一种基于CD19和CD70的双重嵌合抗原受体基因修饰的免疫细胞及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种基于CD19和CD70的双重嵌合抗原受体基因修饰的免疫细胞及其应用，所述双重嵌合抗原受体包括嵌合抗原受体CD19和嵌合抗原受体CD70。所述嵌合抗原受体包括抗原结合结构域、跨膜结构域、共刺激信号传导区和CD3ζ信号传导结构域以及可诱导自杀融合结构域串联而成。本发明专利技术的嵌合抗原受体能特异性的识别肿瘤表面抗原CD19和CD70，相比于使用其他单一嵌合抗原受体T细胞，联合使用两种抗原靶向CAR‑T细胞使得治疗效果更好，不易发生CD19逃逸，更容易缓解疾病。

An Immune Cell Modified by Double Chimeric Antigen Receptor Gene Based on CD19 and CD70 and Its Application

The invention relates to an immune cell modified by a double chimeric antigen receptor gene based on CD19 and CD70 and its application. The double chimeric antigen receptor includes a chimeric antigen receptor CD19 and a chimeric antigen receptor CD70. The chimeric antigen receptor includes antigen binding domain, transmembrane domain, costimulatory signal transduction domain and CD3 signal transduction domain, and inducible suicide fusion domain. The chimeric antigen receptor of the present invention can specifically recognize the tumor surface antigens CD19 and CD70. Compared with other single chimeric antigen receptor T cells, the combination of two antigens targeting CAR T cells has better therapeutic effect, is not easy to escape CD19, and is easier to alleviate diseases.

【技术实现步骤摘要】
一种基于CD19和CD70的双重嵌合抗原受体基因修饰的免疫细胞及其应用
本专利技术涉及肿瘤的细胞免疫治疗领域，尤其涉及一种基于CD19和CD70的双重嵌合抗原受体基因修饰的免疫细胞及其应用，具体为以肿瘤特异靶点CD19和CD70为基础的嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞技术的构建方法及其在抗肿瘤治疗中的应用。
技术介绍
随着肿瘤免疫学理论和临床技术的发展，嵌合抗原受体T细胞疗法(ChimericantigenreceptorT-cellimmunotherapy，CAR-T)成为目前最有发展前景的肿瘤免疫疗法之一。一般，嵌合抗原受体CAR由一个肿瘤相关抗原结合区、胞外铰链区、跨膜区域以及胞内信号转导区组成。通常，CAR包含抗体的单链片段可变(Singlechainfragmentvariable，scFv)区或对肿瘤相关抗原(tumorassociatedantigen,TAA)具有特异性的结合结构域，其通过铰链和跨膜区与T细胞信号传导分子的胞质结构域偶联。最常见的淋巴细胞活化部分包括与T细胞效应物功能触发(例如CD3ζ)部分串联的T细胞共刺激结构域。CAR介导的过继性免疫疗法允许CA本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于CD19和CD70的双重嵌合抗原受体基因修饰的免疫细胞，其特征在于，所述双重嵌合抗原受体包括嵌合抗原受体CD19和嵌合抗原受体CD70。

【技术特征摘要】
1.一种基于CD19和CD70的双重嵌合抗原受体基因修饰的免疫细胞，其特征在于，所述双重嵌合抗原受体包括嵌合抗原受体CD19和嵌合抗原受体CD70。2.根据权利要求1所述的免疫细胞，其特征在于，所述嵌合抗原受体包括抗原结合结构域、跨膜结构域、共刺激信号传导区、CD3ζ信号传导结构域和可诱导自杀融合结构域串联而成；优选地，所述抗原结合结构域为针对肿瘤表面抗原CD19的单链抗体和针对肿瘤表面抗原CD70的单链抗体。3.根据权利要求1或2所述的免疫细胞，其特征在于，所述针对肿瘤表面抗原CD19的单链抗体的氨基酸序列具有(I)、(II)或(III)所示的氨基酸序列中的任意一个：(I)具有如SEQIDNO.1所示的氨基酸序列；(II)与SEQIDNO.1所示氨基酸序列具有≥90％，优选≥95％，更优选≥98％，最优选≥99％同源性的氨基酸序列；(III)与SEQIDNO.1所示的氨基酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或几个氨基酸获得的氨基酸序列；所述氨基酸序列具有针对肿瘤表面抗原CD19的单链抗体的活性；优选地，所述针对肿瘤表面抗原CD70的单链抗体的氨基酸序列具有(I)、(II)或(III)所示的氨基酸序列中的任意一个：(I)具有如SEQIDNO.2所示的氨基酸序列；(II)与SEQIDNO.2所示氨基酸序列具有≥90％，优选≥95％，更优选≥98％，最优选≥99％同源性的氨基酸序列；(III)与SEQIDNO.2所示的氨基酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或几个氨基酸获得的氨基酸序列；所述氨基酸序列具有针对肿瘤表面抗原CD70的单链抗体的活性。4.根据权利要求1-3中任一项所述的免疫细胞，其特征在于，所述跨膜结构域为CD28跨膜结构域和/或CD8α跨膜结构域；优选地，所述共刺激信号传导区为CD28信号传导结构域、CD27信号传导结构域或CD137信号传导结构域中的任意一种或至少两种的组合；优选地，所述可诱导自杀融合结构域为包含胱天蛋白酶9结构域；优选地，所述胱天蛋白酶9结构域的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示；优选地，所述可诱导自杀融合结构域通过2A序列与CD3ζ信号传导结构域相串联。5.根据权利要求1-4中任一项所述的免疫细胞，其特征在于，所述嵌合抗原受体包括信号肽、抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：王佳兴，
申请(专利权)人：北京美康基免生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11