一种测定循环肿瘤细胞的电致化学发光免疫传感器及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种测定循环肿瘤细胞的电致化学发光免疫传感器及其制备方法与应用，包括磁性ECL探针Fe3O4@SiO2/AuNPs/WS2‑Aptamer，以及循环肿瘤细胞抗体进行表面结合的基底电极，所述基底电极表面采用Nafion/AuNPs/Ru(bpy)3

An electrochemiluminescent immunosensor for detecting circulating tumor cells and its preparation method and Application

The invention discloses an electrochemiluminescent immunosensor for detecting circulating tumor cells and its preparation method and application, including a magnetic ECL probe Fe3O4@SiO 2/AuNPs/WS2_Aptamer and a base electrode for surface binding of circulating tumor cell antibodies. The base electrode surface adopts Nafion/AuNPs/Ru(bpy)3.

【技术实现步骤摘要】
一种测定循环肿瘤细胞的电致化学发光免疫传感器及其制备方法与应用
本专利技术属于生物医学检测，具体涉及一种测定循环肿瘤细胞的电致化学发光免疫传感器及其制备方法与应用。
技术介绍
循环肿瘤细胞(CTCs)是指恶性肿瘤在发展过程中播散并存活于外周血中的肿瘤细胞，与肿瘤的转移和预后密切相关。循环肿瘤细胞的数量可以用作癌症患者的治疗效果的评估指标。如果治疗后血液中肿瘤细胞的数量减少，则治疗效果良好。如果数量增加，最好改变治疗方案或停止治疗，特别是化疗。许多患者难以耐受副作用。如果通过这种方法预先预测治疗的效果，患者可以遭受更少的痛苦。循环肿瘤细胞检测是指对肿瘤患者外周血中的循环肿瘤细胞进行分析的方法，有助于肿瘤转移患者的诊断、监测术后患者肿瘤的复发与转移、评估抗肿瘤药物的敏感性与患者预后以及选择个体化治疗的策略。从CTCs的发现到检测和临床应用进展一直不太理想。直到上个世纪末，特别是本世纪初，随着分子生物学和计算机技术的发展，CTCs免疫标记技术和分子生物学技术的迅速发展，CTCs的分离和分析与鉴定技术得到了迅速发展，为恶性肿瘤的早期检测提供了相应的方法。然而目前方法大多需要大型设备或者高精密本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定循环肿瘤细胞的电致化学发光免疫传感器，其特征在于，包括磁性ECL探针Fe3O4@SiO2/AuNPs/WS2‑Aptamer，以及循环肿瘤细胞抗体进行表面结合的基底电极，所述基底电极表面采用Nafion/AuNPs/Ru(bpy)3

【技术特征摘要】
1.一种测定循环肿瘤细胞的电致化学发光免疫传感器，其特征在于，包括磁性ECL探针Fe3O4@SiO2/AuNPs/WS2-Aptamer，以及循环肿瘤细胞抗体进行表面结合的基底电极，所述基底电极表面采用Nafion/AuNPs/Ru(bpy)32+溶液进行修饰。2.根据权利要求1所述的测定循环肿瘤细胞的电致化学发光免疫传感器，其特征在于，所述磁性ECL探针Fe3O4@SiO2/AuNPs/WS2-Aptamer采用如下方法制备：(1)称取氯化铁和柠檬酸三钠加入到乙二醇中，放于磁力搅拌器上搅拌溶解，随后在搅拌状态下向其中加入适量乙酸钠，待完全溶解，搅拌10～50min，转入高温高压反应釜中于100～250℃，反应2～24h，待反应完成后取出冷却至室温，离心分离清洗，得到Fe3O4纳米粒子；(2)将制备好的Fe3O4纳米粒子溶解到乙醇水溶液中，向其中加入适量甲醛溶液和间苯二酚，在10～60℃下机械搅拌2～20h，然后升温至10～200℃获得f-Fe3O4复合纳米材料；取适量上述制备的材料溶解在含有十六烷基三甲基溴化铵的氨水溶液中，10～60min内滴加入正硅酸乙酯，在4～60℃下机械搅拌2～20h，获得Fe3O4@SiO2；用3-氨丙基三乙氧基硅烷对其氨基化后加入适量纳米金溶液，4～60℃下搅拌1～20h，得到Fe3O4@SiO2/AuNPs复合材料；(3)将上述复合材料加入到浓度为0.1～10mg/ml的二硫化钨量子点溶液中，4～60℃下搅拌1～20h，得到Fe3O4@SiO2/AuNPs/WS2；(4)先用EDC/NHS对Fe3O4@SiO2/AuNPs/WS2进行活化处理，再将细胞适体溶液加入其中，黑暗条件下于4～60℃搅拌反应1～20h，然后加入BSA溶液室温搅拌反应1～5h，离心并重悬于PBS溶液中得到Fe3O4@SiO2/AuNPs/WS2-Aptamer溶液。3.根据权利要求2所述的测定循环肿瘤细胞的电致化学发光免疫传感器，其特征在于，步骤(1)中，所述氯化铁、柠檬酸三钠和乙酸钠的质量比为(1:1:1)～(4:1:10)。4.根据权利要求2所述的测定循环肿瘤细胞的电致化学发光免疫传感器，其特征在于，步骤(2)中，所述Fe3O4纳米粒子、甲醛、间苯二酚的质量比为(1:1:1)～(4:1:10)；所述f-Fe3O4...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈艳飞，潘登，吉格儿，薛怀佳，张越，张袁健，
申请(专利权)人：东南大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32