药物的剂型包括片剂、丸剂、胶囊剂、糖浆剂、粉剂或溶液剂。本专利技术还提供了上述技术方案所述的瓜氨酸化抗原修饰肽在制备抑制T细胞对抗原识别的药物中的应用。本专利技术还提供了上述技术方案所述的瓜氨酸化抗原修饰肽在制备抑制T细胞对抗原识别引起的自身免疫反应的药物中的应用。本专利技术还提供了上述技术方案所述的瓜氨酸化抗原修饰肽在制备阻断T细胞和抗原肽结合的药物中的应用。本专利技术还提供了上述技术方案所述的瓜氨酸化抗原修饰肽在制备抑制HLA-DRB1分子的功能的药物中的应用。本专利技术提供了瓜氨酸化抗原修饰肽及其应用，所述瓜氨酸化抗原修饰肽具有SEQIDNo.1或SEQIDNo.2所示的氨基酸序列，所述瓜氨酸化抗原修饰肽与类风湿关节炎相关的HLA-DRB1特异性结合，抑制抗原肽与HLA-DRB1的结合，从而使T细胞的激活收到抑制，达到治疗类风湿关节炎的目的。附图说明图1为瓜氨酸化抗原修饰肽筛选；图2为aVP3和aVP5对类风湿关节炎患者PBMC分泌IL-6影响的进一步验证；图3为aVP3和aVP5鼻黏膜给药对实验性关节炎的抑制作用；图4为aVP3和aVP5通过抑制Tfh抑制实验性关节炎的发展。具体实施方式本专利技术提供了瓜氨酸化抗原修饰肽，所述瓜氨酸化抗原修饰肽具有SEQIDNo.1或SEQIDNo.2所示的氨基酸序列，具体序列如下：SEQIDNo.1：SAVAL-Cit-SSVPGVR；SEQIDNo.2：SAVRL-Cit-RSVPGVR。在本专利技术中，所述瓜氨酸化抗原修饰肽的设计思路为：1.瓜氨酸化抗原修饰肽与HLA的相互作用能力增强或者不变，至少不能明显减弱；2.瓜氨酸化抗原修饰肽与可以识别HLA-DRB1*04:01的TCR相互作用能力明显减弱。所述瓜氨酸化抗原修饰肽在体内与HLA-DRB1*04:01结合，但是却不能引起相应的自身反应性T细胞的活化，从而减轻类风湿关节炎的病症甚至达到治愈的效果。在本专利技术中，所述瓜氨酸化抗原修饰肽由中肽生化有限公司和北京赛百盛基因技术有限公司以固相合成法合成、高效液相层析法纯化得到。本专利技术优选在所述瓜氨酸化抗原修饰肽的氮端连接豆蔻酸，具体序列如下所示：SEQIDNo.3：Myr-SAVAL-Cit-SSVPGVR；SEQIDNo.4：Myr-SAVRL-Cit-RSVPGVR。本专利技术在所述瓜氨酸化抗原修饰肽的氮端连接豆蔻酸，所述豆蔻酸不仅增加了多肽的水溶性和稳定性，还能促进多肽向细胞内的转运和提呈。本专利技术还提供了上述技术方案所述的瓜氨酸化抗原修饰肽在制备防治类风湿关节炎药物中的应用。在本专利技术中，所述药物还优选包括瓜氨酸化抗原修饰肽在药学上可接受的药用载体或佐剂。本专利技术对所述药用载体和佐剂的种类没有特殊限定，采用常规即可。在本专利技术中，所述药物的剂型优选包括片剂、丸剂、胶囊剂、糖浆剂、粉剂或溶液剂。本专利技术对上述药物的剂型的制备方法没有特殊限定，采用剂型的常规制备方法即可。本专利技术对所述瓜氨酸化抗原修饰肽在剂型中的含量没有特殊限定，采用常规剂型中药物的含量即可。本专利技术还提供了上述技术方案所述的瓜氨酸化抗原修饰肽在制备抑制HLA-DRB1分子的表达的药物中的应用。本专利技术还提供了上述技术方案所述的瓜氨酸化抗原修饰肽在制备抑制T细胞对抗原识别的药物中的应用。本专利技术还提供了上述技术方案所述的瓜氨酸化抗原修饰肽在制备抑制T细胞对抗原识别引起的自身免疫反应的药物中的应用。本专利技术还提供了上述技术方案所述的瓜氨酸化抗原修饰肽在制备阻断T细胞和抗原肽结合的药物中的应用。本专利技术还提供了上述技术方案所述的瓜氨酸化抗原修饰肽在制备抑制HLA-DRB1分子的功能的药物中的应用。下面结合具体实施例对本专利技术所述的瓜氨酸化抗原修饰肽及其应用做进一步详细的介绍，本专利技术的技术方案包括但不限于以下实施例。实施例1瓜氨酸化抗原修饰肽的筛选，共设计12条瓜氨酸化抗原修饰肽，分别为：aVP1(SEQIDNo.6：SAVEL-Cit-SSVPGVR)；aVP2(SEQIDNo.7：SAVDL-Cit-SSVPGVR)；aVP3(SEQIDNo.3)；aVP4(SEQIDNo.8：SAVGL-Cit-SSVPGVR)；aVP5(SEQIDNo.4)；aVP6(SEQIDNo.9：SAVRL-Cit-FSVPGVR)；aVP7(SEQIDNo.10：SAVRL-Cit-SSVEGVR)；aVP8(SEQIDNo.11：SAVRL-Cit-SSVKGVR)；aVP9(SEQIDNo.12：SAVRL-Cit-SSVWGVR)；aVP10(SEQIDNo.13：SAVEL-Cit-WSVPGVR)；aVP11(SEQIDNo.14：SAVDL-Cit-SSVRGVR)；aVP12(SEQIDNo.15：SAVAL-Cit-KSVFGVR)；原型肽(SEQIDNo.16：SAVRL-Cit-SSVPGVR)。根据图1可知，在原型肽的刺激下，类风湿关节炎患者外周血PBMC产生IL-6水平升高。而在aVP2，aVP3，aV本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.瓜氨酸化抗原修饰肽，其特征在于，所述瓜氨酸化抗原修饰肽具有SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.瓜氨酸化抗原修饰肽，其特征在于，所述瓜氨酸化抗原修饰肽具有SEQIDNo.1或SEQIDNo.2所示的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的瓜氨酸化抗原修饰肽，其特征在于，在所述瓜氨酸化抗原修饰肽的氮端连接豆蔻酸。3.权利要求1或2所述的瓜氨酸化抗原修饰肽在制备防治类风湿关节炎药物中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述药物还包括瓜氨酸化抗原修饰肽在药学上可接受的药用载体或佐剂。5.根据权利要求3或4所述的应用，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：栗占国，孙晓麟，刘佳佳，来鲁华，梁浩，
申请(专利权)人：北京大学人民医院北京大学第二临床医学院，北京大学，
类型：发明
国别省市：北京,11