一种氧化酶在水解植物甾醇的提纯方法技术

本发明专利技术公开了一种氧化酶在水解植物甾醇的提纯方法，它涉及植物甾醇技术领域；它包括如下步骤：水解：将植物油移入水解釜内，加入硫酸、磺酸和水，然后回流1‑4小时；脱臭馏出物：将水解的植物油进行脱臭馏出物，脱臭馏出物发生甲酯化反应，真空脱水，然后将甘油三酯水解成脂肪酸和甘油；加入甲酯化试剂后，分离甾醇，收集滤液；酶催化酯化；脱溶；真空蒸馏；甾醇和VE；分离；废物造粒；本发明专利技术能实现在酯化前进行水解，提高提纯效率，其提纯率能达到99.3‑99.8％，与现有工艺相对比能节省1‑3小时；便于有效的保护环境，再提纯后能实现废物造粒，回收废物，不易造成污染；同时在生产时废水较少，有利于生产。

Purification of Hydrolysis Phytosterol by an Oxygenase

【技术实现步骤摘要】
一种氧化酶在水解植物甾醇的提纯方法
本专利技术属于植物甾醇
，具体涉及一种氧化酶在水解植物甾醇的提纯方法。
技术介绍
植物油是植物甾醇含量较为丰富的食品之一，而其中玉米油中的植物甾醇含量较高。植物甾醇分为4-无甲基甾醇、4-甲基甾醇和4，4'-二甲基甾醇三类，无甲基甾醇主要有B-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇和菜籽甾醇等，主要存在于植物的种子中，植物甾醇的结构与动物性甾醇的结构基本相似，唯一不同之处是c-4位所连甲基数目及c-11位侧链的差异，正是这些侧链上的微小不同致使其具有不同生理功能。植物甾醇是从玉米、大豆中经过物理提纯而得，具有营养价值高、生理活性强等特点。植物甾醇可通过降低胆固醇减少心血管病的风险。其广泛应用在食品、医药、化妆品、动物生长剂及纸张加工、印刷、纺织等领域，特别是在欧洲作为食品添加剂非常普遍，广泛用于食品中以降低人体胆固醇。植物甾醇用于预防治疗冠状动脉粥样硬化类的心脏病，对治疗溃疡、皮肤鳞癌、宫颈癌等有明显的疗效；此外，植物甾醇还是重要的甾体药物和维生素D3的生产原料。植物甾醇具有良好的抗氧性，可作食品添加剂(抗氧化剂、营养添加剂)；也可作为动物生长剂原料，促进动物生长，增进动物健康。而现有的植物甾醇在植物油中进行提纯时，其提纯工艺存在如下缺点：一、在酶催化酯化时反应速度慢，二、且溶液中出现大量的杂质，不易将杂质分离出来，三、后期提纯效率低，且浪费时间。
技术实现思路
为解决现有提纯方法在提纯时进行酶催化酯化时反应速度慢，且溶液中出现大量的杂质，不易将杂质分离，后期提纯效率低，且浪费时间；本专利技术的目的在于提供一种氧化酶在水解植物甾醇的提纯方法，便于有效的保护环境，再提纯后能实现废物造粒，回收废物，不易造成污染；同时在生产时废水较少，废水量与现有工艺相对比少50-60％，有利于生产，同时节省时间，提高了效率。本专利技术的一种氧化酶在水解植物甾醇的提纯方法，它包括如下步骤：一种氧化酶在水解植物甾醇的提纯方法，其特征在于：它包括如下步骤：1)水解：将植物油移入水解釜内，然后加入硫酸、磺酸和水，其中植物油、硫酸、磺酸和水的用量比例为15-18:2-4:1-3:8-10，然后回流1-4小时；2)脱臭馏出物：将步骤1)中水解的植物油进行脱臭馏出物，脱臭馏出物发生甲酯化反应，真空脱水，然后将甘油三酯水解成脂肪酸和甘油；加入甲酯化试剂后，分离甾醇，收集滤液；3)酶催化酯化：将步骤2)中滤液内滴加氧化酶，氧化酶与滤液的容积比例为1:30-50；然后静置沉淀0.5-1小时，收集底部沉淀物，收集时将上层液体通过滤网过滤后，直接收集沉淀物；4)脱溶：将步骤3)中的沉淀物进行脱溶备用，脱溶后得到的溶液与步骤3)中的溶液混合后进行真空蒸馏；5)真空蒸馏：将步骤4)中的混合溶液通过薄膜蒸发处理，并进行抽真空处理，然后依次分离甲酯和天然维生素E，收集重相；6)提取甾醇和天然维生素E：将步骤5)中的重相进行短程蒸馏处理，分离收集甾醇酯；7)分离：将步骤6)中的甾醇酯与甲醇进行酯交换反应，并通过结晶方式得到甾醇；8)废物造粒：将提纯甾醇收集，将废渣与沉淀物混合后进行破碎，然后经过造粒机进行造粒回收。所述步骤1)中回流时需要加热到110-120℃。所述步骤3)中收集底部沉淀物为通过二次过滤的方式进行收集。所述步骤4)中的脱溶为将沉淀物滴加有机溶剂后进行脱溶，沉淀物与有机溶剂的用量比例为10:1-3。所述步骤7)中在结晶之前需要进行调节PH值与水洗，PH值为6即可，而水洗次数为2-4次，水洗至无杂质即可。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：1、能实现在酯化前进行水解，水解之后在进行酯化能够实现节省原料，且提高提纯效率，其提纯率能达到99.3-99.8％，与现有工艺相对比能节省1-3小时；2、便于有效的保护环境，再提纯后能实现废物造粒，回收废物，不易造成污染；3、同时在生产时废水较少，废水量与现有工艺相对比少50-60％，有利于生产。具体实施方式本具体实施方式采用以下技术方案：它包括如下步骤：水解→脱臭馏出物→酶催化酯化→脱溶→真空蒸馏→甾醇和VE→分离→废物造粒。实施例一：一种氧化酶在水解植物甾醇的提纯方法，它包括如下步骤：首先进行水解：将植物油50g移入水解釜内，然后加入硫酸、磺酸和水，其中植物油、硫酸、磺酸和水的用量比例为15:4:1:80，然后回流2小时，回流温度为110℃；另外在回流后进行脱臭馏出物：将水解的植物油进行脱臭馏出物，脱臭馏出物发生甲酯化反应，真空脱水，然后将甘油三酯水解成脂肪酸和甘油；加入甲酯化试剂后，分离甾醇，收集滤液；其次进行酶催化酯化：将上述滤液内滴加氧化酶，然后静置沉淀0.5小时，收集底部沉淀物；然后进行脱溶：将沉淀物进行脱溶，脱溶为将沉淀物滴加有机溶剂后进行脱溶；脱溶的溶液与酶催化酯化的溶液混合；混合比例为1.3:3，另外进行真空蒸馏：将上述混合溶液通过薄膜蒸发处理，并进行抽真空处理，然后依次分离甲酯和天然VE，收集重相；另外进行提取甾醇和天然VE：将上述的重相进行短程蒸馏处理，分离收集甾醇酯；另外在分离时，甾醇酯与甲醇进行酯交换反应，并通过结晶方式得到甾醇；最后进行废物造粒：将提纯甾醇收集，将废渣与沉淀物混合后进行破碎，然后经过造粒机进行造粒回收。上述提纯工艺的提纯率为99.3％，且产生的废水比现有工艺的废水少50％。实施例二：一种氧化酶在水解植物甾醇的提纯方法，它包括如下步骤：首先进行水解：将植物油60g移入水解釜内，然后加入硫酸、磺酸和水，其中植物油、硫酸、磺酸和水的用量比例为16:2:1:90，然后回流2.5小时，回流温度为120℃；另外在回流后进行脱臭馏出物：将水解的植物油进行脱臭馏出物，脱臭馏出物发生甲酯化反应，真空脱水，然后将甘油三酯水解成脂肪酸和甘油；加入甲酯化试剂后，分离甾醇，收集滤液；其次进行酶催化酯化：将上述滤液内滴加氧化酶，然后静置沉淀0.8小时，收集底部沉淀物；然后进行脱溶：将沉淀物进行脱溶，脱溶为将沉淀物滴加有机溶剂后进行脱溶；脱溶的溶液与酶催化酯化的溶液混合；混合比例为1.5:3，另外进行真空蒸馏：将上述混合溶液通过薄膜蒸发处理，并进行抽真空处理，然后依次分离甲酯和天然VE，收集重相；另外进行提取甾醇和天然VE：将上述的重相进行短程蒸馏处理，分离收集甾醇酯；另外在分离时，甾醇酯与甲醇进行酯交换反应，并通过结晶方式得到甾醇；最后进行废物造粒：将提纯甾醇收集，将废渣与沉淀物混合后进行破碎，然后经过造粒机进行造粒回收。上述提纯工艺的提纯率为99.6％，且产生的废水比现有工艺的废水少55％。实施例三：一种氧化酶在水解植物甾醇的提纯方法，它包括如下步骤：首先进行水解：将植物油60g移入水解釜内，然后加入硫酸、磺酸和水，其中植物油、硫酸、磺酸和水的用量比例为18:3:2:100，然后回流3小时，回流温度为120℃；另外在回流后进行脱臭馏出物：将水解的植物油进行脱臭馏出物，脱臭馏出物发生甲酯化反应，真空脱水，然后将甘油三酯水解成脂肪酸和甘油；加入甲酯化试剂后，分离甾醇，收集滤液；其次进行酶催化酯化：将上述滤液内滴加氧化酶，然后静置沉淀1小时，收集底部沉淀物；然后进行脱溶：将沉淀物进行脱溶，脱溶为将沉淀物滴加有机溶剂后进行脱溶；脱溶的溶液与酶催化酯化的溶液混合；混合比例为本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种氧化酶在水解植物甾醇的提纯方法，其特征在于：它包括如下步骤：1)水解：将植物油移入水解釜内，然后加入硫酸、磺酸和水，其中植物油、硫酸、磺酸和水的用量比例为15‑18:2‑4:1‑3:8‑10，然后回流1‑4小时；2)脱臭馏出物：将步骤1)中水解的植物油进行脱臭馏出物，脱臭馏出物发生甲酯化反应，真空脱水，然后将甘油三酯水解成脂肪酸和甘油；加入甲酯化试剂后，分离甾醇，收集滤液；3)酶催化酯化：将步骤2)中滤液内滴加氧化酶，氧化酶与滤液的容积比例为1:30‑50；然后静置沉淀0.5‑1小时，收集底部沉淀物，收集时将上层液体通过滤网过滤后，直接收集沉淀物；4)脱溶：将步骤3)中的沉淀物进行脱溶备用，脱溶后得到的溶液与步骤3)中的溶液混合后进行真空蒸馏；5)真空蒸馏：将步骤4)中的混合溶液通过薄膜蒸发处理，并进行抽真空处理，然后依次分离甲酯和天然维生素E，收集重相；6)提取甾醇和天然维生素E：将步骤5)中的重相进行短程蒸馏处理，分离收集甾醇酯；7)分离：将步骤6)中的甾醇酯与甲醇进行酯交换反应，并通过结晶方式得到甾醇；8)废物造粒：将提纯甾醇收集，将废渣与沉淀物混合后进行破碎，然后经过造粒机进行造粒回收。...

【技术特征摘要】
1.一种氧化酶在水解植物甾醇的提纯方法，其特征在于：它包括如下步骤：1)水解：将植物油移入水解釜内，然后加入硫酸、磺酸和水，其中植物油、硫酸、磺酸和水的用量比例为15-18:2-4:1-3:8-10，然后回流1-4小时；2)脱臭馏出物：将步骤1)中水解的植物油进行脱臭馏出物，脱臭馏出物发生甲酯化反应，真空脱水，然后将甘油三酯水解成脂肪酸和甘油；加入甲酯化试剂后，分离甾醇，收集滤液；3)酶催化酯化：将步骤2)中滤液内滴加氧化酶，氧化酶与滤液的容积比例为1:30-50；然后静置沉淀0.5-1小时，收集底部沉淀物，收集时将上层液体通过滤网过滤后，直接收集沉淀物；4)脱溶：将步骤3)中的沉淀物进行脱溶备用，脱溶后得到的溶液与步骤3)中的溶液混合后进行真空蒸馏；5)真空蒸馏：将步骤4)中的混合溶液通过薄膜蒸发处理，并进行抽真空处理，然后依次分离甲酯和天然维生素E，收集重相；6)提取甾醇和天然维生素E：将步...

【专利技术属性】
技术研发人员：王友富，王荣，王炳乾，王洪福，邵振平，雷灵芝，黄橙橙，王瑞，陈克纲，应杨波，
申请(专利权)人：浙江神洲药业有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33