环介导等温扩增技术对鳕鱼的鉴定及所用引物制造技术

技术编号:21622647 阅读:35 留言:0更新日期:2019-07-17 09:19
本发明专利技术公开了一种环介导等温扩增技术对鳕鱼的鉴定所用引物;包括:针对大西洋鳕鱼的引物,针对太平洋鳕鱼的引物,针对黑线鳕的引物,针对鳕科鳕鱼的引物。本发明专利技术还同时提供了利用上述引物进行的环介导等温扩增技术对鳕鱼的鉴定方法,包括以下步骤:1)、待测样品(包括鱼类样品)中基因组DNA的提取;2)、利用引物进行实时荧光LAMP法和LAMP染色法;3)、根据实时荧光LAMP法和LAMP染色法检测结果进行判断。本发明专利技术将环等温扩增技术应用于国内市场常见鳕鱼(大西洋鳕鱼、太平洋鳕鱼及黑线鳕)及相关产品的品种鉴定标记研究。

Identification of COD by loop-mediated isothermal amplification and its primers

【技术实现步骤摘要】
环介导等温扩增技术对鳕鱼的鉴定及所用引物
本专利技术涉及国内鳕科鳕鱼类产品的环介导等温扩增检测技术。
技术介绍
鳕鱼多是生活在海洋底层和深海中下层的冷水性鱼类,属脊椎动物门(Vertebrata)、硬骨鱼纲(Osteichthyes)、鳕形目(Gadiformes)。鳕鱼肉味甘美、营养丰富,是主要食用鱼类之一,在世界渔业中占有重要的地位。目前,我国鳕鱼的消费量正呈逐年递增趋势,市售鳕鱼主要分为三类:(1)属于鳕科的鳕鱼类,包括鳕属的大西洋鳕鱼(Gadusmorhua),太平洋鳕鱼(Gadusmacrocephalus),狭鳕(Theragrachalcogramma)及其他鳕科的鱼类,如黑线鳕(Melanogrammusaeglefinus),青鳕(Theragrachalcogramma)等;(2)不属于鳕科但被称为“银鳕鱼”的裸盖鱼(Anoplopomafimbria)和南极犬牙鱼(Dissostichuseleginoides),其分别属鲉形目和鲈形目,但营养价值高于鳕科的鳕鱼类[2];(3)鱼目混珠的假鳕鱼类,俗称油鱼,主要是为棘鳞蛇鲭(Ruvettuspretiosus)和本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.环介导等温扩增技术对鳕鱼的鉴定所用引物;其特征是包括如下引物:一、针对大西洋鳕鱼的引物:F3:ATTCCCCTTTGTTGTTGCT;B3:GGTAACGATGGGGTTAGCAG;FIP:CTTGTCTGCATTTGAATTGATCCCT‑GCTTTTACAATACTCCACCTG;BIP:AGACCTGCTCGGCTTTGCTGT‑GTGAAATTATCTGGATCTCC二、针对太平洋鳕鱼的引物:F3:TATACATGCTAACGGTGCCTCB3:ACGTAAGGGACAGTAGATATFIP:GAAAAGGACAACCCCGATGTT‑TATACATATTGCCCGAGGTCBIP...

【技术特征摘要】
1.环介导等温扩增技术对鳕鱼的鉴定所用引物;其特征是包括如下引物:一、针对大西洋鳕鱼的引物:F3:ATTCCCCTTTGTTGTTGCT;B3:GGTAACGATGGGGTTAGCAG;FIP:CTTGTCTGCATTTGAATTGATCCCT-GCTTTTACAATACTCCACCTG;BIP:AGACCTGCTCGGCTTTGCTGT-GTGAAATTATCTGGATCTCC二、针对太平洋鳕鱼的引物:F3:TATACATGCTAACGGTGCCTCB3:ACGTAAGGGACAGTAGATATFIP:GAAAAGGACAACCCCGATGTT-TATACATATTGCCCGAGGTCBIP:TCGTAGGTTACGTCCTTCCCTGA-ATTTGTAATCACGGTAGCC;三、针对黑线鳕的引物:F3:GCTTGGTTTTGCCGTAATAC;B3:GTGAAGGAAAGGAACAACCA;FIP:CGGGGGTAAAATTATCAGGATC-TAGGTCTAACTTCTCTTGCTCTCT;BIP:ATTTGCTTATGCTATCCTCCGTTC-AAACAAGAGTGCAAGAACCC;F3、B3为LAMP正、反向外引物,FIP、BIP为正、反向内引物。2.根据权利要求1所述的环介导等温扩增技术对鳕鱼的鉴定所用引物;其特征是还包括如下针对鳕科鳕鱼的引物:F3:GTATGGTCGTTAACATTGATGG;B3:AGGGTAAGCTGACGACGGT;FIP:GTCCTTTGGGTTTTAAGCTATTGC-TTATACCCAAACCATCCGC;BIP:TAGACCCCCCTAGAGGAGCCT-AAGGATGGTGAGGTTAAACG。3.利用如权利要求1或2所述的引物进行的环介导等温扩增技术对鳕鱼的鉴定方法,其特征包括以下步骤:1)、待测样品中基因组DNA的提取;2)、利用引物进行实时荧光LAMP法和LAMP染色法;3)、根据实时荧光LAMP法和LAMP染色法检测结果进行判断。4.根据权利要求3所述的环介导等温扩增技术对鳕鱼的鉴定方法,其特征是所述步骤2):方法一、实时荧光L...

【专利技术属性】
技术研发人员:冯俊丽汪艺朱勤超沈清
申请(专利权)人:浙江工商大学
类型:发明
国别省市:浙江,33

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