靶向肺癌基因的多功能纳米药物递送载体及制备和应用制造技术

本发明专利技术提出一种靶向肺癌基因的多功能纳米药物递送载体及制备和应用，所述纳米药物递送载体包括纳米金三角片，纳米金三角片的表面依次连接复合物聚(4‑苯乙烯磺酸钠)和聚(二烯丙基二甲基氯化铵)形成纳米金三角片复合物；靶向肺癌基因的siRNA纳米药物吸附连接纳米金三角片复合物。本发明专利技术将siRNA纳米药物与GNPs/PSS/PDADMAC相连接，从而得到既具有靶向性，也具有光热治疗、免疫治疗双重作用的多功能纳米药物递送载体。

Multifunctional nanodrug delivery vector targeting lung cancer gene and its preparation and Application

The invention provides a multi-functional nano-drug delivery carrier targeting lung cancer gene and its preparation and application. The nano-drug delivery carrier includes nano-gold triangle tablets, the surface of nano-gold triangle tablets is sequentially connected with complex poly (sodium styrene sulfonate) and poly (diallyl dimethyl ammonium chloride) to form nano-gold triangle tablet complex, and siRNA nano-drug adsorptive conjugation targeting lung cancer gene. Admission of Mijin triangle complex. The invention connects the siRNA nanomedicine with GNPs/PSS/PDADMAC, and obtains a multifunctional nanomedicine delivery carrier with not only targeting, but also dual functions of photothermal therapy and immunotherapy.

【技术实现步骤摘要】
靶向肺癌基因的多功能纳米药物递送载体及制备和应用
本专利技术涉及生物医药、光热治疗、免疫治疗、肿瘤治疗领域，具体地，涉及一种靶向肺癌基因的纳米药物递送载体的制备和应用。
技术介绍
目前全球公认的癌症治疗手段通常包括手术、化疗、放疗以及免疫治疗，但因为肿瘤的差异性很大，这些手段仍然面临着严峻挑战，因为它们不足以有效的靶向癌症部位，不能彻底清除癌细胞，尤其是对晚期癌症患者。因此，越来越多的研究关注于提升对肿瘤的靶向性以及进行多种叠加治疗。光热治疗(PTT)对治疗各种癌症有很大的希望，这种疗法利用近红外激光照射肿瘤部位，通过引起肿瘤部位产生高温，从而杀伤肿瘤细胞，起到癌症治疗的作用。传统的纳米药物载体递送系统靶向性较差，而且不具有光热效应。为了能有利于治疗各种癌症，急需开发一种具有靶向性，同时具有光热治疗、免疫治疗双重作用的多功能纳米药物递送载体。
技术实现思路
本专利技术的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种靶向肺癌基因的多功能纳米药物递送载体及制备和应用，将siRNA纳米药物与GNPs/PSS/PDADMAC相连接，从而得到既具有靶向性，也具有光热治疗、免疫治疗双重作用的多功能纳米药物递送载体。根据本专利技术第一方面，提供一种靶向肺癌基因的多功能纳米药物递送载体，所述纳米药物递送载体包括纳米金三角片，所述纳米金三角片的表面先连接复合物聚(4-苯乙烯磺酸钠)(PSS)，形成纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)复合物；再与所述纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)复合物上连接聚(二烯丙基二甲基氯化铵)(PDADMAC)形成纳米金三角片复合物，即纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)/聚(二烯丙基二甲基氯化铵)复合物(GNPs/PSS/PDADMAC)；靶向肺癌基因的siRNA纳米药物吸附连接所述纳米金三角片复合物，得到纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)/聚(二烯丙基二甲基氯化铵)-siRNA，即为靶向肺癌的多功能纳米药物递送载体。优选地，所述靶向肺癌基因的siRNA纳米药物为靶向人类肺癌PD-L1、EGFR、KRAS任一种基因的siRNA纳米药物。本专利技术将siRNA纳米药物与GNPs/PSS/PDADMAC相连接，从而得到即具有靶向性，也具有光热治疗、免疫治疗双重作用的多功能纳米药物递送载体。进一步为，通过静电吸附，将siRNA纳米药物吸附到GNPs/PSS/PDADMAC的表面，从而提高了荷载效率。根据本专利技术的第二方面，提供一种靶向肺癌基因的多功能纳米药物递送载体的制备方法，包括：S1：合成纳米金三角片：通过碘化钾或碘化钠以及抗坏血酸，将纳米金球蚀刻为纳米金三角片；S2：在所述纳米金三角片表面连接复合物聚(4-苯乙烯磺酸钠)，得到纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)复合物；S3：再将所述纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)复合物表面连接复合物聚(二烯丙基二甲基氯化铵)，得到所述纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)/聚(二烯丙基二甲基氯化铵)复合物；S4：将靶向肺癌基因的siRNA纳米药物与所述纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)/聚(二烯丙基二甲基氯化铵)通过静电吸附作用进行相连接，得到产物纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)/聚(二烯丙基二甲基氯化铵)-siRNA。上述制备中，在纳米金三角片表面先后连接上PSS、PDADMAC，提高了纳米金三角片在水溶液中的稳定性以及生物相容性。优选地，所述合成纳米金三角片，包括：将十六烷基三甲基氯化铵(CTAC)与去离子水混合，再加入四氯金酸、碘化钾(KI)或碘化钠(NaI)、氢氧化钠(NaOH)，再加入抗坏血酸(比如L-AA)，轻微混匀，溶液颜色变为无色，然后加入氢氧化钠终止还原反应，得到的沉淀即为纳米金三角片。上述步骤中：将纳米金球蚀刻为纳米金三角片，得到的纳米金三角片边长在40-120nm，形态均一，产量大于90％。优选地，所述在所述纳米金三角片表面连接复合物聚(4-苯乙烯磺酸钠)，包括：在制备的所述纳米金三角片溶液，加入聚(4-苯乙烯磺酸钠)溶液和氯化钠溶液发生反应，常温条件下搅拌反应物，反应完成进行离心分离，收集沉淀，所述沉淀冻干后得到所述纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)复合物。优选地，所述再将所述纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)复合物表面连接复合物聚(二烯丙基二甲基氯化铵)，包括：在制备的所述纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)复合物溶液中，加入聚(二烯丙基二甲基氯化铵)溶液和氯化钠溶液发生反应，常温条件下搅拌反应物，反应完成后进行离心分离，收集沉淀，将所述沉淀冻干后得到所述纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)/聚(二烯丙基二甲基氯化铵)复合物。优选地，所述将靶向肺癌基因的siRNA纳米药物与所述纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)/聚(二烯丙基二甲基氯化铵)通过静电吸附作用进行相连接，包括：在制备所述纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)/聚(二烯丙基二甲基氯化铵)复合物加入所述靶向肺癌基因的siRNA纳米药物，其中，所述纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)/聚(二烯丙基二甲基氯化铵)复合物和所述靶向肺癌的siRNA纳米药物的质量比例为5-8:1；混合后室温避光孵育，所述靶向肺癌基因的siRNA纳米药物将通过静电吸附于所述纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)/聚(二烯丙基二甲基氯化铵)复合物的表面，得到产物。优选地，GNPs/PSS/PDADMAC与siRNA的质量比例为：5-8:1。根据本专利技术的第三方面，提供一种靶向肺癌基因的多功能纳米药物递送载体的应用，其中：所述纳米药物递送载体应用于制备纳米金三角片的光热治疗或免疫治疗药物；或，所述纳米药物递送载体作为治疗肺癌基因的药物的应用。传统的纳米药物载体递送系统靶向性较差，而且不具有光热效应。本专利技术开发的基于纳米金三角片的多功能纳米药物递送载体，可实现肿瘤的靶向性，也可进行光热治疗和免疫治疗。比如，采用上述纳米药物递送载体制成的药物，可以用于治疗的肺癌肿瘤细胞为高表达PD-L1基因的肺癌肿瘤细胞的一种或多种；治疗时，所述纳米药物递送载体采用尾静脉注射方式注入，同时，在肿瘤部位采用近红外激光照射。通过siRNA纳米药物靶向性，主动靶向肺癌肿瘤细胞，进入肿瘤细胞后，敲除肿瘤细胞的PD-L1基因，招募免疫细胞进行肿瘤细胞的杀伤，同时，在近红外光的照射下引起光热效应，抑制肿瘤的生长。与现有技术相比，本专利技术具有如下的有益效果：本专利技术纳米药物递送载体可用于制备肿瘤治疗药物。与现有技术相比，本专利技术创新的将靶向肺癌基因的siRNA纳米药物与GNPs/PSS/PDADMAC相连接，从而得到既具有靶向性，也具有光热治疗、免疫治疗双重作用的多功能纳米药物递送载体。本专利技术的制备方法中，将纳米金球蚀刻为纳米金三角片，得到的纳米金三角片边长在40-120nm，形态均一，产量大于90％；通过在纳米金三角片表面先后连接上PSS、PDADMAC，提高纳米金三角片在水溶液中的稳定性以及生物相容性。进一步的，本专利技术实施例中合成的多功能纳米药物递送载体连接有PD-L1siRNA纳米药物，该纳米药物既可用于靶向肺癌基因，也可在进入肿瘤细胞后实现肿瘤细胞PD-L1基因的敲除，同时，该纳米药物载体中的纳米金三角片还具有光热治疗作用，从而实本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种靶向肺癌基因的多功能纳米药物递送载体，其特征在于，所述纳米药物递送载体包括纳米金三角片，所述纳米金三角片的表面连接复合物聚(4‑苯乙烯磺酸钠)，形成纳米金三角片/聚(4‑苯乙烯磺酸钠)复合物；再在所述纳米金三角片/聚(4‑苯乙烯磺酸钠)复合物上连接聚(二烯丙基二甲基氯化铵)形成纳米金三角片/聚(4‑苯乙烯磺酸钠)/聚(二烯丙基二甲基氯化铵)复合物即纳米金三角片复合物；靶向肺癌基因的siRNA纳米药物吸附连接所述纳米金三角片复合物，得到纳米金三角片/聚(4‑苯乙烯磺酸钠)/聚(二烯丙基二甲基氯化铵)‑siRNA，即靶向肺癌基因的多功能纳米药物递送载体。

【技术特征摘要】
1.一种靶向肺癌基因的多功能纳米药物递送载体，其特征在于，所述纳米药物递送载体包括纳米金三角片，所述纳米金三角片的表面连接复合物聚(4-苯乙烯磺酸钠)，形成纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)复合物；再在所述纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)复合物上连接聚(二烯丙基二甲基氯化铵)形成纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)/聚(二烯丙基二甲基氯化铵)复合物即纳米金三角片复合物；靶向肺癌基因的siRNA纳米药物吸附连接所述纳米金三角片复合物，得到纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)/聚(二烯丙基二甲基氯化铵)-siRNA，即靶向肺癌基因的多功能纳米药物递送载体。2.根据权利要求1所述的一种靶向肺癌基因的多功能纳米药物递送载体，其特征在于，所述靶向肺癌基因的siRNA纳米药物为靶向人类肺癌PD-L1、EGFR、KRAS任一种基因的siRNA纳米药物。3.根据权利要求1所述的一种靶向肺癌基因的多功能纳米药物递送载体，其特征在于，包括以下一种或多种特征：-所述聚(4-苯乙烯磺酸钠)平均分子量为：50000-150000Mw；-所述聚(二烯丙基二甲基氯化铵)平均分子量为：50000-400000Mw；-所述纳米药物递送载体平均直径为40-120nm。4.根据权利要求1所述的一种靶向肺癌基因的多功能纳米药物递送载体，其特征在于，所述纳米金三角片与所述靶向肺癌基因的siRNA纳米药物的质量比例为(5-8):1。5.一种靶向肺癌基因的多功能纳米药物递送载体的制备方法，其特征在于，包括：S1：合成纳米金三角片：通过碘化钾或碘化钠以及抗坏血酸，将纳米金球蚀刻为纳米金三角片；S2：在所述纳米金三角片表面连接复合物聚(4-苯乙烯磺酸钠)，得到纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)复合物；S3：再将所述纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)复合物表面连接复合物聚(二烯丙基二甲基氯化铵)，得到所述纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)/聚(二烯丙基二甲基氯化铵)复合物；S4：将靶向肺癌基因的siRNA纳米药物与所述纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)/聚(二烯丙基二甲基氯化铵)通过静电吸附作用进行相连接，得到产物纳米金三角片/聚(4-苯乙烯磺酸钠)/聚(二烯丙基二甲基氯化铵)-siRNA。6.根据权利要求5所述的一种靶向肺癌基因的多功能纳米药物递送载体的制备方...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔大祥，刘彬，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：上海,31