一种检测TIM-3抗体活性的试剂盒和方法技术

本发明专利技术提供了一种检测TIM‑3抗体活性的试剂盒和方法，其中包括表面上展示TIM‑3抗原或其功能片段以及报告基因基团的免疫细胞，以及包括与CD‑3抗体交联的微珠。通过混合所述免疫细胞、所述微珠、TIM‑3抗体，检测报告基因基团的活性进而判断TIM‑3抗体活性。该方法操作简单、灵敏度高、重复性好。

A Kit and Method for Detecting TIM-3 Antibody Activity

【技术实现步骤摘要】
一种检测TIM-3抗体活性的试剂盒和方法
本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种检测TIM-3抗体活性的试剂盒和方法。
技术介绍
T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域蛋白.3(Tcellimmunoglobulindomainandmucindomain-3，简称TIM-3)作为一个关键免疫检查点分子，广泛存在于Th-1辅助T细胞、细胞毒性CD8+T细胞、树突细胞、单核细胞、自然杀伤细胞等细胞的表面，在与其配体结合后会对免疫功能起到调节作用。现有大量研究表明，TIM-3在肿瘤引起的免疫抑制过程中起到重要作用。T细胞的激活一般需要第一信号与第二信号同时存在。第一信号为CD3/TCR(T细胞受体)复合物与抗原呈递细胞(APC)或是其他细胞表面的抗原/MHC(主要组织相容性抗原)复合物结合后产生。第二信号为共刺激信号，主要为T细胞表面的CD28与APC表面的CD80/86结合后产生。已有文献报道，TIM-3可以通过与TCR下游的Src激酶，包括Fyn和Lck，相互作用后抑制T细胞的免疫响应，例如IL-2分泌。目前针对TIM-3抗体的免疫细胞例如T细胞活性功能检测需要使用原代的免疫细胞，材料来源受限本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种试剂盒，其包含：(i)免疫细胞，所述免疫细胞的细胞表面上展示TIM‑3抗原或其功能片段，以及报告基因基团；和(ii)微珠，所述微珠与CD‑3抗体交联。

【技术特征摘要】
1.一种试剂盒，其包含：(i)免疫细胞，所述免疫细胞的细胞表面上展示TIM-3抗原或其功能片段，以及报告基因基团；和(ii)微珠，所述微珠与CD-3抗体交联。2.如权利要求1所述的试剂盒，其进一步包括以下中的至少一种：1)CD28抗体；2)报告基因底物。3.如权利要求1或2所述的试剂盒，其中，所述免疫细胞包括T细胞、B细胞、NK细胞、树突状细胞、单核细胞、巨噬细胞、粒细胞、肥大细胞中的一种以上；优选地，所述T细胞包括Jurkat细胞、HuT-78、CEM、Molt-4、MO、H9、MJ、TALL-104、Loucy、P116、J45.01、J.RT3-T3.5、MO、H9、MJ、TALL-104、Loucy、P116、J45.01、J.RT3-T3.5中的一种以上。4.如权利要求1或2所述的试剂盒，所述报告基因包括氯霉素乙酰转移酶(cat)、β-半乳糖苷酶(LacZ)、葡萄糖醛酸酶(GUS)、二氢叶酸还原酶、荧光素酶、分泌型碱性磷酸酶(SEAP)、荧光蛋白家族诸如绿色荧光蛋白(GFP)、蓝色荧光蛋白(BFP)、增强型GFP(EGFP)和去稳定EGFP、红色荧光蛋白(RFP)中的一种以上。5.如权利要求1或2所述的试剂盒，其中所述报告基因的靶启动子包括NFAT启动子、IL2启动子、PGK启动子、SV40启动子、GPC3启动子中的至少一种。6.如权利要求1或2所述的试剂盒，其中，所述微珠为磁珠，优选为超顺磁珠，优选地，所述免疫细胞和微珠的个数比例范围为100∶1至1∶100。7.如权利要求1或2所述的试剂盒，其中，所述TIM-3抗原或其功能片段为人源的，优选地，所述CD-3抗体为人源的，所述CD-28抗体为人源的。8.一种检测TIM-3抗体活性的方法，其包括以下步骤：a)将免疫细胞和微珠接触，其中，所述免疫细胞的细胞表...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘隽，聂思惟，吴琼，刘静静，万雅莉，郭新东，郑勇，李竞，
申请(专利权)人：上海药明生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31