一种酶联核酸适配体微孔板光学分析小分子的方法技术

本发明专利技术公开了一种酶联核酸适配体微孔板光学分析小分子的方法。本发明专利技术提供了一种检测待测样品中目标小分子的光学分析方法，包括如下步骤：将待测样品与固定于微孔板上的短链互补核酸竞争性地与酶标记的核酸适配体结合，再加入所述酶催化底物进行催化反应，产生检测信号，根据信号变化实现对目标小分子的检测；所述短链互补核酸与所述核酸适配体互补。本方法利用了核酸适配体可以和互补核酸链杂交的特性，目标小分子存在时，核酸适配体与目标小分子，不再与互补核酸链杂交。方法采用微孔板作为固相基底,利用酶标仪进行信号检测，便于快速检测多个样品，具有高通量，易实现自动化。

A Method for Optical Analysis of Small Molecules by Enzyme-Linked Nucleic Acid Adaptor Microporous Plate

The invention discloses a method for optical analysis of small molecules by an enzyme-linked nucleic acid aptamer microporous plate. The present invention provides an optical analysis method for detecting target small molecules in the sample to be tested, which includes the following steps: combining the sample to be tested with short-chain complementary nucleic acid fixed on the microporous plate competitively with the enzyme-labeled nucleic acid adapter, adding the enzyme-catalyzed substrate for catalytic reaction, generating a detection signal, and realizing the detection of target small molecules according to the change of the signal; Short-chain complementary nucleic acids complement the aptamers. This method takes advantage of the hybridization between the nucleic acid adapter and the complementary nucleic acid chain. When the target small molecule exists, the nucleic acid adapter and the target small molecule are no longer hybridized with the complementary nucleic acid chain. Methods Microporous plate was used as solid phase substrate, and enzyme label was used for signal detection. It was convenient for rapid detection of multiple samples with high throughput and easy to realize automation.

【技术实现步骤摘要】
一种酶联核酸适配体微孔板光学分析小分子的方法
本专利技术属于分析检测
，尤其涉及一种酶联核酸适配体微孔板光学分析小分子的方法。
技术介绍
核酸适配体(Aptamer)是从寡聚核苷酸文库中筛选得到的能够与靶分子高亲和力和高特异性结合的单链DNA或RNA。在特异性识别功能上，核酸适配体能够与传统的抗体相媲美。同时在生物传感方面，核酸适配体具有一些抗体所不具备的优势。例如，核酸适配体能够通过低成本的化学合成进行大量制备，很容易在核酸适配体上引入各种功能基团。它具有较高的热稳定性，便于长期储存和运输。因此，在对靶分子的分析检测中，基于核酸适配体的传感方法已经成为一种有力的工具。核酸适配体的目标分子涵盖了小分子、蛋白质、细胞等。其中不少小分子目标物在新陈代谢、环境分析、食品分析、药物分析、基础研究等领域具有重要意义，因此利用适配体检测小分子目标物引起了广泛的关注。目前很多小分子的核酸适配体已经被成功筛选得到。利用适配体检测小分子的常见方法包括荧光法、电化学方法、比色法、色谱法、酶分子标记等。目前基于酶联核酸适配体检测小分子的常用方法是将目标分子修饰到微孔板等固相基底表面，酶标记的适配体与本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用酶标记的识别目标小分子的核酸适配体和短链互补核酸修饰微孔板检测目标小分子的光学分析方法，包括如下步骤：a)将酶标记的识别目标小分子的核酸适配体和待测样品加入短链互补核酸修饰微孔板中反应，然后洗涤微孔板；所述短链互补核酸的序列与所述酶标记的识别目标小分子的核酸适配体的核酸序列全部或部分互补；b)向a)处理后的微孔板中加入所述酶的底物进行酶反应，产生检测信号，根据所述信号强度的变化实现检测目标小分子。

【技术特征摘要】
1.一种利用酶标记的识别目标小分子的核酸适配体和短链互补核酸修饰微孔板检测目标小分子的光学分析方法，包括如下步骤：a)将酶标记的识别目标小分子的核酸适配体和待测样品加入短链互补核酸修饰微孔板中反应，然后洗涤微孔板；所述短链互补核酸的序列与所述酶标记的识别目标小分子的核酸适配体的核酸序列全部或部分互补；b)向a)处理后的微孔板中加入所述酶的底物进行酶反应，产生检测信号，根据所述信号强度的变化实现检测目标小分子。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在所述将酶标记的识别目标小分子的核酸适配体和待测样品加入短链互补核酸修饰微孔板中反应前，还包括如下步骤：将所述酶标记的识别目标小分子的核酸适配体和待测样品混合温育。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述短链互补核酸修饰微孔板按照如下方法制备：将生物素标记的短链互补核酸通过包被在微孔板上的链霉亲和素固定在所述微孔板，得到短链互补核酸修饰微孔板。4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述酶为辣根过氧化物酶。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述酶标记的识别目标小分子的核酸适配体为将链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶与生物素标记的识别目标小分子的核酸适配体亲和连接得到。6.根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：所述光学分析方法为吸光度法或化学发光法。7.根据权利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于：所述目标小分子为黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A或三磷酸腺苷。8.根据权利要求1-7中任一所述的方...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵强，李亚飘，孙琳琳，
申请(专利权)人：中国科学院生态环境研究中心，
类型：发明
国别省市：北京,11