一种提高热凝胶水解效率的基因工程菌及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种提高热凝胶水解效率的基因工程菌及应用，属于基因工程技术领域。本发明专利技术通过筛选获得了如SEQ ID NO.1所示的能够提高热凝胶水解效率的基因，并将其在毕赤酵母中表达，使β‑1,3‑内切葡聚糖酶的酶活由277.8U/mL提高至333.3U/mL，热凝胶的水解效率提高了20％。

A genetic engineering bacterium for improving hydrolysis efficiency of thermal gelatin and its application

【技术实现步骤摘要】
一种提高热凝胶水解效率的基因工程菌及应用
本专利技术涉及一种提高热凝胶水解效率的基因工程菌及应用，属于基因工程

技术介绍
热凝胶是一种由β-1,3-糖苷键连接而成的无分支线性葡聚糖，热凝胶低聚糖(热凝胶水解产物β-1,3-葡寡糖)具有益生元活性，目前热凝胶的水解方法主要为酸解法，但水解效率和寡糖得率均较低，且发酵过程难以控制、污染严重。内切β-1,3-葡聚糖酶在裂褶菌、黄蓝状菌、哈茨木霉、毕赤酵母等菌株中均有表达，具体包括，利用哈茨木霉、重组毕赤酵母KM71(启动子为AOX且导入了内切β-1,3-葡聚糖酶)以及重组毕赤酵母GS115(启动子替换成GAP且导入了内切β-1,3-葡聚糖酶)生产内切β-1,3-葡聚糖酶。目前市售β葡聚糖酶中内切β葡聚糖酶含量低，纯度较高的内切β葡聚糖酶制剂价格比较昂贵，增大了寡糖制备成本，内切β-1,3-葡聚糖酶可高效水解热凝胶制备β-1,3-葡寡糖。毕赤酵母具有细胞生长快、易于培养，蛋白表达完整、重组质粒整合在染色体上，遗传性能稳定、外源基因不易丢失，外源蛋白分泌到胞外，有利于目的蛋白的分离纯化等特点。启动子为AOX的重组毕赤酵母KM71产酶时本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种编码β‑1,3‑葡聚糖酶的基因，其特征在于，含有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种编码β-1,3-葡聚糖酶的基因，其特征在于，含有SEQIDNO.1所示的核苷酸序列。2.权利要求1所述基因编码的β-1,3-葡聚糖酶。3.携带权利要求1所述基因的载体或含有权利要求1所述所述基因的细胞系。4.一种基因工程菌，其特征在于，表达SEQIDNO,1所示的基因。5.根据权利要求4所述的基因工程菌，其特征在于，以毕赤酵母为宿主。6.根据权利要求5所述的基因工程菌，其特征在于，所述毕赤酵母是毕赤酵母GS115。7.权利要求4～6任一...

【专利技术属性】
技术研发人员：高敏杰，詹晓北，朱莉，蒋芸，吴剑荣，张洪涛，金树霞，李志涛，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32