一种检测黄曲霉毒素B1的试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种检测黄曲霉毒素B1的试剂盒及其制备方法，涉及化学测试分析技术领域。试剂盒的制备方法，包括制备铂金二氧化硅纳米微球信号标签和四氧化三铁纳米微球捕获剂；再将制备好的上述试剂混合放入玻璃容器中，然后超声，再加热；将反应所得的产物反复用磁场清洗，分散到水中；再将反应所得的产物溶液滴入反应板的各个反应孔内，则得到检测食品中黄曲霉素B1的试剂盒。本发明专利技术中铂金二氧化硅纳米微球的引入在很大程度上解决了自然酶存在分离纯化难、合成成本高、耐酸碱性差等缺点。本发明专利技术中适配体的对于小分子的结合力强，空间位阻小，很适合对小分子进行检测。本发明专利技术中采用磁力吸附可以提高ELISA的检测性能。

【技术实现步骤摘要】
一种检测黄曲霉毒素B1的试剂盒及其制备方法
本专利技术涉及化学测试分析
，具体的说，涉及一种可视化检测黄曲霉毒素B1的试剂盒及其制备方法。
技术介绍
黄曲霉毒素B1(AFB1)是由黄曲霉寄生曲霉产生的次生代谢产物，主要存在于土壤、动植物和坚果中。其中，最容易受AFB1污染的食品有花生、玉米、稻米、大豆、小麦等。AFB1在已知的霉菌毒素中毒性最大，是已知的化学物质中致癌性最强的一种，它对人类健康的危害十分严重，可引发人类肝癌和食道癌。AFB1对人和动物都具有强烈的毒性，主要表现对肝脏的损害，微量持续摄入，可造成慢性中毒，引起纤维性病变，致使纤维组织增生。国家质检总局规定AFB1是大部分食品的必检项目之一，随着市场监管范围的扩大以及检测指标限量值的降低，对检测技术的要求也越来越高。因此，发展简便快速的方法检测食品中的AFB1以满足市场需求显得十分迫切。目前，检测AFB1的方法主要有高效液相色谱法、液相色谱/质谱联用法、免疫层析法、荧光光度法和酶联免疫分析法等。高效液相色谱法和液相色谱/质谱联用法能够获得较高的检测准确度，但是其检测周期长，仪器成本高，并且需要培养专业的操作人员，因此本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测食品中黄曲霉素B1的试剂盒的制备方法，其特征在于，包括：步骤1、制备铂金二氧化硅纳米微球信号标签和四氧化三铁纳米微球捕获剂；步骤2、将步骤1制备好的所述铂金二氧化硅纳米微球信号标签与所述四氧化三铁纳米微球捕获剂混合放入玻璃容器中，然后超声、加热得到产物；步骤3、将步骤2所制备的产物反复用磁场清洗，分散到水中得到产物溶液；步骤4、再将步骤3所制备的产物溶液滴入反应板的各个反应孔内，则得到检测食品中黄曲霉素B1的试剂盒。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测食品中黄曲霉素B1的试剂盒的制备方法，其特征在于，包括：步骤1、制备铂金二氧化硅纳米微球信号标签和四氧化三铁纳米微球捕获剂；步骤2、将步骤1制备好的所述铂金二氧化硅纳米微球信号标签与所述四氧化三铁纳米微球捕获剂混合放入玻璃容器中，然后超声、加热得到产物；步骤3、将步骤2所制备的产物反复用磁场清洗，分散到水中得到产物溶液；步骤4、再将步骤3所制备的产物溶液滴入反应板的各个反应孔内，则得到检测食品中黄曲霉素B1的试剂盒。2.如权利要求1所述的检测食品中黄曲霉素B1的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤2具体包括：所述的将步骤1制备好的所述铂金二氧化硅纳米微球信号标签与所述四氧化三铁纳米微球捕获剂混合放入玻璃容器中反应的时间至少为20min；所述的超声的时间为5min，所述的加热的条件为95℃以上持续10min；所述的铂金二氧化硅纳米微球信号标签的粒径为40nm～900nm；所述的四氧化三铁纳米微球捕获剂的粒径为80nm～900nm；所述铂金二氧化硅纳米微球信号标签和所述四氧化三铁纳米微球捕获剂的体积比为1：1。3.如权利要求2所述的检测食品中黄曲霉素B1的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤2中：所述的将步骤1制备好的所述铂金二氧化硅纳米微球信号标签与所述四氧化三铁纳米微球捕获剂混合放入玻璃容器中反应的时间为20min；所述的铂金二氧化硅纳米微球信号标签的粒径为900nm；所述的四氧化三铁纳米微球捕获剂的粒径为400nm。4.如权利要求1所述的用于检测食品中黄曲霉素B1的试剂盒的制备方法，其特征在于，制备所述铂金二氧化硅纳米微球信号标签具体包括以下步骤：步骤A1、将四氯金酸和柠檬酸三钠用去离子水定容后加入硼氢化钠溶液搅拌后获得金纳米粒子，将所述金纳米粒子离心洗涤后分散在水中，得到金纳米粒子溶液；步骤A2、将三乙胺加入水搅拌后，加入十六烷基三甲基溴化铵、水杨酸，正硅酸乙酯反应后，再加入盐酸甲醇溶液反应，取以上配置而成的部分溶液加入3-氨丙基三乙氧基硅烷，搅拌后得到氨基化二氧化硅纳米微球，将所述氨基化二氧化硅纳米微球离心清洗取沉淀后分散在水中，得到氨基化二氧化硅纳米微球溶液；步骤A3、将所述氨基化二氧化硅纳米微球加入所述金纳米粒子溶液，超声搅拌反应，得到红色的金二氧化硅纳米微球；步骤A4、将所述红色的金二氧化硅纳米微球离心洗涤后分散在水中，得到红色的金二氧化硅纳米微球溶液，在所述红色的金二氧化硅纳米微球溶液中加入氯铂酸后搅拌再加入硼氢化钠溶液反应，获得铂金二氧化硅纳米微球，分散到水中，得到铂金二氧化硅纳米微球溶液；步骤A5、取戊二醛原液加入到所述铂金二氧化硅纳米微球溶液孵育，将反应所得的溶液离心洗涤，分散到水中，得到戊二醛修饰过的铂金二氧化硅纳米微球溶液，再加入氨基化修饰的适配体DNA互补链并搅拌，获得所述铂金二氧化硅纳米微球信号标签。5.如权利要求4所述的用于检测食品中黄曲霉素B1的试剂盒的制备方法，其特征在于，制备所述铂金二氧化硅纳米微球信号标签具体包括：在所述步骤A1中，所述的将四氯金酸和柠檬酸三钠用去离子水定容后所得的溶液中，四氯金酸的浓度为2.5ⅹ10-2mmol/L，柠檬酸三钠的浓度为73.5mg/L；所述的加入硼氢化钠溶液与所述的将四氯金酸和柠檬酸三钠用去离子水定容后所得的溶液与硼氢化钠溶液的体积比为3：100，并且该溶液中硼氢化钠的浓度为3ⅹ10-3mol/L，所述的搅拌时间为10～15min；所述的金纳米粒子溶液的浓度为4～4.9mg/L；在所述步骤A2中，所述的将三乙胺加入水，所得的三乙胺水溶液浓度为2.7～2.76g/L，所述的加入十六烷基三甲基溴化铵、水杨酸与三乙胺的质量比为8：1～4：1.4～1.5，正硅酸乙酯、盐酸甲醇溶液、乙醇与三乙胺水溶液的体积比为4：25...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴龙，陈小强，徐歆，祝琳，
申请(专利权)人：湖北工业大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42