一种HIFU生物靶向增效剂及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种HIFU生物靶向增效剂及其制备方法，具体是将双歧杆菌和HIFU增效剂结合而成。双歧杆菌是一种对人体健康有益的益生菌，生物安全性高，且其专性厌氧特性可以靶向肿瘤乏氧区，并在其内进行定向增殖，有抗肿瘤的作用。本发明专利技术的HIFU生物靶向增效剂可以更精准地靶向肿瘤组织，并能够提高HIFU能量沉积，延长停留时间，进而达到提高HIFU靶向消融肿瘤的目的。

A HIFU Biotargeting Synergist and Its Preparation Method

The invention provides a HIFU biological targeting synergist and a preparation method thereof, in particular combining Bifidobacterium and HIFU synergist. Bifidobacterium is a kind of probiotics beneficial to human health. It has high biological safety and specific anaerobic characteristics. Bifidobacterium can target the hypoxic zone of tumors and proliferate directionally in it. Bifidobacterium has anti-tumor effect. The HIFU Bio-Targeting synergist of the invention can target the tumor tissue more accurately, and can improve the energy deposition of HIFU, prolong the residence time, thereby achieving the goal of improving the target ablation of HIFU.

【技术实现步骤摘要】
一种HIFU生物靶向增效剂及其制备方法
本专利技术涉及HIFU领域，特别是涉及一种HIFU生物靶向增效剂及其制备方法。
技术介绍
近年来，HIFU(HighIintensityFocusedUltrasound，高强度聚焦超声)作为一种新型的微无创治疗方法，已广泛应用于临床肿瘤治疗。HIFU是利用超声的方向性、穿透性和可聚焦性，将体外发射的超声波聚焦在靶组织，通过超声的热效应、空化效应、机械效应，在焦点区域产生瞬态高温，使靶组织发生不可逆的凝固性坏死。其显著特点是对靶区组织起直接杀伤破坏作用而不损伤周围正常组织，是一种非侵入性治疗恶性实体肿瘤的新技术。但实际临床工作中，HIFU技术仍然存在能量衰减、靶区能量沉积少、停留时间短及靶向性不强等缺点。如何更好地提高HIFU的治疗作用，是一直在探索的问题。目前，通过改变靶区组织的声环境以提高HIFU的治疗效率成为国内外学者的研究热点。碘油、微泡造影剂等增效剂在提高HIFU疗效中的作用得到广泛认可，但仍存在靶区停留时间较短、易损伤周边正常组织等问题。
技术实现思路
鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种HIFU生物靶向增效剂及其制备方法，用于提高HIFU生物靶向治疗效果。为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术第一方面提供一种HIFU生物靶向增效剂，包括双歧杆菌以及与其连接的HIFU增效剂。可选地，所述HIFU增效剂选自阳离子脂质微球、PLGA微球(Poly(lactic-co-glycolic)acid，聚乳酸-羟基乙酸共聚物)中的至少一种。可选地，所述双歧杆菌选自长双歧杆菌ATCC15707，当然，不限于上述株系，其他株系也适用于本专利技术。本专利技术第二方面提供上述HIFU生物靶向增效剂的制备方法，包括制备所述HIFU增效剂，然后将其与双歧杆菌连接，得到所述HIFU生物靶向增效剂。可选地，连接方法选自静电吸附法、化学键连接法中的至少一种。可选地，所述HIFU增效剂为阳离子脂质微球时，采用静电吸附法进行连接。可选地，先制备所述阳离子脂质微球，再将所述阳离子脂质微球与所述双歧杆菌共孵育，获得连接有阳离子脂质微球的双歧杆菌。可选地，制备阳离子脂质微球时，采用的原料包括脂质原料、溶剂。可选地，所述脂质原料包括磷脂酰胆碱(DPPC)、1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-PEG-胺(DSPE-PEG2000-胺)、DC-胆固醇。可选地，按质量计，脂酰胆碱：1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-PEG-胺：DC-胆固醇＝5：2：2。可选地，所述溶剂包括三氯甲烷、全氟己烷。可选地，先将脂质原料与第一溶剂混合，然后去除第一溶剂，形成脂质膜，将所得脂质膜与水混合进行水合反应，形成悬浮液，加入第二溶剂，乳化处理，制得所述阳离子脂质微球。可选地，所述第一溶剂选自三氯甲烷。可选地，所述第二溶剂选自全氟己烷。可选地，通过旋转蒸发的方式去除第一溶剂。可选地，采用超声波对加有所述第二溶剂的悬浮液进行乳化处理。可选地，所述HIFU增效剂为PLGA微球时，采用化学键连接法进行连接。可选地，先制备表面带有活化羧基的PLGA微球，再将所述PLGA微球与所述双歧杆菌共孵育，获得连接有所述PLGA微球的双歧杆菌。可选地，制备所述PLGA微球时，包括先制备表面带羧基的PLGA微球，然后进行羧基活化处理，制得表面带有活化羧基的PLGA微球。可选地，采用的原料包括PLGACOOH、溶剂、羧基活化剂。可选地，所述溶剂包括三氯甲烷。可选地，所述羧基活化剂包括碳二亚胺(EDC)、sulfo-NHS(N-羟基硫代琥珀酰亚胺)。可选地，按摩尔量计，碳二亚胺：sulfo-NHS：表面带羧基的PLGA微球＝30∶30∶1。可选地，先将PLGACOOH溶于所述溶剂中，得到初乳，然后，将所述初乳与PVA水溶液混合，得到复乳，再加入异丙醇水溶液，制得表面带羧基的PLGA微球。可选地，所述PVA水溶液的质量浓度为4％。可选地，所述异丙醇水溶液的质量浓度为2％。可选地，活化时，将羧基活化剂、表面带羧基的PLGA微球、MES缓冲液混合，制得表面带有活化羧基的PLGA微球。可选地，所述MES缓冲液的pH为5.5。本专利技术第三方面提供上述HIFU生物靶向增效剂在制备高强度聚焦超声治疗药物中的应用。如上所述，本专利技术的一种HIFU生物靶向增效剂及其制备方法，具有以下有益效果：本专利技术公开了一种高强度聚焦超声(highintensityfocusedultrasound,HIFU)生物(双歧杆菌)靶向增效剂及其制备方法，具体是将双歧杆菌和HIFU增效剂结合而成。双歧杆菌是一种对人体健康有益的益生菌，生物安全性高，且其专性厌氧特性可以靶向肿瘤乏氧区，并在其内进行定向增殖，有抗肿瘤的作用。HIFU增效剂可以提高HIFU能量沉积。本专利技术将双歧杆菌与HIFU增效剂通过静电吸附法、共价键结合法进行连接，制得的HIFU生物靶向增效剂可以更精准地靶向肿瘤组织，并能够提高HIFU能量沉积，延长停留时间，进而达到提高HIFU靶向消融肿瘤的目的。附图说明图1-1显示为本专利技术实施例1中阳离子脂质纳米粒的粒径分布图。图1-2显示为本专利技术实施例1中阳离子脂质纳米粒的电位分布图。图1-3显示为本专利技术实施例1中双歧杆菌与阳离子脂质纳米粒的体外连接图。图1-4的左图为本专利技术实施例1中PBS组荷MDA-MB231瘤鼠肿瘤组织的革兰氏染色图(×400)，右图为本专利技术实施例1中双歧杆菌组荷瘤鼠肿瘤组织的革兰氏染色图(×400)。图1-5显示为本专利技术实施例1中HIFU辐照后各组肿瘤组织的凝固性坏死体积对比图。图2-1显示为本专利技术实施例2中双歧杆菌与PLGA微球结合的激光共聚焦显微图。图2-2显示为本专利技术实施例2中干燥24小时后的PLGA微球-双歧杆菌原子力显微图。图2-3显示为本专利技术实施例2中的荧光成像图。图2-4显示为本专利技术实施例2中的肿瘤体积变化图。具体实施方式以下通过特定的具体实例说明本专利技术的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本专利技术的其他优点与功效。本专利技术还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本专利技术的精神下进行各种修饰或改变。新型HIFU造影剂(增效剂)的研究不仅要考虑靶向浓聚问题，同时还要兼顾生物的安全性和治疗的有效性。双歧杆菌是一种存在于人体内的益生菌，已成为人体健康的重要指标之一。作为微生态制剂，其对机体有营养、拮抗、通便、增强免疫力，抗肿瘤，抗衰老等多种益生功能，双歧杆菌的生物安全性和肿瘤靶向性已得到证实。病理学证实，绝大多数实体瘤因肿瘤实质细胞增生迅速，而血管形成相当缓慢，造成实体瘤内部大面积缺氧，肿瘤组织的中心区域出现大片的坏死区域。而双歧杆菌的专性厌氧特性,使其入血后能够特异性地向肿瘤组织的坏死区集中和繁殖,表现出对实体瘤的靶向性。利用这一特性，我们将双歧杆菌与HIFU增效剂以不同方式结合，真正达到HIFU靶向治疗肿瘤的目的。以下实施例采用长双歧杆菌ATCC15707进行实验。实施例1静电吸附法制备阳离子脂质微球-双歧杆菌1、阳离子脂质微球的制备及表征将一定质量的脂质(脂质原料购自AvantiPolarLipids,Inc,Alabaster,AL,本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种HIFU生物靶向增效剂，其特征在于：包括双歧杆菌以及与其连接的HIFU增效剂。

【技术特征摘要】
1.一种HIFU生物靶向增效剂，其特征在于：包括双歧杆菌以及与其连接的HIFU增效剂。2.根据权利要求1所述的HIFU生物靶向增效剂，其特征在于：所述HIFU增效剂选自阳离子脂质微球、PLGA微球中的至少一种；和/或，所述双歧杆菌选自长双歧杆菌ATCC15707。3.根据权利要求1-2任意一项所述HIFU生物靶向增效剂的制备方法，包括制备所述HIFU增效剂，然后将其与双歧杆菌连接，得到所述HIFU生物靶向增效剂。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述HIFU增效剂为阳离子脂质微球时，采用静电吸附法进行连接，优选地，先制备所述阳离子脂质微球，再将所述阳离子脂质微球与所述双歧杆菌共孵育，获得连接有阳离子脂质微球的双歧杆菌，更优选地，制备所述阳离子脂质微球时，采用的原料包括脂质原料、溶剂，所述溶剂包括三氯甲烷、全氟己烷，更优选地，所述脂质原料包括磷脂酰胆碱(DPPC)、1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-PEG-胺(DSPE-PEG2000-胺)、DC-胆固醇，优选地，按质量计，脂酰胆碱：1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-PEG-胺：DC-胆固醇＝5：2：2。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：先将脂质原料与第一溶剂混合，然后去除第一溶剂，形成脂质膜，将所得脂质膜与水混合进行水合反应，形成悬浮液，加入第二溶剂，乳化处理，制得所述阳离子脂质微球。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，还包括如下特征中的任一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹建中，杜永洪，罗勇，熊洁，徐蝶，蒋冰蕾，高悬，杨海燕，
申请(专利权)人：重庆医科大学，
类型：发明
国别省市：重庆,50