人NF186抗原、人NF186抗体检测试剂盒及其制备方法与应用技术

本发明专利技术提供了人NF186抗原、ELISA检测试剂盒及其制备方法与应用。人NF186抗原包括SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列，还提供了两种分别含有上述两种人NF186的抗原的检测试剂盒，以及同时含有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的抗原的检测试剂盒。该人NF186检测试剂盒，检测人血清中的NF186抗体，特异性强，反应灵敏度高，高通量、成本低，能够对慢性炎性脱髓鞘性多发性神经根神经病(CIDP)进行诊断，适于大规模推广应用。

Detection Kit of Human NF186 Antigen and Human NF186 Antibody and Its Preparation Method and Application

The invention provides human NF186 antigen, ELISA detection kit, preparation method and application. The human NF186 antigen includes the amino acid sequences shown in SEQ ID NO:1 and SEQ ID NO:2. Two test kits containing the above two human NF186 antigens and the antigens containing both SEQ ID NO:1 and SEQ ID NO:2 amino acid sequences are also provided. The human NF186 detection kit has strong specificity, high sensitivity, high throughput and low cost. It can diagnose chronic inflammatory demyelinating polyradicular neuropathy (CIDP), and is suitable for large-scale application.

【技术实现步骤摘要】
人NF186抗原、人NF186抗体检测试剂盒及其制备方法与应用
本专利技术涉及生物制药
，尤其涉及人NF186抗原、人NF186抗体检测试剂盒及其制备方法与应用。
技术介绍
慢性炎性脱髓鞘性多发性神经根神经病(chronicinflammatorydemyelinatingpolyradiculoneuropathy,CIDP)是一类由免疫介导的慢性运动感觉性周围神经病。该病在世界范围内较为常见，发病率为(1～9)/10万。根据临床表现，CIDP可分为经典型和变异型。经典型CIDP表现为对称的肢体无力和感觉障碍，腱反射减弱或消失，病程为慢性进展或缓解复发并持续≥8周。2010年欧盟神经学会/周围神经学会诊断标准将变异型CIDP分为远端获得性脱髓鞘性对称性神经病(distalacquireddemyelinatingsymmetric)、非对称型(Lewis－Sumnersyndrome)、纯运动型、纯感觉型和局灶型。在CIDP的发病机制中，细胞及体液免疫均发挥了作用。但长期以来，相关抗体的研究并未取得突破性进展。CIDP特异性抗体的研究首先集中在髓鞘蛋白，但目前并未发现髓鞘蛋白本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人NF186抗原，其特征在于，包括以下任意一种片段或者两种片段：片段1：NF186‑333，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；片段2：NF186‑519，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

【技术特征摘要】
1.一种人NF186抗原，其特征在于，包括以下任意一种片段或者两种片段：片段1：NF186-333，氨基酸序列如SEQIDNO.1所示；片段2：NF186-519，氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。2.一种权利要求1所述的人NF186抗原的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1、将NF186-333、NF186-519的2个片段的DNA序列分别进行基因合成，设计引物PCR扩增后，分别连接进表达载体，构建2个重组表达质粒；步骤2、将构建好的重组质粒分别转化进入表达菌，构建2个重组表达工程菌；步骤3、NF186-333、NF186-519的抗原片段的诱导表达及纯化。3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1中所述2个片段的引物对分别为：NF186-333-P1：核苷酸序列如SEQIDNO.3所示；NF186-333-P2：核苷酸序列如SEQIDNO.4所示；NF186-519-P1：核苷酸序列如SEQIDNO.5所示；NF186-519-P2：核苷酸序列如SEQIDNO.6所示。4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1中PCR扩增的反应体系为：H2O38.7ul；Buffer5ul；dNTP3ul；上引物1ul；下引物1ul；DNA1ul；TaqE0.3ul；扩增程序为：94度变性5min；94度变性45sec、57度150sec、72度90sec，32个循环；72度延伸10min。5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3中诱导表达的具体步骤为：将2个重组菌分别接种于LB培养液中摇菌至OD600至0.6-0.8时，按1:1000加入24mg/ml浓度的IPTG诱导4-6小时；所述步骤3中诱导表达后的纯化条件是：上样缓冲液：0.5MNaCl、20mMNa2HPO3、10mM咪唑；或者上样缓冲液：8M尿素、0.5MNaCl、20mMNa2HPO3、10mM咪唑；结合缓冲液：0.5MNaCl、...

【专利技术属性】
技术研发人员：王颖，郝洪军，张崇珍，
申请(专利权)人：武汉明德生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42