The invention relates to the field of chemical test and analysis technology, and relates to a visual detection method for aflatoxin B1. After the sample extract is added to the reagent kit for detecting aflatoxin B1 in food, the product is cleaned by magnetic field with detergent, then reacted with liquid A and B, and then stopped by adding terminating solution. The aflatoxin B1 standard colorimetric card in the reagent kit for detecting aflatoxin B1 in food is compared to obtain the content or range of aflatoxin B1 in the sample to be measured. Value. The detection process has the advantages of sensitivity, simplicity, portability and real-time detection. It can not only accomplish the qualitative detection of the target by naked eyes, but also quantitatively analyze the absorbance value of the color solution by enzyme label instrument.
【技术实现步骤摘要】
一种检测黄曲霉毒素B1的检测方法
本专利技术涉及化学测试分析
,具体的说,涉及一种检测黄曲霉毒素B1的检测方法。
技术介绍
黄曲霉毒素B1(AFB1)是由黄曲霉寄生曲霉产生的次生代谢产物,主要存在于土壤、动植物和坚果中。其中,最容易受黄曲霉毒素B1(AFB1)污染的食品有花生、玉米、稻米、大豆、小麦等。黄曲霉毒素B1(AFB1)在已知的霉菌毒素中毒性最大,是已知的化学物质中致癌性最强的一种,它对人类健康的危害十分严重,可引发人类肝癌和食道癌。黄曲霉毒素B1(AFB1)对人和动物都具有强烈的毒性,主要表现对肝脏的损害,微量持续摄入,可造成慢性中毒,引起纤维性病变,致使纤维组织增生。国家质检总局规定黄曲霉毒素B1(AFB1)是大部分食品的必检项目之一,随着市场监管范围的扩大以及检测指标限量值的降低,对检测技术的要求也越来越高。因此,发展简便快速的方法检测食品中的黄曲霉毒素B1(AFB1)以满足市场需求显得十分迫切。目前,检测黄曲霉毒素B1(AFB1)的方法主要有高效液相色谱法、液相色谱/质谱联用法、免疫层析法、荧光光度法和酶联免疫分析法等。高效液相色谱法和液相色 ...
【技术保护点】
1.一种检测黄曲霉毒素B1的检测方法,其特征在于,包括:步骤50、将样品提取液加入到检测食品中黄曲霉素B1的试剂盒中反应后,所得的产物用洗涤液进行磁场清洗,然后加入A液和B液进行反应,再加入终止液停止反应;步骤51、用所述检测食品中黄曲霉素B1的试剂盒中黄曲霉素B1标准比色卡进行比对,得到待测样品黄曲霉素B1的含量或范围值。
【技术特征摘要】
1.一种检测黄曲霉毒素B1的检测方法,其特征在于,包括:步骤50、将样品提取液加入到检测食品中黄曲霉素B1的试剂盒中反应后,所得的产物用洗涤液进行磁场清洗,然后加入A液和B液进行反应,再加入终止液停止反应;步骤51、用所述检测食品中黄曲霉素B1的试剂盒中黄曲霉素B1标准比色卡进行比对,得到待测样品黄曲霉素B1的含量或范围值。2.如权利要求1所述的一种检测黄曲霉毒素B1的检测方法,其特征在于:所述步骤50中,所述的将样品提取液加入到检测食品中黄曲霉素B1的试剂盒中反应是指在室温下反应,其反应时间为40~60min;所述的磁场清洗次数至少为3次;所述的加入所述A液和所述B液进行反应的反应时间为10~40min。3.如权利要求1所述的一种检测黄曲霉毒素B1的检测方法,其特征在于,在所述步骤50之前还包括:步骤011、将固体样品去皮粉碎,加入甲醇水溶液和石油醚,振荡,用滤纸过滤于分液漏斗中,静置分层,下层为固体样品的样品提取液;或,步骤021、称取液体样品于小烧杯中,用蒸馏水转移到分液漏斗中,加入三氯甲烷,加塞轻轻振摇,静置分层,然后放出下层三氯甲烷层,经盛有约预先用三氯甲烷湿润的无水Na2SO4的快速定性滤纸过滤于蒸发皿中,再加三氯甲烷于分液漏斗中,重复振摇提取,三氯甲烷层一并滤于蒸发皿中,最后用少量三氯甲烷洗涤过滤器,洗液并于蒸发皿中,水溶通风挥干;挥干冷却后,用甲醇溶解得液体样品的样品提取液。4.如权利要求1所述的一种检测黄曲霉毒素B1的检测方法,其特征在于,在所述步骤50之前还包括:步骤03、称取磷酸二氢钾,十二水合磷酸氢二钠,氯化钠和氯化钾,将称量的药品倒入烧杯中加水溶解,然后加入吐温20,将配制的溶液转移至容量瓶中,加蒸馏水定容后得到所述洗涤液;步骤04、称取醋酸钠、柠檬酸,然后加入双氧水定容,则得到所述A液;步骤05、取3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶于二甲基亚砜,后加入乙二胺四乙酸二钠,柠檬酸和甘油,用超纯水或蒸馏水或去离子水定容得到所述B液;步骤06、量取蒸馏水于试剂瓶中,缓慢加入浓硫酸,静置超声混匀,得到所述终止液。5.如权利要求4所述的一种检测黄曲霉毒素B1的检测方法,其特征在于:在所述步骤03中,磷酸二氢钾在所述洗涤液中的质量体积比为0.2g/L;十二水合磷酸氢二钠在所述洗涤液中的质量体积比为2.9g/L;氯化钠在所述洗涤液中的质量体积比为8.0g/L;氯化钾在所述洗涤液中的质量体积比为0.2g/L;吐温20与所述洗涤液的体积比为1:2000;在所述步骤04中,醋酸钠在所述A液中的质量体积比为5.44g/200mL;柠檬酸在所述A液中的质量体积比为0.64g/200mL;所述双氧水的浓度为30%;在所述步骤05中,3,3',5,5'-四甲基联苯胺与所述B液的质量体积比为0.06g/200mL;乙二胺四乙酸二钠与所述B液的质量体积比为0.08g/200mL;柠檬酸与所述B液的质量体积比为0.38g/200mL;甘油、二甲基亚砜与所述B液体积比为1:0.03:10;在所述步骤06中,浓硫酸的浓度为98%,浓硫酸与所述终止液的体积比为108.5:1000;所述静置的时间为30min;所述超声的时间为10min。6.如权利要求1~5中任意一项所述的一种检测黄曲霉毒素B1的检测方法,其特征在于,所述试剂盒包括:黄曲霉素标准比色卡,用于确定样品黄曲霉素B1的含量或范围;反应板,用于存放铂金二氧化硅纳米微球信号标签和四氧化三铁纳米微球捕获剂的混合液;盒子,装配在所述反应板底部;磁铁,放置于所述盒子内部。7.如权利要求6所述的一种检测黄曲霉毒素B1的检测方法,其特征在于,制备所述铂金二氧化硅纳米微球信号标签包括:步骤10、将四氯金酸和柠檬酸三钠用去离子水定容后加入硼氢化钠溶液搅拌后获得金纳米粒子,将所述金纳米粒子离心洗涤后分散在水中,得到金纳米粒子溶液;步骤11、将三乙胺加入水搅拌后,加入十六烷基三甲基溴化铵、水杨酸,正硅酸乙酯反应后,再加入盐酸甲醇溶液反应,取以上配置而成的部分溶液加入3-氨丙基三乙氧基硅烷,搅拌后得到氨基化二氧化硅纳米微球,将所述氨基化二氧化硅纳米微球离心清洗取沉淀后分散在水中,得到氨基化二氧化硅纳米微球溶液;步骤12、将所述氨基化二氧化硅纳米微球加入所述金纳米粒子溶液,超声搅拌反应,得...
【专利技术属性】
技术研发人员:吴龙,徐歆,陈小强,祝琳,周敏,
申请(专利权)人:湖北工业大学,
类型:发明
国别省市:湖北,42
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